EGCG和表儿茶素没食子酸酯ECG药理活性最强，需" />
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高纯度儿茶素单体EGCG和ECG分离及纯化工艺研究

作　者: 黄静
导　师: 姜绍通
学　校: 合肥工业大学
专　业: 农产品加工及贮藏工程
关键词: 儿茶素 EGCG ECG GCG 葡聚糖凝胶Sephadex LH-20
分类号: TQ28
类　型: 硕士论文
年　份: 2004年
下　载: 565次
引　用: 10次
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内容摘要


儿茶素是茶叶中的重要成分，由于其具有重要的生物活性、抗氧化性及清除自由基的能力而日益受到人们的重视。已鉴定出的儿茶素单体主要有八种，可分为酯型与非酯型两类，其中的酯型儿茶素表没食子儿茶素没食子酸酯GCG 的学位论文">EGCG和表儿茶素没食子酸酯ECG药理活性最强，需求量较大。 本文以茶多酚粗品为原料，采用正交试验系统研究了儿茶素EGCG和ECG在葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱上的分离及纯化条件。预分离试验采用无水乙醇为洗脱剂(柱高50cm，洗脱流速0.75ml／min)，实现了原料茶多酚中儿茶素单体ECG与EGCG(含没食子儿茶素酸酯GCG)的有效分离。ECG单体洗脱率97.64％，纯度达97.62％，提取率(85.67％)；EGCG(含GCG)单体洗脱率98.45％，纯度达88.66％。预分离所得EGCG(GCG)组分适度浓缩后，再经Sephadex LH-20纯化(洗脱剂为40％乙醇水溶液，柱高50cm，洗脱流速0.60ml／min)，可制备得到高纯度EGCG单体(色谱纯度≥99.9％)，提取率(85．31％)和色谱纯度(99％)均接近或高于目前国内外报道的儿茶素分离提取方法。 本文研究的方法大大简化了儿茶素单体分离纯化设备，只需经过常规的两次柱层析系统即可完成单体EGCG的分离提纯，实现了EGCG和ECG柱分离与柱纯化步骤的连续操作，方法简便，成本低廉，溶剂无毒，单体提取率及产品纯度均较高，并可实现EGCG一次性克量级以上的制备。对分离纯化后的产品ECG及EGCG采用紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)、液相色谱-质谱联用(LC-MS)及核磁共振(HNMR)四谱分析技术鉴定，验证了其化学结构。 本文初步探讨得出，儿茶素单体在Sephadex LH-20上的分离机理是分子筛作用、吸附作用及分配作用的共同效应。

全文目录


第一章 绪论  16-29
  1.1 儿茶素的组成和结构  16-20
  1.2 儿茶素的生物活性  20-21
  1.3 儿茶素的应用  21-22
  1.4 儿茶素单体的分离提取方法及发展现状  22-27
  1.5 研究背景、目的与内容  27-29
论文框架图  29-30
第二章 儿茶素单体检测方法的建立  30-37
  2.1 试验材料与设备  30
    2.1.1 材料  30
    2.1.2 主要设备  30
  2.2 试验方法  30-31
  2.3 结果与分析  31-36
    2.3.1 定性测定  31-32
    2.3.2 定量测定  32-36
  2.4 小结  36-37
第三章 儿茶素单体预分离条件研究  37-56
  3.1 层析介质的确定  37-38
    3.1.1 方法比较  37-38
    3.1.2 葡聚糖凝胶Sephadex LH-20的结构及性质  38
  3.2 试验材料与设备  38-41
    3.2.1 试验材料  38-39
    3.2.2 主要设备  39-40
    3.2.3 儿茶素单体预分离试验装置  40-41
  3.3 试验方法  41-51
    3.3.1 试验步骤  41
    3.3.2 HPLC检测条件  41
    3.3.3 正交试验设计  41-48
    3.3.4 结果处理  48-49
    3.3.5 方法分析  49-51
  3.4 儿茶素单体预分离试验洗脱洗脱组分液相色谱检测  51-53
  3.5 验证及稳定性试验  53
  3.6 上样量试验  53-54
  3.7 方法适用性试验  54-55
  3.8 小结  55-56
第四章 儿茶素单体GCG 的学位论文">EGCG纯化条件研究  56-65
  4.1 纯化条件的选择  56-58
    4.1.1 柱层析介质的确定  56
    4.1.2 洗脱剂的确定  56-58
    4.1.3 其它洗脱条件参数的确定  58
  4.2 试验材料与设备  58-59
    4.2.1 试验材料  58
    4.2.2 主要设备  58
    4.2.3 EGCG纯化试验装置  58-59
  4.3 正交试验设计  59-61
    4.3.1 试验目的与考察指标  59
    4.3.2 试验步骤  59
    4.3.3 设计因素水平表  59-60
    4.3.4 试验方案  60
    4.3.5 方差分析  60-61
  4.4 纯化试验洗脱液的HPLC检测  61-62
  4.5 洗脱条件讨论  62-63
  4.6 纯化产品颜色比较  63-64
  4.7 儿茶素单体(EGCG、ECG)产率及回收率计算发  64
  4.8 小结  64-65
第五章 产品结构及纯度鉴定  65-76
  5.1 紫外光谱分析(UV)  65-66
    5.1.1 测试原理  65
    5.1.2 仪器与方法  65
    5.1.3 结果与讨论  65-66
  5.2 红外光谱分析(IR)  66-68
    5.2.1 测试原理  66
    5.2.2 仪器与方法  66
    5.2.3 结果与讨论  66-68
  5.3 液相色谱-质谱联用(LC-ESI-MS)  68-70
    5.3.1 测试原理  68
    5.3.2 仪器与方法  68-69
    5.3.3 结果与讨论  69-70
  5.4 核磁共振波谱分析(NMR)  70-75
    5.4.1 测试原理  70
    5.4.2 仪器与方法  70
    5.4.3 结果与讨论  70-75
  5.5 小结  75-76
第六章 儿茶素单体在Sephadex LH-20柱上分离机理初步研究  76-83
  6.1 分子筛作用  76-78
  6.2 吸附作用  78-81
    6.2.1 静态吸附试验  78-79
    6.2.2 吸附机理  79-81
  6.3 分配作用  81-82
  6.4 分离机理小结  82-83
第七章 结论及前景展望  83-85
  7.1 结论  83
  7.2 创新点  83-84
  7.3 前景展望  84-85
参考文献  85-90

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中图分类: > 工业技术 > 化学工业 > 基本有机化学工业 > 天然有机化合物的生产
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