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普通枇杷与南亚枇杷杂交及杂种叶片形态与ISSR鉴定

作　者: 杜奎
导　师: 王永清
学　校: 四川农业大学
专　业: 果树学
关键词: 普通枇杷南亚枇杷杂交杂种鉴定
分类号: S667.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

远缘杂交是改良栽培品种普遍而有效的重要途径之一。本研究利用普通枇杷(Eriobotrya japonica Lindl.)和南亚枇杷(Eriobotrya bengalensis Hook. f.)进行种间正反杂交,并采用形态鉴定和ISSR标记技术对杂交后代进行鉴定,旨在将南亚枇杷的有益基因引入普通枇杷,对栽培品种实现较大尺度的遗传改良。得到以下主要结果：1.以‘大五星’为代表品种,进行了普通枇杷花粉短期(一个月)保存。结果表明,随着干燥时间增加,花粉活力极显著降低。低温有利于花粉短期保存,花粉在室温下最不耐贮藏；28℃干燥2h或3h,4℃保存效果较好,花粉活力达67.60%；而28℃干燥4h或5h,-20℃保存效果最好,花粉活力最高达72.77%。2.普通枇杷黏液分泌和柱头可受性呈现出先增高后降低的规律,在第4阶段最高,这正与花散粉同步,柱头可受性可持续较长时间。枇杷的花器构造适于自花授粉。3.通过荧光显微观察得知,授粉后6h,约90%花粉粒在柱头上萌发,形成花粉管；授粉后12h,花粉管经乳突细胞间进入花柱上端；授粉后24h,可见花粉管到达花柱中部；大约3/4花粉管在授粉后48h到达柱头底部附近。普通枇杷与南亚枇杷亲和性良好。普通枇杷与南亚枇杷正反交无明显差异。4.亲本组合、蕾期和授粉位置对坐果率有显著或极显著影响。对小蕾和树冠外围授粉有利于提高杂交坐果率。5.利用筛选出的UBC895和UBC899两条最适引物对包括亲本在内的50份供试材料的DNA进行PCR扩增,分别扩增出261和275条DNA带,其中多态性DNA条带分别为215和225,分别占总带数的82.4%和81.8%,平均每份材料分别产生4.3条带和4.5条多态性条带,多态性良好。6.经引物UBC895扩增出‘大五星’枇杷与南亚枇杷特异性条带各一条,23个子代中22个鉴别为真杂种,杂种率95.7%；经引物UBC899扩增出‘大五星’特异性条带三条,23个子代中20个鉴别为真杂种,杂种率87.0%。被两引物同时鉴定出的子代为19,杂种率82.6%。经引物UBC895扩增出4-1-5枇杷与南亚枇杷特异性条带各一条,24个子代中19个鉴别为真杂种,杂种率79.2%；经引物UBC899扩增出4-1-5枇杷特异性条带三条,24个子代全部为真杂种,杂种率100%。被两引物同时鉴定出的子代为19,杂种率79.2%。经ISSR鉴定的真杂种在叶片形态均介于双亲之间,略偏母本。综合ISSR和形态鉴定,获得‘大五星’枇杷与南亚枇杷正反交真杂种分别10和9个,4-1-5枇杷与南亚枇杷正反交真杂种各11个和8个,共获得正反交真杂种21个和17个,合38个,同时杂交子代中个体发育表现出多样性,为后续研究和选择提供了材料。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-8
目录  8-10
1 文献综述  10-17
  1.1 果树远缘杂交的概念、意义和理论依据  10
  1.2 果树远缘杂交的成就  10
  1.3 果树远缘杂交的障碍及其克服途径  10-14
    1.3.1 果树远缘杂交的障碍  10-12
    1.3.2 果树远缘杂交障碍的克服途径  12-14
  1.4 果树远缘杂交后代的遗传变异  14-15
  1.5 杂交后代的鉴定  15-17
    1.5.1 形态鉴定  15
    1.5.2 染色体鉴定  15
    1.5.3 同工酶鉴定  15
    1.5.4 分子鉴定  15-17
2 本研究的目的和意义  17
3 材料与方法  17-21
  3.1 材料  17-18
  3.2 方法  18-21
    3.2.1 花粉的采集  18
    3.2.2 花粉的干燥与保存  18
    3.2.3 花粉活力检测  18
    3.2.4 柱头黏液分泌观察和可受性检测  18
    3.2.5 去雄、授粉  18-19
    3.2.6 花粉在柱头上萌发和花粉管的生长观察  19
    3.2.7 坐果率统计  19
    3.2.8 播种  19
    3.2.9 子代ISSR鉴定  19-21
    3.2.10 子代叶片形态鉴定  21
4 结果与分析  21-27
  4.1 普通枇杷花粉的短期保存  21-22
  4.2 花药散粉观察、柱头黏液分泌观察和可受性检测  22
  4.3 花粉在柱头上萌发和花粉管的生长观察  22
  4.4 坐果率统计  22-25
    4.4.1 蕾期授粉对坐果率的影响  23-24
    4.4.2 树冠不同位置授粉对坐果率的影响  24
    4.4.3 亲本组合对坐果率的影响  24-25
  4.5 子代早期鉴定  25-27
    4.5.1 ISSR分子标记鉴定  25-26
    4.5.2 叶片形态鉴定  26-27
5 讨论与结论  27-30
  5.1 花粉的保存  27-28
  5.2 大蕾期授粉的合理性  28
  5.3 普通枇杷与南亚枇杷亲和性良好  28
  5.4 提高枇杷远缘杂交坐果率的措施  28-29
  5.5 子代早期鉴定  29-30
参考文献  30-37
附录  37-43
致谢  43-44
攻读硕士学位期间已发表的学术论文目录  44

普通枇杷与南亚枇杷杂交及杂种叶片形态与ISSR鉴定

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