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山药蛋白酶解多肽液及多肽酒制备工艺研究

作 者: 李小强
导 师: 陈茂彬
学 校: 湖北工业大学
专 业: 发酵工程
关键词: 怀山药 蛋白酶 水解 多肽 发酵 保健酒
分类号: TS262.91
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
下 载: 209次
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内容摘要


山药是我国传统保健食品之一,在众多品种中,以古怀庆府今河南焦作境内的怀山药最负盛名,其含有丰富的营养物质,既是我国传统食用食品,又是入药的地道药材,素有“怀参”的美称。本文筛选出了适合山药蛋白水解蛋白酶,对单酶和两种蛋白酶复合水解条件做了详细研究,将得到的怀山药多肽液,进一步制备成具有一定保健功能的多肽酒,并对山药蛋白水解剩余物质进行了发酵研究。主要研究成果如下:1、采用蛋白酶水解法制备山药多肽液,考察了五种不同蛋白酶对山药蛋白水解的影响,选择水解温度、pH、底物浓度、酶底物比、时间五个因素分别进行单因素实验,以水解液中多肽含量为指标,综合各方面的因素,从中筛选出了水解效果比较好的两种蛋白酶:中性蛋白酶、加链霉蛋白酶。2、在单因素实验基础上,对中性蛋白酶、加链霉蛋白酶采用正交试验方法进行水解条件优化,其结果如下:中性蛋白酶,底物浓度20%、酶水解温度45℃、pH6.0、加酶量8%、水解时间4.0h;加链霉蛋白酶,底物浓度20%、酶水解温度40℃、pH6.0、加酶量12%、水解时间4.0h。在此条件下,水解液中多肽含量分别为1.458g/L、1.395g/L。3、在单一蛋白酶水解基础上,进行了两种蛋白酶复合水解研究,结果表明:在蛋白酶使用总量一定情况下,采用不同蛋白酶分步接力水解的效果要好于一次性加入混合酶同步酶解,水解液中多肽含量分别为1.773g/L和1.591g/L。两种蛋白酶分步加入最佳组合条件为:中性蛋白酶水解2.5h后加入加链霉蛋白酶再水解1.5h,加链霉蛋白酶和中性蛋白酶的比例为1:3,并且在进行第二步水解前不需要进行灭酶操作。4、在山药蛋白水解前,需要对山药蛋白进行预处理,可以使蛋白质结构变的松散,便于水解。预处理方式有很多种,本文采用的是热处理的方法。预处理最佳单因素条件为:预处理温度80℃、预处理时间15min。5、对蛋白酶水解剩余物质进行发酵研究,选择甜酒曲和干酵母的添加量、发酵液的起始pH值、加水量、发酵温度及发酵时间六个因素分别进行单因素实验,以发酵液中总糖、总酸及酒精度为指标,结果如下:甜酒曲的添加量0.4%、干酵母的添加量0.2%、发酵液的起始pH值4.5、加水量1:3、温度30℃、发酵时间7d。

全文目录


摘要  5-6
Abstract  6-13
第1章 引言  13-24
  1.1 我国山药资源的种类及分布  14
  1.2 怀山药  14-15
  1.3 山药中主要营养物质与活性成分  15-17
    1.3.1 山药蛋白质和氨基酸  15-16
    1.3.2 山药多糖  16
    1.3.3 山药皂苷  16
    1.3.4 常量和微量元素  16-17
  1.4 山药产品的开发  17
  1.5 多肽的研究及应用  17-20
    1.5.1 多肽简介  17-18
    1.5.2 多肽的作用机理  18
    1.5.3 多肽的制备方法  18-19
    1.5.4 国内外多肽研究现状  19-20
    1.5.5 怀山药多肽的研究现状  20
  1.6 蛋白酶水解原理  20-22
    1.6.1 蛋白酶概述  20-21
    1.6.2 蛋白酶水解原理  21-22
  1.7 水解液中多肽含量的检测方法  22
    1.7.1 酸溶蛋白质含量的测定  22
    1.7.2 游离氨基酸含量的测定  22
    1.7.3 水解液中多肽含量的计算  22
  1.8 本课题研究的意义以及主要内容  22-24
    1.8.1 本课题研究的意义  22-23
    1.8.2 本课题研究的主要内容  23-24
第二章 怀山药蛋白质单酶水解研究  24-37
  2.1 实验材料  24-26
    2.1.1 原料  24-25
    2.1.2 酶制剂  25
    2.1.3 试剂  25
    2.1.4 试剂配制方法  25-26
    2.1.5 主要仪器设备  26
  2.2 试验方法  26-27
    2.2.1 实验流程  26
    2.2.2 检测方法  26-27
  2.3 制备山药多肽蛋白酶的筛选  27-28
  2.4 酶水解单因素实验  28-29
    2.4.1 底物浓度对山药蛋白水解的影响  28
    2.4.2 温度对山药蛋白水解解的影响  28
    2.4.3 pH 对山药蛋白水解的影响  28-29
    2.4.4 时间对山药蛋白水解的影响  29
    2.4.5 [E]/[S]对山药蛋白水解的影响  29
    2.4.6 水解条件的优化  29
  2.5 结论与分析  29-36
    2.5.1 怀山药多肽制备的蛋白酶的筛选结果  29-30
    2.5.2 水解单因素实验结果  30-33
    2.5.3 蛋白酶筛选结果  33
    2.5.4 水解条件正交试验设计  33-36
  2.6 本章小结  36-37
第三章 怀山药蛋白复合酶水解研究  37-43
  3.1 实验材料  37-38
    3.1.1 原材料  37
    3.1.2 主要试剂  37-38
    3.1.3 主要仪器设备  38
    3.1.4 试剂配制方法  38
  3.2 试验方法  38
    3.2.1 山药多肽双酶法水解方案  38
    3.2.2 工艺流程  38
    3.2.3 山药多肽含量的测定方法  38
  3.3 双酶水解方式选择  38-39
  3.4 双酶分步水解条件的确定  39-40
    3.4.1 加酶顺序的确定  39
    3.4.2 水解时间的确定  39
    3.4.3 双酶配比的确定  39-40
    3.4.4 双酶分步水解是否灭酶对水解的影响  40
  3.5 结果与分析  40-42
    3.5.1 加酶顺序对水解效果的影响  40-41
    3.5.2 水解时间对水解效果的影响  41
    3.5.3 双酶配比对酶解的影响  41-42
    3.5.4 双酶分步水解灭酶与否对酶解的影响  42
  3.6 本章小结  42-43
第四章 预处理对蛋白酶水解效果影响的研究  43-47
  4.1 实验材料  43-44
    4.1.1 原材料  43
    4.1.2 试剂  43
    4.1.3 主要仪器设备  43
    4.1.4 试剂配制方法  43-44
  4.2 试验方法  44
    4.2.1 酶解反应  44
    4.2.2 工艺流程  44
    4.2.3 水解液中多肽含量测定方法  44
  4.3 热处理单因素实验  44
    4.3.1 热处理温度对山药蛋白酶解效果的影响  44
    4.3.2 热处理时间对山药蛋白酶解效果的影响  44
  4.4 结论与分析  44-46
    4.4.1 热处理温度对山药蛋白酶解效果影响结果  44-45
    4.4.2 热处理时间对山药蛋白酶解效果影响结果  45-46
  4.5 本章小结  46-47
第五章 山药酒发酵研究  47-57
  5.1 实验材料  47-48
    5.1.1 原材料  47
    5.1.2 试剂  47-48
    5.1.3 仪器设备  48
    5.1.4 试剂配制方法  48
  5.2 试验方法  48-50
    5.2.1 工艺流程  48-49
    5.2.2 操作要点说明  49
    5.2.3 测定方法  49-50
  5.3 发酵单因素实验  50-51
    5.3.1 甜酒曲用量对发酵的影响  50
    5.3.2 干酵母用量对发酵的影响  50
    5.3.3 发酵液起始 pH 对发酵的影响  50
    5.3.4 加水量对发酵的影响  50
    5.3.5 温度对发酵的影响  50-51
    5.3.6 发酵时间对发酵的影响  51
  5.4 结论与分析  51-56
    5.4.1 甜酒曲用量对发酵的影响结果  51
    5.4.2 干酵母用量对发酵的影响结果  51-52
    5.4.3 发酵液起始 pH 对发酵的影响结果  52
    5.4.4 加水量对发酵的影响结果  52-53
    5.4.5 温度对发酵的影响结果  53
    5.4.6 发酵时间对发酵的影响结果  53-56
  5.5 本章小结  56-57
第六章 怀山药多肽酒制备工艺初探  57-61
  6.1 怀山药多肽酒制备工艺  57-58
    6.1.1 传统工艺流程图  57
    6.1.2 酶法制备多肽酒工艺流程图  57-58
  6.2 操作要点  58-59
    6.2.1 怀山药预处理  58
    6.2.2 蛋白酶水解  58
    6.2.3 浸提  58-59
    6.2.4 调配勾兑  59
    6.2.5 冷沉  59
  6.3 怀山药多肽酒指标要求  59-60
    6.3.1 感官要求  59
    6.3.2 理化指标  59-60
    6.3.3 卫生指标  60
    6.3.4 食品添加剂  60
  6.4 检验方法  60-61
    6.4.1 感官检验  60
    6.4.2 理化指标检验  60-61
第七章 结论与展望  61-63
  7.1 结论  61-62
  7.2 创新点  62
  7.3 展望  62-63
参考文献  63-67
致谢  67-68
发表论文目录  68

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中图分类: > 工业技术 > 轻工业、手工业 > 食品工业 > 酿造工业 > 各种酒及其制造 > 药酒
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