学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

糖皮质激素受体参与慢性吗啡耐受的细胞内机制研究

作　者: 孙云菲
导　师: 于泳浩
学　校: 天津医科大学
专　业: 麻醉学
关键词: 糖皮质激素吗啡药物耐受性细胞凋亡磷脂酰肌醇-3-激酶蛋白激酶B 天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶-3
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 31次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

阿片类药物,比如吗啡,是临床治疗急慢性疼痛最有效的镇痛剂,但是其应用却受到了镇痛耐受和痛觉过敏的限制[1-3]。鉴于阿片类是疼痛治疗的主要药物,明确阿片耐受形成的机制并恢复其效能具有重要的临床意义。关于阿片耐受机制的研究很多,近年的研究指出,脊髓糖皮质激素受体可影响慢性吗啡耐受的形成,但是关于糖皮质激素受体参与吗啡耐受的细胞内机制目前还不清楚。磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(Phosphatidylinositol-3-kinase/Protein kinase B, PI3K/Akt)信号通路在细胞内分布广泛,是细胞内重要信号转导通路之一,其通过影响下游多种效应分子的活化状态,在细胞内发挥抑制凋亡、促进增殖的关键作用。有研究指出吗啡耐受的细胞毒性机制中伴有神经元的凋亡,亦有研究指出糖皮质激素受体可能影响PI3K/Akt信号转导通路的活性[7-9]。在慢性吗啡耐受的形成过程中,糖皮质激素受体参与慢性吗啡耐受的细胞内机制尚不清楚,其与PI3K/Akt信号转导通路间的联系还未见报道。本研究在慢性吗啡耐受大鼠模型的基础上,着重探讨糖皮质激素受体在吗啡耐受形成中的作用,期望这些研究结果能为日后吗啡耐受的相关治疗及研究提供重要信息。目的探讨糖皮质激素受体在大鼠慢性吗啡耐受形成中的作用及其细胞内机制。方法鞘内置管成功的健康雄性Sprague-Dawley大鼠80只,体重280～320g,随机分为4组(n=20)：对照组(C组)、慢性吗啡耐受组(M组)、吗啡+糖皮质激素受体激动剂Dex组(MD组)和吗啡+糖皮质激素受体拮抗剂RU38486组(MR组),分别于8：00和18：00鞘内注射生理盐水10μl、吗啡10μg、吗啡10μg+地塞米松4μg、吗啡10μg+RU384862μg,连续6d。分别于第1、3、5、7天8：30行热水浴甩尾实验,第7天行为学测量完毕后处死大鼠,取L3-5脊髓节段进行实验。Western blot(每组6只)和免疫荧光染色法(每组6只)检测上述各组大鼠脊髓背角P13K、pAkt以及Caspase-3的表达水平。结果连续6天给予吗啡后大鼠甩尾潜伏期随时间延长而缩短,提示吗啡耐受模型建立成功。合用糖皮质激素受体拮抗剂RU38486能延缓吗啡耐受的形成,而合用地塞米松则能促进啡耐受的形成。Western blot和免疫荧光染色结果均显示：与C组相比,M组大鼠脊髓背角PI3K、pAkt表达水平下调,Caspase-3表达水平上调；与M组相比,MR组PI3K、pAkt表达水平上调,Caspase-3表达水平下调,而MD组PI3K, pAkt表达水平下调,Caspase-3表达水平上调。免疫荧光双染色显示脊髓背角存在糖皮质激素受体和PI3K的共染区域。结论糖皮质激素受体可能通过PI2K/Akt信号通路参与慢性吗啡耐受的形成,而且此作用与改变脊髓背角神经元的凋亡密切相关。综上所述,经鞘内给予吗啡后形成了慢性吗啡耐受。本研究发现糖皮质激素受体在慢性吗啡耐受的形成机制中发挥重要作用,可能通过PI2K/Akt信号通路发挥其作用,提示我们可通过调节糖皮质激素受体的表达及活性来预防吗啡耐受,为日后吗啡耐受的预防及研究提供了新的思路。

全文目录

中文摘要  4-6
Abstract  6-10
缩略语/符号说明  10-12
前言  12-17
  研究现状、成果  12-16
  研究目的、方法  16-17
1.1 对象和方法  17-27
  1.1.1 实验动物  17
  1.1.2 试剂  17
  1.1.3 材料和仪器  17
  1.1.4 方法  17-27
1.2 结果  27-36
  1.2.1 大鼠行为学测定的改变  27-29
  1.2.2 吗啡耐受大鼠脊髓背角PI3K和pAkt蛋白表达变化  29-31
  1.2.3 吗啡耐受大鼠脊髓背角PI3K和pAkt的免疫荧光染色结果  31-33
  1.2.4 吗啡耐受大鼠脊髓背角GR和PI3K免疫共表达染色结果  33-34
  1.2.5 吗啡耐受大鼠脊髓背角Caspase-3的免疫荧光染色结果  34-36
1.3 讨论  36-42
  1.3.1 吗啡耐受模型的建立  36
  1.3.2 吗啡耐受形成的确认  36-37
  1.3.3 PI3K/Akt信号转导通路在吗啡耐受中的作用  37-40
  1.3.4 糖皮质激素受体在吗啡耐受形成过程中的作用  40
  1.3.5 糖皮质激素受体通过PI3K/Akt信号转导通路参与吗啡耐受的形成  40-42
结论  42-43
本研究的创新之处  43-44
参考文献  44-54
发表论文和参加科研情况说明  54-55
综述  55-65
  综述参考文献  60-65
致谢  65

糖皮质激素受体参与慢性吗啡耐受的细胞内机制研究

内容摘要

全文目录

相似论文