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哈蟆油酶解物制备工艺及药理活性研究

作　者: 张梅
导　师: 曲晓波
学　校: 长春中医药大学
专　业: 药理学
关键词: 酶解抗疲劳耐缺氧降血脂抗氧化
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:考察哈蟆油酶解工艺及酶解前后药理活性比较研究方法:1.哈蟆油酶解工艺实验以粘度为指标,通过单因素试验及L9(33)正交试验,考察碱性蛋白酶酶解温度、酶用量、酶解时间对哈蟆油粘度的影响,确定哈蟆油最佳酶解工艺。2.哈蟆油及其酶解物耐缺氧实验选用雄性BALB/C小鼠,设立哈蟆油(低、中、高剂量)组及其酶解物(低、中、高剂量)组和空白对照组,灌胃给药30 d后。分别测定小鼠的常压耐缺氧时间、亚硝酸钠中毒存活时间、急性脑缺血性缺氧存活时间。3.哈蟆油及其酶解物抗疲劳实验选用雄性BALB/C小鼠,设立哈蟆油(低、中、高剂量)组及其酶解物(低、中、高剂量)组和空白对照组,灌胃给药30 d后。分别测定小鼠体重、负重游泳时间、血清尿素氮含量、肝糖原含量以及游泳前后血乳酸的含量。4.哈蟆油及其酶解物抗氧化实验选用雄性BALB/C小鼠,设立哈蟆油(低、中、高剂量)组及其酶解物(低、中、高剂量)组、空白对照组及过氧化损伤模型,灌胃给药30d后。分别测定小鼠血液和肝脏中的过氧化脂质、氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Ps)的含量。5.哈蟆油及其酶解物降血脂实验选用雄性Wistar大鼠,随机分为基础饲料对照组、高脂模型组、哈蟆油(低、中、高剂量)组及其酶解物(低、中、高剂量)组,灌胃给药30 d后。分别测定各组大鼠的体重、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等含量。结果:研究结果表明:优选哈蟆油最佳酶解条件为:碱性蛋白酶酶用量120 u/g,酶解温度65℃,酶解时间40 min。耐缺氧活性比较研究发现,哈蟆油耐缺氧作用不明显,但酶解后具有显著的耐缺氧作用。抗疲劳活性比较研究发现,哈蟆油具有明显的抗疲劳活性,酶解物具有一定的抗疲劳活性。抗氧化作用比较研究发现,哈蟆油及其酶解物均具有抗氧化作用,且酶解物抗氧化作用进一步加强。降血脂活性比较研究发现,哈蟆油及其酶解物均具有显著的降血脂作用。结论:哈蟆油经酶解后的由最初粘度3127 mPa.s降为8.86 mPa.s,具有更好的流动性及溶解性,该酶解工艺方法简单、稳定、可行。哈蟆油具有明显的抗疲劳、抗氧化、降血脂作用,其酶解物具有耐缺氧、抗疲劳、抗氧化、降血脂作用。哈蟆油是一种具有多种药理作用和良好保健功效的天然产物,值得进一步开发利用。

全文目录

提要  6-8
ABSTRACT  8-10
英文缩略语  10-11
前言  11-12
一、文献综述  12-18
  1 哈蟆油概述  12
  2 哈蟆油化学成分研究  12-13
  3 哈蟆油蛋白概述  13-14
  4 酶解技术在制药中的应用  14-15
  5 粘度计的应用  15-16
  6 哈蟆油药理活性研究  16
  7 本研究的内容及意义  16-18
二、实验材料  18-20
  1 实验药材  18
  2 主要试剂  18
  3 主要仪器  18-19
  4 其他材料  19
  5 实验动物  19-20
三、实验方法  20-25
  1 哈蟆油酶解物的制备工艺研究  20-21
    1.1 加热时间的选择  20
    1.2 酶类型的选择  20
    1.3 正交试验  20-21
    1.4 正交试验设计  21
    1.5 验证试验  21
  2 哈蟆油及其酶解物的药理活性比较试验  21-25
    2.1 动物分组与给药剂量  21-22
    2.2 哈蟆油及其酶解物的耐缺氧试验  22
    2.3 哈蟆油及其酶解物的抗疲劳作用  22-23
    2.4 哈蟆油及其酶解物的抗氧化试验  23-24
    2.5 哈蟆油及其酶解物的降血脂试验  24
    2.6 统计学处理与结果判定  24-25
四、实验结果  25-38
  1 哈蟆油的酶解工艺  25-29
  2 哈蟆油及其酶解物的药理作用  29-38
五、结论  38-41
  1 哈蟆油粘度的降低  38
  2 哈蟆油及其酶解物的耐缺氧作用  38-39
  3 哈蟆油及其酶解物的抗疲劳作用  39
  4 哈蟆油及其酶解物的抗氧化作用  39
  5 哈蟆油及其酶解物的降血脂作用  39-40
  6 哈蟆油酶解工艺的综合评价  40
  7 问题与展望  40-41
致谢  41-42
参考文献  42-47
附件  47

哈蟆油酶解物制备工艺及药理活性研究

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