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鹅绒藤叶斑病病原菌鉴定及生物学特性研究

作　者: 张琳
导　师: 姜华
学　校: 辽宁师范大学
专　业: 微生物学
关键词: 鹅绒藤病原菌鉴定生物学特性
分类号: S435.672
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

鹅绒藤（Cynanchum chinense R.Br.）为萝藦科（Asclepiadacea）鹅绒藤属（Cynanchum）多年生草本植物，多生长在沿海、荒郊野岭等非农用耕地上。该属植物全草大部分可入药，其植物汁液的提取物具有抗肿瘤等多种功效，是一种很有开发价值的野生药用植物资源。笔者对大连地区海滨滩涂生长的鹅绒藤进行了实地考察，发现自然生境下鹅绒藤真菌病害多有发生，但有关病害种类鉴定等研究国内外鲜有报道。本文对辽宁省大连地区鹅绒藤发生的病虫害种类进行了初步调查，并对其叶斑病进行了病原菌鉴定及生物学特性研究，旨为鹅绒藤生产栽培中的病害防治提供理论依据。（1）鹅绒藤在自然生境下多发生叶斑病，该病害在6月显症，8-9月病情加重。2011年调查其病情指数为63.3、发病率96.7%；2012年调查数据显示病情指数上升至69.1、发病率100%。此外还发现鹅绒藤有白腐病发生。发现了两种昆虫：夹竹桃蚜（Aphis nerii）和红脊长蝽（Tropidothorax elegans Distant），其中夹竹桃蚜虫口密度较大、危害较重。（2）从鹅绒藤叶斑病感病叶片中分离出了4株真菌，其中菌株UN-P1单斑分离率较高为68.18%，菌株UN-P2分离率为6.82%。经致病性试验证明菌株UN-P1与菌株UN-P2无论是单独侵染或混合侵染，均可导致接种叶片发病，由此认为，鹅绒藤叶斑病致病菌是菌株UN-P1和菌株UN-P2。采用真菌通用引物ITS1和ITS4对菌株UN-P1和菌株UN-P2两株病原菌DNA进行rDNA-ITS测序、系统发育树构建及同源性比对，证明了菌株UN-P1为立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）、菌株UN-P2为球黑孢（Nigrosporasphaerica），与形态学鉴定结果一致。（3）两株病原菌的生物学特性：①菌株UN-P1菌丝在15℃-30℃下均能生长，最适生长温度均为24℃、致死温度为63℃，最适pH为7，最适湿度为50%，培养48-108小时为菌丝速长期，全黑暗环境有利于菌丝生长；最适碳源为蔗糖、氮源为尿素、无机盐为NaH2PO4、生长因子为维生素B1。②菌株UN-P2菌丝在5℃-35℃下能生长，最适生长温度为24℃、致死温度为68℃，最适pH为8，最适湿度为90%，培养48-108小时为菌丝速长期，全黑暗环境有利于菌丝生长。最适碳源为D-果糖、氮源为酵母膏、无机盐为K2HPO4、生长因子为萘乙酸。菌株UN-P2在15-35℃时产孢，最适产孢温度为24℃，全光照环境利于产孢，培养第4天时菌丝生长速率变缓，但产孢量持续增加；孢子萌发最适温度为25℃，最适pH为8，最适湿度为90%，全黑暗条件最适宜孢子萌发。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-9
1 文献综述  9-20
  1.1 鹅绒藤研究进展  9-13
    1.1.1 鹅绒藤属植物的分类与鉴别  9-11
    1.1.2 鹅绒藤的化学成分及药用价值  11-13
  1.2 丝核菌的研究进展  13-18
    1.2.1 丝核菌的分类  13-15
    1.2.2 丝核菌的危害与利用  15-16
    1.2.3 丝核菌的防治  16-17
    1.2.4 丝核真菌分离与保存方法  17-18
  1.3 黑孢霉的研究进展  18-19
    1.3.1 黑孢霉属真菌  18
    1.3.2 黑孢霉真菌病害循环与危害  18
    1.3.3 黑孢霉的防治  18-19
  1.4 本文的研究内容、目的及意义  19-20
    1.4.1 主要研究内容  19
    1.4.2 研究目的和意义  19-20
2 鹅绒藤病虫害种类调查  20-26
  2.1 方法与材料  20-21
    2.1.1 试验器材  20
    2.1.2 调查方法  20-21
  2.2 结果分析  21-25
    2.2.1 鹅绒藤叶斑病  21-23
    2.2.2 鹅绒藤其他病害  23-24
    2.2.3 鹅绒藤虫害  24-25
  2.3 小结  25-26
3 鹅绒藤叶斑病病原菌的分离与鉴定  26-37
  3.1 材料与方法  26-30
    3.1.1 实验材料  26
    3.1.2 实验方法  26-30
  3.2 结果与分析  30-36
    3.2.1 鹅绒藤叶病斑病原菌的分离  30-31
    3.2.2 鹅绒藤叶斑病病原真菌的纯化  31
    3.2.3 鹅绒藤叶斑病病原菌的侵染性实验  31-32
    3.2.4 鹅绒藤叶斑病病原菌的形态学鉴定  32-33
    3.2.5 病原菌的分子生物学鉴定  33-36
  3.3 小结  36-37
4 鹅绒藤叶斑病病原菌生物学特性研究  37-57
  4.1 材料与方法  37-42
    4.1.1 实验材料  37-38
    4.1.2 实验方法  38-42
  4.2 结果与分析  42-55
    4.2.1 温度对病原菌菌丝生长、产孢量、孢子萌发的影响  42-44
    4.2.2 pH 值对病原菌菌丝生长、产孢量、孢子萌发的影响  44-45
    4.2.3 湿度对病原菌菌丝生长、产孢量、孢子萌发的影响  45-46
    4.2.4 光照对病原菌菌丝生长、产孢量、孢子萌发的影响  46-47
    4.2.5 培养时间对病原菌菌丝生长、产孢量的影响  47-48
    4.2.6 最适培养基的筛选与正交试验  48-53
    4.2.7 病原菌生长曲线  53-54
    4.2.8 化学药剂对鹅绒藤叶斑病病原菌的影响  54-55
  4.3 结论与讨论  55-57
    4.3.1 结论  55-56
    4.3.2 讨论  56-57
参考文献  57-61
攻读硕士学位期间发表学术论文情况  61-62
致谢  62

鹅绒藤叶斑病病原菌鉴定及生物学特性研究

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