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大火草根化学成分及生物活性研究

作　者: 于爱红
导　师: 杨林
学　校: 兰州理工大学
专　业: 微生物与生化药学
关键词: 大火草化学成分生物活性提取工艺
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

大火草（Anemone tomentosa（Maxim.）Pei）系毛茛科（Ranunculaceae）银莲花属（Anemone）多年生草本植物。大火草根供药用，具有清热解毒、排脓生肌、消肿散瘀、消食化积、截疟、杀虫等功效。广布于我国西南，西北，华北及华中等地。为更好地开发和利用我国大火草植物资源及药用价值，本文对甘肃产大火草根的化学成分和生物学活性进行了研究。对甘肃产大火草根化学成分进行了预实验，其中检出含黄酮类（二氢黄酮）、香豆素、内酯、强心甙、蒽醌及其甙类，皂苷（三萜皂苷）、糖及其苷、有机酸和酚类化合物；不含有生物碱、挥发性成分、氨基酸、多肽、蛋白质类化合物。对大火草根总黄酮、总皂苷和总多糖三类化学成分分别进行了生物学活性筛选试验：（1）以滤纸圆片法对2种供试菌株（金黄色葡萄球菌、大肠杆菌）抑制活性作以研究，结果表明：大火草根总黄酮、总皂苷及总多糖对2种供试菌均无明显抑制作用。（2）以MTT法对人肝癌细胞Hep-G2的抑制作用作以研究，结果表明：大火草根总黄酮对人肝癌细胞Hep-G2有明显抑制作用，总皂苷和总多糖对人肝癌细胞Hep-G2的抑制效果均不显著。（3）以Vc为对照，对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除作用作以研究，结果表明：总黄酮、总皂苷和总多糖与Vc比较具有较强的抗氧化能力，均呈明显剂量效应关系。其中，总黄酮对羟自由基的清除作用比Vc强，对超氧阴离子的清除作用较Vc弱；与总黄酮、总皂苷和Vc比较，总多糖抗氧化活性最弱。鉴于大火草根总黄酮、总皂苷及总多糖具有良好的抗肿瘤和抗氧化活性，本文采用单因素和正交实验法，分别以总黄酮、总皂苷和总多糖的提取率为考察指标，对其提取工艺分别进行了优选，实验结果表明，总黄酮提取最佳工艺：乙醇浓度为60%，提取时间为80min，料液比为1︰50，提取次数为3次，超声功率为90W；总皂苷提取最佳工艺：乙醇浓度为60%，水浴温度为75℃，提取时间为210min，料液比为1︰20；总多糖提取最佳工艺：提取时间为150min，料液比为1︰30，提取次数为3次，提取温度为90℃。以MTT法检测大火草根总黄酮对人肝癌细胞Hep-G2和SMMC-7721、人乳腺癌细胞MCF-7及人宫颈癌细胞Hela的生长抑制情况，结果表明：大火草根总黄酮对以上肿瘤细胞均有明显的抑制作用。在终浓度为1mg/mL时，对人肝癌细胞Hep-G2和SMMC-7721、人乳腺癌细胞MCF-7及人宫颈癌细胞Hela的抑制率均大于50%，细胞抑制活性均有明显的剂量依赖关系，IC₅₀分别为0.5298mg/mL、0.2047mg/mL、0.2877mg/mL和0.2738mg/mL。在体内，以移植性H22荷瘤小鼠为模型，大火草根总黄酮浓度为2.0g/kg、0.1g/kg、0.05g/kg时有不同程度的抑瘤作用，抑瘤率分别为38.57%、19.54%和13.92%，同样也表现出了一定的剂量依赖性。通过比较胸腺指数和脾脏指数发现，大火草根总黄酮对荷瘤小鼠的免疫功能具有抑制作用，降低了脾脏的免疫能力。本文通过对大火草化学成分的提取及生物活性研究，为今后大火草植物研究打下基础，为其抗肿瘤药物研发方面提供科学的数据支持，活性筛选发现大火草根具抗肿瘤活性，只是其抗肿瘤活性研究的开端以及大火草抗肿瘤药物研发的开端，具有良好的开发前景。

全文目录

摘要  7-9
Abstract  9-11
第1章绪论  11-17
  1 大火草概述  11-12
    1.1 大火草植物概述  11
    1.2 大火草根性状及药用价值  11-12
  2 大火草国内外研究现状  12-15
    2.1 大火草化学成分研究现状  12-13
    2.2 大火草生物活性及药用研究现状  13-14
    2.3 大火草形态解剖研究现状  14-15
    2.4 大火草植物栽培研究现状  15
    2.5 大火草应用研究现状  15
  3 立题依据及意义  15-17
第2章大火草根化学成分预实验  17-24
  2.1 前言  17
  2.2 实验部分  17-22
    2.2.1 实验材料  17-18
    2.2.2 实验方法  18-22
  2.3 结果与讨论  22-24
    2.3.1 实验结果  22-23
    2.3.2 讨论  23-24
第3章大火草根总黄酮、总皂苷和总多糖的生物活性预实验  24-40
  3.1 前言  24-26
  3.2 样品的制备  26-31
    3.2.1 实验部分  26-31
      1 实验材料  26
        药材  26
        试剂  26
        仪器  26
      2 实验方法  26-31
  3.3 生物活性研究  31-34
    3.3.1 抑菌活性研究  31-32
    3.3.2 抗氧化活性研究  32-34
    3.3.3 抗肿瘤活性研究  34
  3.4 结果与讨论  34-40
    3.4.1 实验结果  34-38
    3.4.2 结论与讨论  38-40
第4章大火草根总黄酮、皂苷和多糖提取工艺研究  40-62
  4.1 大火草根总黄酮超声提取工艺研究  40-47
    4.1.1 前言  40-41
    4.1.2 实验部分  41-47
  4.2 大火草根总皂苷提取工艺研究  47-54
    4.2.1 前言  47-48
    4.2.2 实验部分  48-53
    4.2.3 结论与讨论  53-54
  4.3 大火草根总多糖提取工艺研究  54-62
    4.3.1 前言  54-55
    4.3.2 实验部分  55-61
    4.3.3 结论与讨论  61-62
第5章大火草根总黄酮抗肿瘤活性研究  62-67
  5.1 前言  62
  5.2 实验部分  62-66
    5.2.1 实验材料  62-63
    5.2.2 实验方法与结果  63-66
  5.3 结论与讨论  66-67
第6章结语  67-69
  6.1 本论文的主要研究内容、结果及其意义  67-68
  6.2 展望  68-69
参考文献  69-74
致谢  74-75
附录 A 攻读学位期间所发表的学术论文目录  75-76
附录 B 论文附图及说明  76-79

大火草根化学成分及生物活性研究

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