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绵羊幼羔的超数排卵及其体外受精

作　者: 吴海凤
导　师: 张勇
学　校: 甘肃农业大学
专　业: 发育生物学
关键词: 卵母细胞羔羊 超数排卵 体外成熟 体外受精
分类号: S826
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


幼羔的超数排卵技术是根据性成熟前幼龄母羔(1~2月龄)卵巢对生殖激素敏感,卵泡发育很少发生闭锁的特殊生理特点而发明的一项高效率生产羊卵母细胞的新技术。幼羔超早期繁殖技术是集幼羔超排、活体采卵、体外受精、胚胎移植等技术为一体的胚胎生物技术体系。本试验以羔绵羊为研究对象,分别研究了绵羊幼羔的超数排卵、卵母细胞体外成熟和体外受精的效果以及重复激素处理对幼羔超排效果的影响,比较了幼羔超排后所采集卵母细胞与从屠宰场所获成年羊卵巢卵母细胞的体外成熟、体外受精及早期胚胎发育能力,并进行了受精液pH对幼羔卵母细胞体外受精及早期胚胎发育能力的影响试验,以期完善“幼羔超排—活体采卵—体外受精”生产体外胚胎的技术体系,进而提高体外胚胎生产的效率。研究结果如下:1.用FSH+PMSG和FSH+LH两种不同的方案对8只6周龄的高山细毛羊进行超数排卵4只注射生理盐水作为对照组。超排后共获得发育卵泡数583个,回收卵母细胞数为255枚。卵母细胞经体外培养24h后与上游法获能的精子进行体外受精,48h后各组的卵裂率分别11.4%和22.7%。成熟卵母细胞经体外受精后FSH+LH的处理组卵裂率明显高于采用FSH+PMSG处理组得到卵子的卵裂率。2.间隔一个月,对实验组8只羔羊用相同方法进行重复超排,结果表明,重复超排所得发育卵泡数及可用卵母细胞数分别为20枚和15枚,极显著低于第一次超排平均发育卵泡数、平均每只获可用卵数的54枚和36枚。3.羔羊卵母细胞体外成熟率41.9%,显著低于从屠宰场所获成年羊卵巢卵母细胞的体外成熟率75.0%。羔羊卵母细胞体外受精后的卵裂率和桑葚胚率分别为44.4%与37.5%,均极显著低于成年羊卵巢卵母细胞的卵裂率75.8%和桑葚胚率70.0%。4.羔羊卵母细胞体外受精及胚胎发育结果表明,精卵共孵育时间24h组受精卵裂率为60.4%,极显著高于16h组的25.0%和27h组的33.33%。5.受精液pH对卵母细胞受精卵裂率有着显著影响,试验结果表明在pH为7.3~7.5的受精液中卵母细胞卵裂率56.6%极显著高于pH为7.6~7.8受精液的卵裂率32.5%,(P<0.01)。

全文目录


摘要  4-6
Summary  6-8
缩略词表  8-11
第一章 文献综述  11-26
  1 幼畜超数排卵的研究进展  11-16
    1.1 幼畜超数排卵的研究现状  11-12
    1.2 超数排卵方法  12-13
    1.3 活体采卵方法  13
    1.4 影响幼羔超数排卵效果的主要因素  13-16
  2. 卵母细胞体外成熟的研究进展  16-19
    2.1 研究概况  16
    2.2 卵母细胞体外成熟的标志  16-18
    2.4 影响卵母细胞体外成熟的因素  18-19
  3. 卵母细胞体外受精的研究进展  19-24
    3.1 研究概况  19-20
    3.2 精子的体外获能  20-22
    3.3 影响精子体外获能与受精的因素  22-24
  4 早期胚胎体外培养  24-26
    4.1 早期胚胎发育阻滞  24
    4.2 早期胚胎体外培养方法  24
    4.3 早期胚胎鉴定  24-25
    4.4 早期胚胎异常发育  25-26
第二章绵羊幼羔的超数排卵及其体外受精  26-43
  1 试验材料  26-28
    1.1 材料  26-28
  2 试验方法  28-30
    2.1 卵母细胞的采集  28-29
    2.2 卵母细胞的体外成熟  29
    2.3 卵母细胞的体外受精  29-30
    2.4 早期胚胎体外发育培养  30
    2.5 数据处理  30
  3 实验设计  30-32
    3.1 不同处理方法对超排效果的影响  30-31
    3.2 重复超排对超排效果的影响  31
    3.3 羔羊与成年羊卵母细胞体外成熟的比较  31
    3.4 羔羊与成年羊卵母细胞体外受精的比较  31
    3.5 精卵共孵育时间对受精卵裂率的影响  31
    3.6 受精液pH 对受精率及胚胎发育的影响  31-32
  4. 结果  32-38
    4.1 不同处理方法对超排效果的影响  32-35
    4.2 重复超排对超排效果的影响  35
    4.3 羔羊与成年羊卵母细胞体外成熟能力比较  35-36
    4.4 羔羊与成年羊卵母细胞体外受精及胚胎发育效果比较  36
    4.5 精卵共孵育时间对受精卵裂率的影响  36-37
    4.6 受精液pH 对受精率的影响  37-38
  5. 讨论  38-42
    5.1 不同处理方法对超排效果的影响  38-39
    5.2 重复超排对超排效果的影响  39-40
    5.3 羔羊与成年羊卵母细胞的体外成熟能力比较  40-41
    5.4 羔羊与成年羊卵母细胞体外受精效果比较  41
    5.5. 精卵共孵育时间对受精卵裂率的影响  41
    5.6 受精液pH 对受精率及胚胎发育的影响  41-42
  6 结论  42-43
参考文献  43-50
附图  50-52
致谢  52-53
导师简介  53-54
个人简介  54

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 家畜 > 羊
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