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干蟾皮提取纯化工艺及化学成分研究

作　者: 曾洋
导　师: 董小萍
学　校: 成都中医药大学
专　业: 药物化学
关键词: 干蟾皮工艺研究化学成分
分类号: R284.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

干蟾皮为蟾蜍科动物中华大蟾蜍(Bufo bufo gargarizans Cantor)的干燥皮,现代药理学研究表明蟾皮提取物具有抗肿瘤、免疫调节、抗乙肝病毒等多种作用,其水溶性成分制剂华蟾素注射液临床上用于治疗各种癌症和乙型肝炎,疗效确切,在抗肿瘤方面取得了显著的效果。干蟾皮的药理作用越来越明确,临床应用也越来越广泛,为新药研发提供了良好的素材。为了探讨干蟾皮的化学成分,并希望从干蟾皮提取物中分离获得更多的活性物质,本文进行干蟾皮提取纯化工艺的研究,采用正交设计方法,对干蟾皮水提取物大孔吸附树脂纯化工艺进行了优化,同时采用薄层色谱法、紫外分光光度法、高效液相色谱法等手段进行了化学成分的鉴定及含量测定。筛选出最优纯化条件为：5倍柱体积量的水、4倍柱体积量的70%乙醇洗脱(A2B3C1)可得最大浸膏量；5倍柱体积量的水、2倍柱体积量的70%乙醇洗脱(A2B1C1)可得最大吲哚类总生物碱的量；7倍柱体积量的水、4倍柱体积量的70%乙醇洗脱(A2B3C3)洗脱可得最大脂蟾毒配基及华蟾酥毒基的总量。根据获得最大吲哚类总生物碱量的方法(A2B1C1),并通过反复硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶LH-20、重结晶等分离手段,从干蟾皮提取物的正丁醇和三氯甲烷部位中共分离得到6个化合物,并根据化合物的理化性质、对照品、波普数据及文献对照确定了化合物结构,分别为：蟾蜍噻咛(HC-1)、脂蟾毒配基(HC-2)、华蟾酥毒基(HC-3)、蟾毒灵(HC-4)、去乙酰华蟾毒它灵(HC-5)、远华蟾毒精(HC-6)。

全文目录

中文摘要  4-5
ABSTRACT  5-7
前言  7-9
第一章干蟾皮提取纯化工艺研究  9-28
  1.1 实验部份  9-26
    1.1.1 仪器与试剂  9
    1.1.2 药材来源  9-12
      1.1.2.1 性状鉴别  9
      1.1.2.2 理化鉴定  9-10
      1.1.2.3 干蟾皮原料吲哚类化合物的TLC薄层色谱法鉴定  10-11
      1.1.2.4 干蟾皮原料蟾蜍二烯内酯类化合物的TLC薄层层析鉴定  11-12
    1.1.3 药材提取纯化方法筛选  12-19
      1.1.3.1 提取纯化方法筛选  12-13
      1.1.3.2 五种提取物中蟾蜍噻咛的含量测定  13
      1.1.3.3 方法学考察  13-17
      1.1.3.4 蟾蜍噻咛含量测定  17-18
      1.1.3.5 药效学筛选  18
      1.1.3.6 小结  18-19
    1.1.4 纯化工艺的研究  19-26
      1.1.4.1 正交实验设计  19
      1.1.4.2 浸膏收率工艺筛选  19-20
      1.1.4.3 吲哚类总生物碱工艺筛选  20-23
      1.1.4.4 华蟾酥毒基和脂蟾毒配基工艺筛选  23-26
  1.2 结果与讨论  26-28
第二章干蟾皮化学成分的研究  28-38
  2.1 实验部份  28-31
    2.1.1 药材来源、仪器与试剂  28
    2.1.2 提取与分离  28-31
      2.1.2.1 药材提取  28-29
      2.1.2.2 成分分离  29-31
  2.2 化合物结果鉴定  31-37
    2.2.1 干蟾皮中分离得到的化合物的编号、名称和结构  31-32
    2.2.2 干蟾皮中化合物结构鉴定  32-37
  2.3 结果与讨论  37-38
致谢  38-39
参考文献  39-41
附图  41-58
附件一：本人在学期间公开发表的论文、专著及科研成果  58-60
文献综述—干蟾皮的研究进展  60-67
  参考文献  66-67

干蟾皮提取纯化工艺及化学成分研究

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