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缺氧对巨噬细胞HMGB1释放的影响及机制

作　者: 李蕾
导　师: 陈国千
学　校: 南京医科大学
专　业: 临床检验诊断学
关键词: 缺氧高迁移率族蛋白B1 巨噬细胞丝裂原活化蛋白激酶
分类号: R392.11
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 33次
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内容摘要

目的观察缺氧对巨噬细胞高迁移率族蛋白B1（HMGB1）释放的诱导作用，并探讨其可能机制。方法采用巨噬细胞株RAW264.7，观察缺氧（1%O2或100μmol/LCoCl2）培养不同时间（6、12、24h）对细胞培养上清液中HMGB1含量、细胞HMGB1mRNA及细胞HMGB1胞内分布的影响。观察不同浓度N-乙酰半胱氨酸（NAC）、MAPK信号通路抑制剂(PD98059、SP600125、SB202190)对缺氧诱导细胞HMGB1释放的影响。HMGB1上清液含量和HMGB1mRNA表达水平分别采用酶联免疫吸附试验（ELISA）、实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测。结果巨噬细胞株RAW264.7缺氧（1%O2或100μmol/LCoCl2）培养12h后培养上清液中HMGB1含量及细胞HMGB1mRNA表达升高（P<0.05或P<0.01），24h时达到峰值；缺氧（1%O2）培养12h时，免疫荧光染色显示HMGB1出现核浆转移；NAC（10、100mmol/L）、PD98059（5、20μmol/L）、SP600125（5、20μmol/L）对巨噬细胞株RAW264.7缺氧（1%O2）培养24h后培养上清液中的HMGB1含量有明显抑制作用（P<0.01）。结论缺氧能诱导巨噬细胞释放HMGB1，其机制可能与胞内氧自由基产生及MEKJNK信号通路有关。

全文目录

英文缩略词表  5-6
中文摘要  6-7
英文摘要  7-8
前言  8-10
材料和方法  10-20
结果  20-27
讨论  27-31
结论  31-32
参考文献  32-37
文献综述（一）  37-45
  参考文献  41-45
文献综述（二）  45-53
  参考文献  49-53
攻读学位期间发表文章情况  53-54
致谢  54

缺氧对巨噬细胞HMGB1释放的影响及机制

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