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菌核病生防菌小盾壳霉的固体发酵及几个菌株的生物学特性研究

作　者: 董晓军
导　师: 文成敬；刘勇
学　校: 四川农业大学
专　业: 植物病理学
关键词: 菌核病核盘菌小盾壳霉固体发酵生物学特性生物防治
分类号: S476.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

在国内首次以多种农产品材料(小麦、谷子、麸皮等)作为生防菌小盾壳霉(Coniothyrium minitans)的固体发酵基质，以从德国引进小盾壳霉Cm-02菌株为发酵对象，对影响发酵的多种条件进行研究，并对确定出的各单因素较佳条件进行正交实验，最终确定出各单因素条件的最佳组合，为小盾壳霉生防制剂的工业化生产提供理论依据。此外，从四川地区分离到两株小盾壳霉Cm-c1，Cm-b2，与采自德国的两个菌株Cm-02和Cm-315一起作不同小盾壳霉菌株的生物学特性对比研究。结果如下：采用小麦作为固体发酵基质，20℃培养，加水比例为基质：水分=1∶1(g／ml)，基质灭菌前添加发酵营养液，酸碱度调PH6是适合小盾壳霉Cm-02菌株固体发酵的各最佳单因素条件。各处理下基质产孢量最大值均在第20d出现。选取基质加水比例、营养液添加时间和酸碱度中的较佳水平各3个进行正交试验，得到的最佳发酵条件为：发酵营养液调PH6，按基质与其比例1∶1(g∶ml)于灭菌前加入，小盾壳霉Cm-02的产孢量在第20d达到最大，为18.43×10~9个／g。四个菌株在生物学特性方面存在明显差异。Cm-c1在形态特征上和其它菌株差异最大。各菌株在5℃-30℃的范围内均能生长，生长和产孢的最适温度皆为20℃；在PH2-PH12内均能生长，生长和产孢的最适PH值Cm-c1为PH4，其余菌株为PH6；四菌株均在全光照下生长最快，全黑暗下产孢量最大；PDA培养基对小盾壳霉生长和产孢较为适宜；各种处理下Cm-c1均生长很快，产孢量却最低；此外，随着发酵时间的延长，小盾壳霉产生的孢子的萌发能力在降低，而一定的外源营养能促进其孢子萌发；对峙培养时四菌株对核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)Ya菌株的生长抑制率均在50％以上；各菌株对核盘菌所产菌核的数量和质量均有明显抑制作用，菌核寄生致腐率均在80％以上，其中，Cm-02、Cm-315、Cm-b2均在90％左右。总的来说，国外与国内的四个盾壳霉菌株对核盘菌作用的能力没有较大差异。在油菜离体叶片接种试验中，四菌株对核盘菌M08叶面病斑的扩展没有抑制作用。

全文目录

摘要  7-8
Abstract  8-10
前言  10-22
  1 菌核病研究进展  10-14
    1.1 菌核病概述  10
    1.2 菌核病病原及分类  10
    1.3 菌核病的危害  10-11
    1.4 菌核病的致病特点、侵染循环、致病机理及发病条件  11-13
      1.4.1 致病特点  11
      1.4.2 侵染循环  11-12
      1.4.3 致病的生化机理  12-13
      1.4.4 发病条件  13
    1.5 菌核病的防治现状  13-14
  2 小盾壳霉研究进展  14-22
    2.1 小盾壳霉概述  14
    2.2 小盾壳霉分类  14
    2.3 小盾壳霉的生态学、生物学及在生防中的应用  14-17
      2.3.1 小盾壳霉的分布  14-15
      2.3.2 小盾壳霉的生物学特性研究  15-16
        2.3.2.1 小盾壳霉的形态特征  15
        2.3.2.2 小盾壳霉的生长条件  15-16
      2.3.3 小盾壳霉的寄主范围  16
      2.3.4 小盾壳霉的研发应用现状及其施用方式  16-17
        2.3.4.1 应用现状  16
        2.3.4.2 施用方式  16-17
    2.4 小盾壳霉对菌核病菌的生防机理及两者的相互作用  17-19
      2.4.1 对菌核病菌的生防机理  17-19
        2.4.1.1 重寄生作用  17
        2.4.1.2 溶菌作用  17-18
        2.4.1.3 抗生作用  18-19
      2.4.2 与核盘菌的相互作用  19
    2.5 外界条件对小盾壳霉防治核盘菌的影响  19-20
    2.6 小盾壳霉的菌种改良  20
    2.7 小盾壳霉的扩大培养  20-22
1 材料与方法  22-28
  1.1 小盾壳霉固体发酵技术研究  22-24
    1.1.1 供试菌株和发酵基质  22
    1.1.2 试验方法  22-24
      1.1.2.1 加水比例对各培养基质产孢的影响  22
      1.1.2.2 添加发酵营养液对各培养基质产孢的影响  22-23
      1.1.2.3 发酵基质及条件的初步筛选  23
      1.1.2.4 PH值对各培养基质产孢的影响  23
      1.1.2.5 发酵条件的正交优化  23-24
  1.2 小盾壳霉的生物学特性研究  24-28
    1.2.1 小盾壳霉的分离、鉴定  24
    1.2.2 生物学特性对比研究  24-28
      1.2.2.1 不同菌株的形态特征比较  24-25
      1.2.2.2 温度对菌丝生长和产孢的影响  25
      1.2.2.3 PH值对菌丝生长及产孢的影响  25
      1.2.2.4 光照对菌丝生长及产孢的影响  25
      1.2.2.5 不同营养物质对菌丝生长及产孢的影响  25-26
      1.2.2.6 固体发酵产生孢子的萌发能力测定  26
        1.2.2.6.1 不同培养时间对孢子萌发的影响  26
        1.2.2.6.2 不同营养成分对孢子萌发的影响  26
      1.2.2.7 各菌株对核盘菌的生防潜能  26-28
        1.2.2.7.1 对核盘菌菌丝生长和菌核形成的影响  26-27
        1.2.2.7.2 寄生致腐核盘菌菌核能力的测定  27
        1.2.2.7.3 油菜离体叶片接种试验  27-28
2 结果与分析  28-46
  2.1 小盾壳霉固体发酵技术研究  28-33
    2.1.1 加水比例对各培养基质产孢的影响  28-29
    2.1.2 添加发酵营养液对各培养基质的产孢影响  29-31
    2.1.3 发酵基质初步筛选  31
    2.1.4 PH值对各培养基质的产孢影响  31-33
    2.1.5 多因素正交试验  33
  2.2 小盾壳霉的生物学特性研究  33-46
    2.2.1 小盾壳霉的分离、鉴定结果  33-34
    2.2.2 生物学特性研究  34-46
      2.2.2.1 不同菌株的形态特征比较  34-35
      2.2.2.2 温度对小盾壳霉菌丝生长和产孢的影响  35-36
      2.2.2.3 PH值对小盾壳霉菌丝生长和产孢的影响  36-37
      2.2.2.4 光照对小盾壳霉菌丝生长和产孢的影响  37-38
      2.2.2.5 不同营养物质对小盾壳霉菌丝生长和产孢的影响  38-39
      2.2.2.6 固体发酵产生的孢子的萌发能力  39-40
        2.2.2.6.1 不同培养时间对孢子萌发的影响  39
        2.2.2.6.2 不同营养成分对孢子萌发的影响  39-40
      2.2.2.7 小盾壳霉生防潜能研究  40-46
        2.2.2.7.1 各菌株对核盘菌菌丝生长和菌核形成的影响  40-43
        2.2.2.7.2 各菌株致腐核盘菌Ya菌核的能力测定  43
        2.2.2.7.3 油菜离体叶片接种试验  43-46
3 结论与讨论  46-50
  3.1 小盾壳霉的固体发酵技术  46-48
  3.2 小盾壳霉的生物学特性  48-50
4. 存在问题及展望  50-52
参考文献  52-58
致谢  58-59
攻读学位期间发表的学术论文  59

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