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裸鼠舌癌正位模型的建立及抗癌药物敏感性研究

作　者: 安（韦华）
导　师: 沈军
学　校: 天津医科大学
专　业: 口腔临床医学
关键词: 舌癌裸鼠正位模型颈淋巴结转移药物敏感性实验
分类号: R739.86
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

研究目的：1、将舌癌细胞株正位植入裸鼠舌体构建舌癌动物模型,通过模拟人体内环境,观察肿瘤细胞的生物学行为及淋巴结转移情况。2、通过MTT法进行抗癌药物敏感性试验,探讨动物模型中癌细胞与人类舌癌细胞系药敏实验结果的差异及该方法的临床应用价值。研究方法：1、将105/0.05ml Tca83细胞悬液正位移植于裸鼠左侧舌缘,隔日观察记录裸鼠体重,舌体成瘤情况,肿瘤的长短径(a、b),待裸鼠自然死亡或体重下降至原体重25%时,取舌部肿物及颌下淋巴结进行HE及免疫组化检测。2、将密度为5×105/ml舌癌细胞悬液以每孔200μl置于96孔板中。同时收集新鲜的裸鼠舌癌组织块,将组织块剪碎后200目滤网过滤,放置完全培养基中培养,随后将肿瘤细胞悬液以每孔5×105/孔加入96孔板中,化疗药物(平阳霉素、阿霉素、紫杉醇、顺铂)按浓度梯度50μg/ml、10μg/ml、5μg/ml、1μ g/ml、100ng/ml、25ng/ml、10ng/ml、1ng/ml、0.1ng/ml分为10组及空白对照组,每孔各加20μl,48h后加入MTT溶液20μl作用4h,随后加入DMSO溶解,并在波长为570nm下测量OD值。计算抑制率。结果：1、实验裸鼠在接种后第6-13天相继出现舌部肿瘤,成瘤率为92.3%,其中,通过HE染色及免疫组化染色,检测的淋巴结转移阳性率为39.47%。2、舌癌细胞细胞系及原代癌细胞药敏实验显示肿瘤细胞对化疗药物敏感性高低不一,但二者对相同药物的敏感性并无显著性差异(p>0.05),敏感性结果从高到低依次为：紫杉醇>顺铂>阿霉素>平阳霉素。结论：1、舌癌正位模型的成功建立,为研究在体内环境中舌癌的变化发展规律提供了重要的实验手段。通过Tca83所建立的人舌癌动物模型,虽不是最理想的舌癌淋巴结转移模型,但因其转移率接近临床统计数据,较好的模拟了人舌癌淋巴结转移的情况,为进一步建立高转移率的舌癌模型提供了充分的准备。2、药物敏感性实验对临床恶性肿瘤个性化药物治疗起指导性作用。通过对两种癌细胞的MTT检测说明舌癌细胞株和模型瘤体细胞的药物敏感性特征基本保持一致,其生物学行为在转换宿主后未发生明显改变。该模型的是模拟人体肿瘤的发展变化良好的研究模型,同时也为研究耐药基因及相关抗肿瘤药物提供了重要的信息。

全文目录

中文摘要  4-6
Abstract  6-10
缩略语/符号说明  10-11
前言  11-14
  研究现状、成果  11-13
  研究目的、方法  13-14
一、舌癌正位模立的建立  14-28
  1.1 对象和方法  14-17
    1.1.1 实验对象  14
    1.1.2 实验材料  14-15
    1.1.3 试验方法  15-17
  1.2 结果  17-22
    1.2.1 舌癌细胞的组织学特性  17
    1.2.2 肿物的生长特点  17-22
  1.3 讨论  22-27
    1.3.1 正位移植模型的特点  22-24
    1.3.2 肿瘤成瘤的影响因素  24-25
    1.3.3 舌癌模型的淋巴结转移  25-26
    1.3.4 理想的舌癌动物模型  26-27
  1.4 小结  27-28
二、抗癌药物敏感性研究  28-42
  2.1 对象和方法  28-29
    2.1.1 实验对象  28
    2.1.2 实验材料  28-29
    2.1.3 试验方法  29
    2.1.4 统计学处理  29
  2.2 结果  29-38
    2.2.1 细胞形态学观察  29-30
    2.2.2 药物敏感性比较  30-38
  2.3 讨论  38-40
    2.3.1 平阳霉素对Tca83的作用  38-39
    2.3.2 紫杉醇对Tca83的作用  39
    2.3.3 表阿霉素对Tca83的作用  39
    2.3.4 顺铂对Tca83的作用  39-40
    2.3.5 肿瘤细胞系与原代细胞敏感性比较  40
  2.4 小结  40-42
结论  42-43
展望  43-44
参考文献  44-48
发表论文和参加科研情况说明  48-49
附录  49-50
综述  50-64
  综述参考文献  59-64
致谢  64

裸鼠舌癌正位模型的建立及抗癌药物敏感性研究

内容摘要

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