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诺西肽发酵工艺的放大实验

作　者: 张贵良
导　师: 何建勇
学　校: 沈阳药科大学
专　业: 微生物与生化药学
关键词: 诺西肽发酵工艺提取稳定性
分类号: TQ920.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

诺西肽(Nosiheptide)是由活跃链霉菌(Streptomyces actuosus)产生的含硫多肽类抗生素，现已被开发成一种新型的非吸收型饲料添加剂。本文是在实验室研究的基础上，对诺西肽的生产工艺进行了放大实验，并对影响产品质量的因素进行了研究，以适应工业化生产的要求。首先，我们在10L种子罐上进行了接种量和种龄的研究，确定了最适的接种量为1％，最适的种龄为28小时；通过对50L发酵罐转种量和补料分批发酵工艺的研究，确定了10％的转种量为最佳转种量；确定了前期补水，后期补糖的发酵工艺，使诺西肽的发酵单位达到了2，049μg／mL，使之初步达到了工业化生产的水平。然后，我们在100L和15吨发酵罐上进行放大实验，并取得了很好的重复效果，发酵单位分别达到了2，194μg／mL和2，066μg／mL，具备了工业化发酵生产的能力。为了使生产能够顺利的进行，我们对生产菌种的稳定性进行了考察，并建立了相关的标准：斜面传代最多为三代；斜面在4℃冰箱保存时间为一个月；供生产用的种子液在4℃冰箱保存不超过三天。确定了实验室提取诺西肽的工艺：发酵后的菌体经水洗、乙醇萃取、717树脂脱色、浓缩、结晶得到粗品；粗品经水洗、正己烷洗涤、真空干燥得到诺西肽精品。并对诺西肽的稳定性进行了初步的研究，诺西肽以干粉形式保存最稳定：以溶液保存时，在可见光的照射下很快分解，故溶液应在低温避光的条件下保存。本论文还对管碟法测定诺西肽生物效价进行了研究：对二计量法的主要影响因素进行了考察，确定了效价测定的最佳操作方案。

诺西肽发酵工艺的放大实验

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