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丹参饮片炮制规范化研究及其近缘种有效成分的同时测定

作　者: 张慧
导　师: 张利
学　校: 四川农业大学
专　业: 植物学
关键词: 丹参炮制工艺质量标准指纹图谱丹参近缘种同时测定
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

丹参(Salvia miltiorrhiza)是唇形科(Lamiaceae)鼠尾草属(Salvia Linn.)多年生草本,其干燥根及根茎为历版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)规定的中药丹参的唯一来源。四川省中江县是川丹参的道地产区,因其色红,肉厚,有效成分含量高而享誉海内外。本研究以四川省中江产丹参为研究对象,对川丹参的炮制工艺进行了规范化研究；参照2010年版《中国药典》项下鉴别、检查项等方法,建立了炒丹参、酒丹参、醋丹参的质量标准；并对各炮制品的指纹图谱进行了研究,旨在为丹参质量标准的进一步完善提供理论依据。此外,本研究采用HPLC法建立了同时测定丹参及其近缘种中6种有效成分含量的方法,该方法稳定可靠,可用于丹参及其近缘种的质量控制。主要研究结果如下：1.丹参炮制工艺的研究：本实验采用L9(34)正交设计,确定了川产道地丹参各炮制工艺的最佳参数：炒丹参最佳工艺为,取净丹参片,70～80℃炒制5 min,饮片色泽加深,具焦香；酒丹参最佳工艺为,取净丹参,20%的黄酒浸润60 min,100-110℃炒制5 min,饮片具酒香；醋丹参最佳工艺为,取净丹参用20%的陈醋浸润60 min,70～80℃炒制20 min,饮片具醋香。2.丹参各炮制品质量标准研究：参考2010年版《中国药典》各鉴别、检查项等方法,分别对各炮制品进行了考察；以丹酚酸B和丹参酮ⅡA为对照对各炮制品进行TLC鉴别,结果显示各炮制品与对照品在相同位置均显示斑点；参照2010年版《中国药典》液相色谱法(附录ⅥD),分别测定了各炮制品中水溶性成分原儿茶醛、丹酚酸B、丹酚酸A和脂溶性成分隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA的含量。方法学考察表明,该方法稳定可靠、重现性好,平均回收率分别是原儿茶醛为95.2%,丹酚酸A为94.1%,丹酚酸B为91.4%,隐丹参酮为96.5%,丹参酮Ⅰ为97.9%,丹参酮ⅡA为98.0%, RSD依次为1.7%,1.9%,2.0%,1.8%,1.4%,1.0%；含量测定表明,经炮制后,丹酚酸A的含量显著提高为295%-317%；丹酚酸B含量的提高率为17.1%-18.1%；而其余成分均有不同程度的下降。综上,暂定各炮制品质量标准为：炒丹参、酒月参、醋丹参水分均不得高于13.0%；总灰分含量为、酸不溶性灰分分别不得过7.20%、0.820%,水溶性浸出物、醇溶性浸出物不得少于45.0%、34.0%；原儿茶醛的含量依次不得少于0.0400%、0.0400%、0.0300%,丹酚酸B的含量依次不得少于1.80%、1.80%、1.80%,丹酚酸A的含量依次不得少于0.190%、0.180%、0.180%,丹参酮Ⅰ的含量依次不得少于0.007%、0.008%、0.008%,隐丹参酮的含量依次不得少于0.0300%、0.0400%、0.0400%,丹参酮ⅡA的含量依次不得少于0.0800%、0.0900%、0.0900%。3.丹参饮片指纹图谱的研究：采用HPLC法以丹酚酸B为参照物对炒丹参、酒丹参、醋丹参指纹图谱进行研究,建立炒丹参共有峰28个,酒丹参33个共有峰,醋丹参34个共有峰,方法学考察表明该分析方法重复性较好,为丹参饮片质量的全面控制提供了科学依据。4.同时测定丹参及其近缘种有效成分的研究：采用HPLC-UV法建立了同时测定丹参6种有效成分原儿茶醛、丹酚酸B、丹酚酸A、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA的方法,并对其提取条件进行了优化。结果表明：该方法精密度高,稳定性和重现性好,测定结果真实可靠；平均回收率分别是原儿茶醛为95.2%,丹酚酸A为94.1%,丹酚酸B为91.4%,隐丹参酮为96.5%,丹参酮Ⅰ为97.9%,丹参酮ⅡA为98.0%,RSD值依次为1.7%,1.9%,2.0%,1.8%,1.4%,1.0%。提取方式为：药材粉末加纯水索氏提取4h后,残渣以80%乙醇为提取剂,超声提取20min,合并两次提取液,浓缩定容,即得。应用优选方法测定21个样品的六种有效成分,结果表明,原儿茶醛含量以四川中江产组培大叶丹参(0.347%)最高,丹酚酸B的含量以甘西鼠尾草(4.87%)最高,丹酚酸A的含量以四川中江组培小叶丹参(0.712%)最高,隐丹参酮含量以山东泰山产丹参(0.322%)最高,丹参酮Ⅰ含量以三叶鼠尾草(0.125%)最高,丹参酮ⅡA含量以三叶鼠尾草(0.201%)最高。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-12
1. 文献综述  12-21
  1.1 中药丹参植物资源概况  12-13
  1.2 分布与生境  13-15
  1.3 丹参化学成分及药理作用研究  15-17
    1.3.1 丹参酮类化合物及药理作用  15-16
    1.3.2 丹酚酸类化合物及药理作用  16-17
  1.4 中药丹参炮制的研究  17-21
    1.4.1 中药丹参炮制历史沿革  17-18
    1.4.2 现代炮制工艺的研究  18-19
    1.4.3 炮制对药理作用及化学成分的研究  19
    1.4.4 炮制饮片质量标准研究  19-20
    1.4.5 有效成分指纹图谱的研究  20-21
  1.5 中药丹参及其近缘种有效成分同时测定的研究  21
2. 立题依据  21-23
3. 材料与方法  23-35
  3.1 丹参饮片炮制工艺的优选  23-28
    3.1.1 丹参及其炮制品中指标成分的含量测定  23-25
    3.1.2 炒丹参炮制工艺的优选  25-26
    3.1.3 酒丹参炮制工艺的优选  26-27
    3.1.4 醋丹参炮制工艺的优选  27-28
  3.2 丹参饮片质量标准研究  28-31
    3.2.1 材料、仪器与试药  28
    3.2.2 研究方法  28-31
  3.3 丹参饮片指纹图谱研究  31-33
    3.3.1 材料、仪器与试药  31
    3.3.2 对照品溶液的制备  31-32
    3.3.3 供试品溶液的制备  32
    3.3.4 检测波长及参照峰的考察  32
    3.3.5 方法学考察  32
    3.3.6 指纹图谱的建立  32-33
  3.4 中药丹参及其近缘种六种有效成分同时测定研究  33-35
    3.4.1 材料、仪器与试药  33
    3.4.2 研究方法  33-35
4. 结果与分析  35-60
  4.1 中药丹参饮片炮制工艺优选结果  35-41
    4.1.1 方法学考察结果  35-37
    4.1.2 炒丹参炮制工艺结果  37-38
    4.1.3 酒丹参炮制工艺结果  38-40
    4.1.4 醋丹参炮制工艺结果  40-41
  4.2 中药丹参饮片质量标准结果  41-49
    4.2.1 显微鉴别  41
    4.2.2 薄层色谱鉴别  41-43
    4.2.3 检查结果  43
    4.2.4 浸出物测定  43-44
    4.2.5 含量测定  44-46
    4.2.6 丹参饮片质量标准草案  46-49
  4.3 丹参饮片指纹图谱的建立  49-55
    4.3.1 色谱条件考察结果  49
    4.3.2 方法学考察  49-51
    4.3.3 指纹图谱的建立  51-55
  4.4 丹参及其近缘种六种有效成分的同时测定结果  55-60
    4.4.1 提取方式的结果  55
    4.4.2 检测波长的选择  55-56
    4.4.3 色谱条件  56
    4.4.4 方法学考察结果  56-58
    4.4.5 含量测定结果  58-60
5. 讨论  60-65
  5.1 中药丹参饮片炮制工艺研究  60
  5.2 中药丹参饮片质量标准研究  60-62
  5.3 丹参饮片指纹图谱  62
  5.4 中药丹参及其近缘种同时测定  62-65
    5.4.1 有效成分测定方法研究  62-63
    5.4.2 测定结果  63-65
参考文献  65-69
攻读硕士期间科研成果  69-70
致谢  70

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