学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

拉帕替尼诱导HER2阳性乳腺癌细胞凋亡机制及其与ABT-737的协同抗肿瘤作用

作　者: 聂秀青
导　师: 沈坤炜；柳光宇
学　校: 复旦大学
专　业: 肿瘤学
关键词: ABT-737 乳腺癌细胞 HER2 凋亡机制联合应用抗肿瘤作用协同作用细胞凋亡蛋白表达蛋白的浓度乳腺癌患者 Caspase 细胞效应细胞癌变抗凋亡拮抗 Western 阳性 induced
分类号: R737.9
类　型: 博士论文
年　份: 2010年
下　载: 281次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的：(1)探讨BH3-Only蛋白在拉帕替尼诱导Her2阳性乳腺癌细胞凋亡中的作用及其与FOXO3a蛋白的关系；(2)研究ABT-737和拉帕替尼联合应用与Her2阳性的SK-BR3细胞的联合作用及其机制。方法：(1)流式细胞仪Annexin V染色的方法检测细胞凋亡,Real TimePCR和Western blot检测Her2信号通路相关蛋白、BH3-Only家族蛋白和FOXO3a蛋白的表达在拉帕替尼处理后的差异,SiRNA技术抑制Bim和FOXO3a蛋白的表达,确定它们在拉帕替尼诱导的细胞凋亡中的作用以及FOXO3a蛋白对Bim蛋白表达的调控。(2)CCK-8法研究拉帕替尼和ABT-737单用和联合应用的细胞效应,利用中位效应原理并使用Calcusyn软件分析两药的联合作用。Western blot检测BCL-2家族蛋白在拉帕替尼单用和联合应用ABT-737后的变化,免疫共沉淀法检测ABT-737对BCL-2蛋白拮抗Bim蛋白促凋亡活性的抑制作用。结果：(1)拉帕替尼作用于HER阳性乳腺癌细胞株BT-474和SK-BR3,诱导细胞发生凋亡并伴有Caspase 3和BAX蛋白的激活,促凋亡的BH3-Only家族蛋白之一Bim蛋白和FOXO3a的表达增多,SiRNA抑制Bim和FOXO3a的表达,能够抑制拉帕替尼诱导的细胞凋亡,抑制FOXO3a表达的同时,Bim蛋白表达降低。(2)ABT-737和拉帕替尼联合应用于SK-BR3细胞能够产生协同作用；拉帕替尼诱导SK-BR3细胞Bim蛋白表达增高,抗凋亡的MCL-1蛋白表达降低；拉帕替尼诱导Bim蛋白表达增多同时与BCL-2蛋白结合也增多,ABT-737和拉帕替尼联合应用未改变拉帕替尼对BCL-2家族蛋白表达变化的影响,但是能够抑制BCL-2蛋白和Bim蛋白的结合。结论：(1)拉帕替尼能够诱导HER2阳性乳腺癌细胞BT474和SK-BR3细胞发生凋亡,拉帕替尼诱导细胞凋亡可能通过转录激活激活Bim蛋白的表达,激活线粒体细胞凋亡途径促进细胞发生凋亡,Bim蛋白的表达受FOXO3a蛋白的调控,因此,拉帕替尼可能通过抑制PI3K/AKT信号通路,促进FOXO3a蛋白的表达增多,转录激活Bim蛋白的表达,激活线粒体细胞凋亡途径是细胞发生凋亡。(2)ABT-737和拉帕替尼联合应用于Her2阳性的乳腺癌细胞SK-BR3能够产生协同作用,其协同作用的机制可能为一方面拉帕替尼抑制了抗凋亡蛋白MCL-1蛋白的表达,促进了ABT-737的抗肿瘤效应,另一方面ABT-737抑制了拉帕替尼诱导Bim蛋白表达增多同时发生的与BCL-2蛋白的结合增多,促进了Bim蛋白的促凋亡活性。

全文目录

主要缩略词  4-5
中文摘要  5-6
英文摘要  6-8
第一部分拉拉帕替尼诱导HER2 阳性乳腺癌细胞凋亡的分子机制  8-44
  前言  8-11
  材料和方法  11-22
  结果  22-37
  讨论  37-40
  参考文献  40-44
第二部分拉帕替尼和ABT-737的协同抗肿瘤作用  44-62
  前言  44-47
  材料与方法  47-49
  结果  49-55
  讨论  55-58
  参考文献  58-62
附录  62-76
  综述  62-70
  参考文献  70-76
发表和拟发表文章  76-77
参加学术会议  77-78
致谢  78-79

拉帕替尼诱导HER2阳性乳腺癌细胞凋亡机制及其与ABT-737的协同抗肿瘤作用

内容摘要

全文目录

相似论文