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春柴胡化学成分研究

作　者: 王博
导　师: 欧阳臻
学　校: 江苏大学
专　业: 生药学
关键词: 春柴胡高效液相色谱指纹图谱柴胡皂苷d 槲皮素-3-O-葡糖醛酸苷高效液相色谱-电喷雾质谱联用气相色谱-质谱联用
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

《中国药典》2005年版收载的柴胡为伞形科植物柴胡Bupleurum chinenseDC.或狭叶柴胡Bupleurum scorzonerifolium Willd.干燥根。柴胡是临床上常用的传统中药之一,具有和解表里,疏肝、升阳等功效。柴胡主要以根入药,也有以茎叶、全草为药用部位,如江苏的大部分地区和安徽的东部习用狭叶柴胡春季采收的带根全草,俗称“春柴胡”入药,常替代药典柴胡在临床上应用。但目前对春柴胡的化学成分尚未见系统研究和报道,对春柴胡还没有全面可行的质量评价标准,因此本论文通过对春柴胡的化学成分的系统研究,以建立春柴胡的质量评价指标,为临床安全用药提供保障。主要研究内容和结论如下:1、采用水蒸气蒸馏法对不同采收期春柴胡挥发油的含量进行了测定,结果表明:春柴胡挥发油含量以四月初至五月中旬为高,这与传统的春柴胡采收期大体一致。采用GC-MS分析方法对不同采收期春柴胡挥发油成分进行了分析比较,不同采收期的春柴胡挥发油中脂肪酸的含量均较高,尤以n-十六烷酸的含量较高,可以作为春柴胡挥发油化学成分的特征。2、研究了春柴胡中总黄酮的提取工艺,以总黄酮含量为指标,通过单因素和正交试验相结合的方法确定总黄酮最佳提取工艺:提取溶剂为70%乙醇,料液比为1:15,提取温度为60℃,提取时间为1h,提取次数为3次。采用紫外分光光度法对不同的春柴胡样品中总黄酮含量进行了分析比较,研究结果表明:4、5月份期间采收的春柴胡均比其它采收期样品总黄酮含量要高,表明春柴胡最佳采收季节应为四月至五月;对春柴胡不同药用部位样品中总黄酮含量的研究结果表明:总黄酮含量春柴胡叶>全草>茎>根;同时测定了不同产地的狭叶柴胡地上部分药材及柴胡药材,结果狭叶柴胡地上部分药材黄酮含量最高,其次为春柴胡,最后为柴胡药材。3、采用中药指纹图谱研究技术对春柴胡及狭叶柴胡地上部分黄酮类化学成分进行了指纹图谱研究,并采用HPLC-ESI-TOFMS技术对其中的共有峰进行了定性分析。结果表明:不同产地狭叶柴胡地上部分样品指纹图谱中有14个共有峰,3～8号色谱峰区域为其主峰区,对共有峰中的10个色谱峰进行了结构确认,其中3、5、8号色谱峰分别为芦丁、槲皮苷和槲皮素,三者的相对含量为67%～78%,此特征可作为狭叶柴胡地上部分的主要特征。春柴胡HPLC指纹图谱中有12个共有峰,并对共有峰中的8个色谱峰进行了结构确认,其中4号峰为春柴胡中的主要指标成分槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷,是春柴胡药材中最明显的特征,相对含量在50%以上。在不同部位春柴胡指纹图谱分析中可以看出,春柴胡根、茎、叶三个部位的指纹图谱差异较大,叶与全草指纹图谱的相似程度较高,表明二者化学成分组成差别不大。4、首次从春柴胡中分离得到化合物槲皮素-3-O-葡糖醛酸苷,并建立了槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷的高效液相色谱含量测定方法,该方法的线性范围为4.375～140μg·mL^-1（r=0.9998）,平均回收率为98.43%,RSD为2.26%,表明该方法灵敏度高、准确、可靠。对不同采收期春柴胡中槲皮素-3-O-葡糖醛酸苷的含量进行了分析,研究结果表明不同采收期春柴胡中槲皮素-3-O-葡糖醛酸苷的含量差别很大,其中以四月中旬含量最高,不同部位春柴胡中叶的含量要明显高于其茎和根;同时也发现北柴胡与狭叶柴胡地上部分均没有槲皮素-3-O-葡糖醛酸苷,表明槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷为春柴胡的特征成分,该发现可为春柴胡的质量评价提供依据。5、从柴胡中制备得到柴胡皂苷d和柴胡皂苷b₂两个单体,建立了柴胡中柴胡皂苷d的HPLC-UV含量测定方法。该方法线性范围为5.025～402μg·mL^-1（r=0.9996）,平均回收率为98.90%,RSD为2.79%,表明该方法灵敏度高、准确、可靠。对不同来源样品中柴胡皂苷d的含量进行了分析,结果表明:不同采收期春柴胡中柴胡皂苷d的含量差别很大,其中以三月底到四月初含量最高,不同部位春柴胡中柴胡皂苷d的含量:根>茎>叶;柴胡中柴胡皂苷d的含量比春柴胡高6到10倍。

全文目录

摘要  5-7
ABSTRACT  7-13
第一章绪论  13-36
  1.1 柴胡属植物的研究概况  13-23
    1.1.1 柴胡的本草考证  13-14
    1.1.2 柴胡属植物分类  14
    1.1.3 柴胡属植物的分布  14-17
    1.1.4 柴胡属化学成分的研究  17-20
    1.1.5 柴胡的药理作用  20-23
  1.2 中药质量标准现代化研究思路及方法  23-27
    1.2.1 中药的质量控制现状及存在问题  23-24
    1.2.2 中药质量控制研究思路与方法  24-27
  1.3 本课题的立题背景和意义  27
  1.4 主要研究内容  27-28
  本章参考文献  28-36
第二章不同采收期春柴胡挥发油成分的GC-MS分析  36-44
  2.1 实验材料  36
    2.1.1 仪器及试剂  36
    2.1.2 药材来源  36
  2.2 实验方法  36-37
    2.2.1 供试液制备  36-37
    2.2.2 GC-MS分析条件  37
  2.3 结果与讨论  37-42
    2.3.1 挥发油的含量测定结果  37-38
    2.3.2 挥发油的GC-MS分析结果  38-41
    2.3.3 不同采收期春柴胡挥发油成分的比较  41-42
  2.4 本章小结  42-43
  本章参考文献  43-44
第三章柴胡药材总黄酮的提取工艺及含量测定研究  44-56
  3.1 柴胡药材总黄酮提取工艺研究  44-48
    3.1.1 实验材料  44
    3.1.2 实验方法  44-45
    3.1.3 结果与讨论  45-48
  3.2 柴胡药材总黄酮含量测定研究  48-54
    3.2.1 实验材料  48-50
    3.2.2 实验方法  50
    3.2.3 结果与讨论  50-54
  3.3 本章小结  54-55
  本章参考文献  55-56
第四章春柴胡及狭叶柴胡地上部分HPLC指纹图谱研究及HPLC-ESI-TOFMS定性分析  56-79
  4.1 狭叶柴胡地上部分HPLC指纹图谱研究及HPLC-ESI-TOFMS定性分析  56-67
    4.1.1 仪器与试剂  56-57
    4.1.2 实验方法  57-58
    4.1.3 结果与讨论  58-67
  4.2 春柴胡HPLC指纹图谱研究及HPLC-ESI-TOFMS定性分析  67-77
    4.2.1 仪器及试剂  67-68
    4.2.2 实验方法  68-69
    4.2.3 结果与讨论  69-77
  4.3 本章小结  77-78
  本章参考文献  78-79
第五章春柴胡中槲皮素-3-O-葡糖醛酸苷单体的分离制备及含量测定  79-89
  5.1 春柴胡中槲皮素-3-O-葡糖醛酸苷的单体制备  79-82
    5.1.1 仪器与材料  79-80
    5.1.2 实验方法  80
    5.1.3 结果与讨论  80-82
  5.2 春柴胡中槲皮素-3-O-葡糖醛酸苷的含量测定  82-88
    5.2.1 仪器与材料  82
    5.2.2 实验方法  82-83
    5.2.3 结果与讨论  83-88
  5.3 本章小结  88
  本章参考文献  88-89
第六章柴胡皂苷d单体的分离制备及含量测定  89-100
  6.1 柴胡皂苷d的单体制备  89-93
    6.1.1 仪器与材料  89-90
    6.1.2 实验方法  90
    6.1.3 结果与讨论  90-93
  6.2 柴胡皂苷d的含量测定  93-99
    6.2.1 仪器与材料  93
    6.2.2 实验方法  93-94
    6.2.3 结果与讨论  94-99
  6.3 本章小结  99
  本章参考文献  99-100
第七章总结与展望  100-102
  7.1 主要研究结论  100-101
  7.2 工作展望  101-102
致谢  102-103
攻读硕士学位期间发表的论文  103

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