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松树萎蔫病病原及一法国分离物的分类地位研究
作 者: 王金成
导 师: 林茂松
学 校: 南京农业大学
专 业: 植物病理学
关键词: 松树萎蔫病 拟松材线虫 伴生细菌 法国分离物 分类地位
分类号: S763.7
类 型: 硕士论文
年 份: 2003年
下 载: 41次
引 用: 1次
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内容摘要
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自上世纪以来,松树萎蔫病一直是林业上的毁灭性病害。一般认为,松树萎蔫病的病原物为松材线虫[Bursaphelenchus xylophilus(Steiner&Buhrer)Nickle],但部分研究者认为拟松材线虫(B.mucronatus Mamiya&Enda)不同地理种群间存在致病性分化,有的种群甚至有较强的致病潜能。近几年来,松材线虫的伴生细菌又成为研究的热点。另外,法国拟松材线虫的分类地位不明确使得源于法国的分离物BmFr2的致病性无法归属。针对这些问题,笔者进行了以下试验,以期为松树萎蔫病的研究提供理论依据。 将收集到的27个拟松材线虫分别接种于3年生马尾松(Pinus massoniana)苗和黑松(P.thunbergii)苗,结果显示接种的马尾松苗几乎观察不到感病症状,而黑松苗却对拟松材线虫表现较高的敏感性。从数据分析来看,拟松材线虫对马尾松苗的致死率和RHS系数均为0,而对黑松苗的致死率介于0-75%之间,RHS系数介于0-840之间。其中来自福建的一个线虫种群BmFJ2对黑松苗的致死率为75%,RHS系数为840,表现出与阳性松材线虫对照相当的致病力。其次来自法国的BmFr2和来自加拿大的Bmcan也表现出很强的致病潜力,对黑松苗的致死率均为50%,RHS系数分别为207.2和117.8。BmCWY1、BmCGHP、BmCGHH、BmCSX、BmFr1五个种群的RHS系数都低于100,同时对黑松有一定或较强的致死率。而大多数拟松材线虫群体对黑松苗没有影响或影响很小。 选择4个松材线虫分离物作为材料分离到了4个细菌株系。接种试验表明无论是有菌线虫、无菌线虫与伴生细菌的混合物还是单独的无菌线虫都会造成寄主100%死亡。而分离出的所谓伴生细菌单独接种不能引起松苗的凋萎,对松苗的致死率为0。对RHS值进行t测验发现:(1)在0.01的显著水平上,有菌线虫和无菌线虫以及和无菌线虫与它们相应的伴生细菌的混合物之间差异显著;(2)在0.05的显著水平上,无菌线虫和无菌线虫与它们相应的伴生细菌的混合物之间差异显著。这就表明,尽管所谓松材线虫的伴生细菌不能单独引起黑松苗的萎蔫,但是它能使松材线虫更好的适应于在黑松苗中的生存并加速松树的死亡。 通过形态学比较,ITS-RFLP分子图谱比较以及生物学杂交3种方法对代表松材线虫的BxUS3、BxCAJ,代表亚洲型拟松材线虫的BmFJ2、BmCNJ、BmCSC1,来自法国的分离物BmFr2以及两个新种Bnsp1和Bnsp2八个分离物之间的分类关系进行了研究,一以期搞清法国分离物BinEr二的分类地位。结果显示,无论在形态上还是在*卜RFLP分子图谱上来自法国的分离物BmFrZ都与亚洲型拟松村线虫更为相似,而且它能与亚洲拟松材线虫BmFJZ、BmCNJ、BmCSCI成功杂交并建立了能够延续的种群,与松村线虫分离物BxUS3和BxCAJ以及个滑刃属两个新种Bnspl 和BnspZ u不能杂交或不能建立能够延续的种群。这表明法国分离物BmFrZ并不属于一个独立的种,而应归属于拟松材线虫。然而,要确定法国拟松材线虫的分类地位还需要进一步的研究。
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全文目录
中文摘要 4-6 英文摘要 6-8 前言 8-9 上篇 文献综述 9-24 第一章 松树萎蔫病概述 9-19 第二章 植物寄生线虫分类鉴定方法概述 19-24 下篇 研究内容 24-53 第一章 松树萎蔫病病原研究 24-39 第一节 拟松材线虫的致病性研究 24-33 第二节 松材线虫所谓伴生细菌在松树萎蔫病中的地位研究 33-39 第二章 法国分离物BmFr2的分类地位研究 39-53 全文结论 53-54 参考文献 54-60 致谢 60
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