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溶藻菌的溶藻物质分离与初步鉴定

作　者: 陈默
导　师: 赵以军；程凯
学　校: 华中师范大学
专　业: 水生生物学
关键词: 溶藻粉剂活性物质沉淀黄化
分类号: X524
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 43次
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内容摘要

面对当前严重的湖泊富营养化情况,研究者们开发了各种方法来控制、解决藻类水华的发生。但是相对于物理、化学的方法的控藻的效果,生物控藻的方法是最有前景的。本实验室中通过喷雾干燥技术将放线菌AN02的发酵上清液制备成一种溶藻粉剂。这种粉剂在云南滇池的现场小范围的试验中有着明显的溶藻效果。本实验过程中,通过对粉剂的初步处理后进行液相色谱试验,旨在分离及鉴定出粉剂中的溶藻活性物质。通过对液相条件进行优化,最终确定了液相条件：检测波长为198nm,色谱柱为AgilentXDB-C18,5um,4.6x250mm;水：甲醇=85：15(V/V),流速为0.4mL/min。通过定时的收集馏分的方式,最终确定了7-8min的馏分有明显的活性。从7-8min馏分中收集到一单峰,分子量为645.2。在用粉剂处理DS藻的过程中,发现藻出现沉淀、黄化死亡现象。将乙醇处理后的粉剂上清,在溶藻活性较高的粉剂上清投加比例条件下(1：50,1：100,1：200)加到DS藻中后,第1天到第3天藻细胞沉降明显,说明从第1天到第3天是藻发生沉淀的关键时间段。在有明显溶藻活性的粉剂上清投加比例前提下,发现从第11天开始,沉淀中的藻细胞数量明显减少,说明投加乙醇处理后AN02粉剂上清液后的第11天可能是沉淀中的藻细胞走向破坏死亡的一个关键时间点。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-8
第一章文献综述  8-19
  1. 淡水藻形成水华的原因及其产生的危害  8-10
    1.1 淡水藻形成水华的原因  8-9
    1.2 水华的危害  9-10
  2. 现阶段治理水华的常用方法和手段  10-16
    2.1 物理的方法  10-11
    2.2 化学的方法  11
    2.3 生物的方法  11-16
    2.4 治理水华的其他方法  16
  3. 生物分泌的胞外产物的研究  16-18
  4. 本文的研究目的、内容及意义  18-19
第二章 W6号菌溶藻物质的初步研究  19-23
  1. 材料与方法  19-21
    1.1 试验材料  19-20
    1.2 方法  20-21
    1.3 叶绿素a含量的测定  21
    1.4 数据处理  21
  2. 结果和分析  21-22
    2.1 W6菌的乙醇沉淀试验  21-22
    2.2 W6的乙酸乙酯萃取试验  22
  3. 讨论  22-23
第三章 AN02粉剂溶藻物质的分离与鉴定  23-40
  1. 材料和方法  23-25
    1.1 试验材料  23-24
    1.2 实验流程及方法  24-25
    1.3 数据处理  25
  2. 结果和分析  25-38
    2.1 流动相比例的选择  25-27
    2.2 流动相比例的选择  27-28
    2.3 柱温的选择  28
    2.4 选择流动相的洗脱梯度  28-30
    2.5 馏分收集  30-32
    2.6 5-10min分离条件摸索  32-33
    2.7 5-10min的馏分每分钟收集一瓶馏分的溶藻结果  33-34
    2.8 7-8min的馏分的液相  34-35
    2.9 对7-8min馏分进一步分离  35-38
    2.10 将甲醇换成乙腈后7-8min馏分分离  38
  3. 讨论  38-40
第四章 AN02粉剂乙醇处理后的上清对DS藻的沉淀黄化试验  40-45
  1. 材料和方法  40-41
    1.1 实验材料  40
    1.2 实验方法  40-41
    1.3 数据处理  41
  2. 结果和分析  41-44
    2.1 悬浮的藻细胞数目  41-42
    2.2 将沉淀摇起后总的藻细胞数目  42-43
    2.3 沉淀的藻细胞数目  43-44
  3. 讨论  44-45
参考文献  45-49
致谢  49

溶藻菌的溶藻物质分离与初步鉴定

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