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CTAB透性化酵母细胞为核丝素蛋白为衣的载药双壁微球的制备和性能考察

作　者: 谭力清
导　师: 于明安
学　校: 重庆医科大学
专　业: 微生物与生化药学
关键词: 卡维地洛酵母细胞丝素蛋白双壁微球释放
分类号: R943
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的本实验旨在制备出一种以CTAB透性化处理的酵母细胞为核，丝素蛋白为壳的双壁微球，将降压药物卡维地洛载入细胞中达到较好的释放效果。所以在选择双壁微球的核材料和壳材料都尤为重要。根据大量参考文献可以确定丝素蛋白是一种优良的壳材料，另外根据我们之前的基础研究推测，酵母细胞通过CTAB透性化处理后有可能成为一种优良的核材料。依据以上分析做了如下实验。方法第一部分：以紫外分光光度计在波长200nm-400nm范围内对卡维地洛溶液进行扫描确定其最大吸收波长。对卡维地洛-酵母细胞微球的载药量测定方法的建立，对酵母细胞载药后和对其包衣后体外释放的测定方法的建立。第二部分：以未处理的、CTAB、NaCl和酸-碱分别处理的酵母细胞，利用PCM观察其表面形态变化，用TEM观察细胞的内部结构变化，用FT-IR、DSC和TGA图谱分析细胞处理后的结构成分变化，用共聚焦显微镜分析细胞不同处理后的透性化效果。第三部分：CTAB、NaCl和酸-碱处理的酵母细胞分别载入药物卡维地洛，以紫外分光光度计测定其载药量，用FT-IR、DSC和TGA分析载入药物后细胞结构成分的变化。第四部分：选择CTAB处理的酵母细胞做体外释放，因为此处理方法有较高的载药量而且根据前面的分析细胞的完整性也保持的较好，再利用丝素蛋白对载药的酵母细胞进行包衣成双壁微球，并与未包衣的酵母细胞进行体外释放比较。以SEM观察丝素蛋白对载药的酵母细胞微球的包衣效果。结果第一部分：通过用紫外分光光度计在波长200nm-400nm范围内对卡维地洛溶液进行扫描，确定其最大吸收波长为240nm。通过对卡维地洛-酵母细胞微球的载药量测定方法的建立，对酵母细胞载药后和对其包衣后体外释放的测定方法的建立，经方法学验证，该方法准确可靠、灵敏度高、操作简单。第二部分：以未处理的酵母细胞、CTAB、NaCl、和酸-碱处理的酵母细胞四个样品，在相差显微镜下观察到前三个样品的形态都是圆球形，而酸-碱处理的细胞呈现出不规则形态且高度聚集。还可以看到CTAB处理的酵母细胞壁内侧有明显的“黑点”， NaCl处理的酵母细胞发生了质壁分离，多数细胞呈现出不规则形态，仅有少数细胞仍然呈椭圆形，酸-碱处理得酵母细胞没有出现黑点且颜色很浅。TEM观察到CTAB处理的酵母细胞基本上保持细胞的完整性，NaCl处理的酵母细胞有部分已破损，酸-碱处理酵母细胞已绝大部分破损。FT-IR、DSC和TGA图谱显示出酵母细胞经过不同处理后在结构组成上的部分变化。共聚焦显微镜可以观察出CTAB处理的酵母细胞染色最深且整个细胞均被染色，NaCl处理的酵母细胞和酸-碱处理酵母细胞基本上都没有被染色上，说明CTAB处理后酵母细胞通透性增加。第三部分：以CTAB、NaCl和酸-碱分别处理的酵母细胞再分别载入药物卡维地洛，以紫外分光光度计测定其载药量分别为29.3%、10.51%、2.74%。FT-IR、DSC和TGA图谱与载入药物之前的细胞相比也有相应的变化。第四部分：CTAB处理的酵母细胞载药的体外胃模拟释放在2h时为92.2%，而包衣后即利用丝素蛋白对载药的CTAB处理的酵母细胞进行包衣后的体外胃模拟释放在2.0h为45%，24h时达到90.4%，所以利用丝素蛋白对酵母细胞包衣成双壁微球后达到较就明显的缓释作用。SEM图可以观察丝素蛋白在酵母细胞微球表面形成的包衣。结论本实验建立了利用CTAB透性化处理酵母细胞的方法，与其他处理方法相比有更高的载药量和对细胞本身的完整性保持更好。并且本实验通过对载药的细胞用丝素蛋白进行包衣，使之成为以CTAB透性化处理酵母细胞为核和以丝素蛋白包衣层为壳的双壁微球材料，可以较好的改善突释作用。

全文目录

英汉缩略语名词对照  6-7
摘要  7-10
ABSTRACT  10-14
前言  14-18
第一部分卡维地洛-酵母细胞微球的体外分析方法的建立  18-25
  1 材料与仪器  18-19
  2 方法和结果  19-23
  3 讨论  23
  4 小结  23-25
第二部分三种不同的方法对酵母细胞处理后的考察研究  25-37
  1 材料与仪器  25-26
  2 方法和结果  26-35
  3 讨论  35
  4 小结  35-37
第三部分三种不同方法处理的酵母细胞载入卡维地洛后的考察研究  37-42
  1 材料与仪器  37-38
  2 方法和结果  38-41
  3 讨论  41
  4 小结  41-42
第四部分对 CTAB 透性化处理的酵母细胞载药后进行丝素蛋白包衣的考察  42-46
  1 材料与仪器  42-43
  2 方法和结果  43-44
  3 讨论  44-45
  4 小结  45-46
全文总结  46-48
参考文献  48-52
文献综述  52-62
  参考文献  58-62
致谢  62-63
攻读硕士学位期间发表和撰写的论文目录  63-64

CTAB透性化酵母细胞为核丝素蛋白为衣的载药双壁微球的制备和性能考察

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