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大气混合污染物对大鼠血清及肺组织肺表面活性蛋白B表达的影响

作　者: 赵英姿
导　师: 李菁华；肖纯凌
学　校: 吉林大学
专　业: 病原生物学
关键词: 大气混合污染物肺表面活性蛋白B PM2.5 血清肺组织
分类号: R114
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的本实验制备大鼠染尘染毒后的动物模型,分析大气混合污染物对大鼠血清和肺组织中SP-B表达的影响,研究大气混合污染物对大鼠呼吸道损伤的作用机制,为控制大气污染、制定防治对策提供理论依据。方法本研究在乙醚麻醉下,通过将实验组大鼠注入含有PM2.5的生理盐水混悬液和吸入含有SO2、NO2、CO的空气混合气来建立动物染尘染毒模型。应用ELISA法测定血清和BALF中肺表面活性蛋白B(Pulmonary surfactant protein B,SP-B)水平,免疫组化法测定SP-B在肺组织中的表达,实时荧光定量RT-PCR检测肺组织SP-BmRNA的表达。结果染毒1d组、7d组和30d组大鼠BALF和血清中SP-B的含量与各自对照组相比较无明显变化;大鼠肺组织在染毒7d组SP-BmRNA的表达高于对照组和染毒1d组和30d组(P<0.05);染毒1d组和7d组SP-B蛋白的含量明显低于对照组(P<0.01),染毒30d组SP-B蛋白的含量高于对照组(P<0.05),染毒1d组大鼠肺组织中SP-B的表达明显低于染毒7d和30d组(P<0.01)。结论1、大气混合污染物所致急性炎症反应中,大鼠血清及BALF中SP-B含量均无明显变化,提示SP-B作为一种疏水蛋白可能不是肺组织受损伤敏感生物指标。2、免疫组化方法显示,在大气混合污染物的早期炎症反应(1 d和7d),由于肺组织受损,肺组织内的SP-B含量低于对照组,而在30d时,肺组织内SP-B的含量升高,说明肺组织的代偿性保护作用。3、在染毒7d时,肺组织中SP-B mRNA的表达水平上调,代偿性地合成SP-B蛋白。4、SP-B mRNA水平变化可作为早期肺损伤的敏感性生物学指标。SP-B是肺部表面活性物质的重要组分之一,受损肺组织早期可出现肺组织SP-B及SP-BmRNA表达的变化,为临床肺组织疾病的防治提供理论指导。

全文目录

提要  4-5
中文摘要  5-7
Abstract  7-9
英文缩略词表  9-12
引言  12-14
第1章文献综述  14-18
  1.1 SP-B 蛋白质结构和功能  14
  1.2 SP-B 的合成与调控  14-15
  1.3 SP-B 的生理作用  15-16
    1.3.1 促进气-液表面磷脂的吸附  15
    1.3.2 参与管状髓磷脂的形成  15-16
  1.4 SP-B 缺乏与肺疾病  16-17
    1.4.1 SP-B 缺乏与急性呼吸窘迫综合症  16
    1.4.2 SP-B 缺乏与特发性肺纤维化  16
    1.4.3 SP-B 缺乏与胎粪吸入综合症  16-17
    1.4.4 SP-B 功能异常与哮喘  17
    1.4.5 SP-B 缺乏与肺水肿  17
  1.5 展望  17-18
第2章材料与方法  18-28
  2.1 实验技术路线图  18-19
  2.2 主要仪器与设备  19
  2.3 主要试剂  19-20
  2.4 试剂配制  20-21
  2.5 实验动物  21
  2.6 实验方法  21-27
    2.6.1 PM2.5 的采集及混悬液的制备  21
    2.6.2 制备NO_2、SO_2、CO 空气混合气  21
    2.6.3 动物分组及模型的制备  21-22
    2.6.4 标本采集  22
    2.6.5 指标检测  22-27
  2.7 统计学分析  27-28
第3章结果  28-32
  3.1 大鼠血清中SP-B 的含量  28
  3.2 大鼠BALF 中SP-B 的含量  28-29
  3.3 大鼠肺组织中SP-B 蛋白的表达  29-30
  3.4 大鼠肺组织中SP-B mRNA 的表达  30-32
第4章讨论  32-34
第5章结论  34-35
参考文献  35-39
作者简介及在学期间发表的学术论文  39-40
致谢  40

大气混合污染物对大鼠血清及肺组织肺表面活性蛋白B表达的影响

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