氢溴酸槟榔碱（Ah）对豚鼠体外胃不同部位平滑肌肌条收缩运动的影响，并初步探索其作用机制。2．通过蛋白质组学方法来比较氢溴酸槟榔碱（Ah）刺激组与对照组大鼠平滑肌细胞的蛋白质表达谱，初步探讨Ah对于大鼠平滑肌收缩作用的分子生物学水平的可" />

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氢溴酸槟榔碱（Ah）促胃肠动力效应的研究及蛋白组学初探

作　者: 李晨
导　师: 魏睦新
学　校: 南京医科大学
专　业: 中医内科学
关键词: 氢溴酸槟榔碱胃肠动力豚鼠胃平滑肌结肠平滑肌细胞蛋白组学中医药槟榔
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

目的：1．观察槟榔碱的学位论文">氢溴酸槟榔碱（Ah）对豚鼠体外胃不同部位平滑肌肌条收缩运动的影响，并初步探索其作用机制。2．通过蛋白质组学方法来比较氢溴酸槟榔碱（Ah）刺激组与对照组大鼠平滑肌细胞的蛋白质表达谱，初步探讨Ah对于大鼠平滑肌收缩作用的分子生物学水平的可能机制。方法：1．将豚鼠离体胃不同部位（6处）平滑肌条置于灌流浴槽，在37℃恒温、通氧和Krebs液灌注条件下，以乙酰胆碱（ACh）为对照，分别记录单独使用Ah和阻断剂孵育后Ah的收缩效应。2．将培养的大鼠结肠平滑肌细胞分为2组：正常对照组；Ah刺激组。Ah刺激组是在培养液中加入一定量的(使培养瓶中Ah终浓度为1×10^-5 mol／L)去离子水配制的1×10^-4 mol／L的Ah并保持孵育结肠平滑肌细胞15 min；同时正常对照组在细胞培养液中加入与Ah刺激组加入Ah等量的去离子水孵育细胞15 min。两组均在孵育15 min末收集细胞，裂解液溶解细胞蛋白。利用双向电泳方法分离细胞蛋白质，并用ImageMaster图像分析软件比较这二组细胞的蛋白质图谱。（Ah刺激组为Ah 15min，对照组为Ctr15 min）结果：1．①Ah可显著增高各部分体外胃平滑肌条的张力，增大收缩振幅和收缩波曲线下面积，两者均比基础值有显著增高（P＜0.05）。而且其效应强度不同部位有明显差异。纵肌效应：Ah对胃窦纵肌的作用振幅大于胃底、胃体（P＜0.01）；效应曲线下面积大于胃体纵肌（P＜0.01）。环肌效应：Ah对胃窦环肌作用振幅大于胃底环肌（P＜0.05）；效应曲线下面积大于胃体和胃底环肌（P＜0.05），对胃体环肌作用的曲线下面积亦大于胃底环肌（P＜0.05）；②阿托品和维拉帕米均能部分阻断Ah的收缩作用，显著降低其振幅（P＜0.01）。2．多次实验获得了重复性可的结肠平滑肌细胞蛋白质图谱。分析蛋白质图谱发现Ah 15 min较Ctr 15 min有10种蛋白表达上调。结论：1．Ah对豚鼠离体胃平滑肌条的收缩活动有明显兴奋作用，推测这种效应部分介导于M-胆碱能受体，L型电压依赖性Ca²⁺通道。2．Ah刺激体外培养结肠平滑肌细胞后能引起结肠平滑肌细胞蛋白质表达谱的变化，较短的作用时间产生较稳定的蛋白谱表达变化，提示Ah刺激对结肠平滑肌细胞的调节具有“即时触发效应”。这些蛋白质的差异表达可以为我们以后继续对Ah促结肠动力作用机制的深入研究奠定基础。

全文目录

中文摘要  3-5
英文摘要  5-8
引言  8-11
论文  11-40
  第一部分槟榔碱的学位论文">氢溴酸槟榔碱对豚鼠体外胃不同部位肌条作用及其机制  11-20
    材料与方法  11-13
    结果  13-17
    讨论  17-20
  第二部分氢溴酸槟榔碱对结肠平滑肌细胞收缩效应蛋白谱表达的影响  20-40
    材料和方法  20-33
    结果  33-38
    讨论  38-40
小结  40-41
参考文献  41-45
附录  45-46
致谢  46-48
综述  48-60

氢溴酸槟榔碱（Ah）促胃肠动力效应的研究及蛋白组学初探

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