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黄芪总苷和三七总皂苷配伍对脑缺血再灌注后早期损伤相关因素影响的研究

作　者: 谭华
导　师: 邓常清
学　校: 湖南中医药大学
专　业: 中西医结合
关键词: 中药有效组分配伍黄芪总苷三七总皂苷脑缺血再灌注损伤能量代谢氧化应激基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶组织抑制因子
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的：采用小鼠实验性脑缺血模型,在确定黄芪总苷(AST)和三七总皂苷(PNS)抗脑缺血有效剂量的基础上,确定AST和PNS的有效剂量组合；并探讨AST和PNS配伍对小鼠脑缺血再灌注后早期脑组织氧化损伤和能量代谢障碍及基质金属蛋白酶的影响。方法：1.按预先设定的AST和PNS的不同给药剂量,给小鼠灌胃,采用双侧颈总动脉合并迷走神经结扎方法造成小鼠脑缺血至死,记录耐缺血时间,以确定AST、PNS抗脑缺血有效剂量及有效配伍剂量。2.C57BL/6小鼠分为假手术组、模型组、AST和PNS配伍高、中、低剂量组、AST单用组、PNS单用组及依达拉奉组。连续4天灌胃给药,于给药后1小时结扎小鼠双侧颈总动脉,复制脑缺血20 min再灌注60 min模型,观察再灌注后脑组织ATP、ADP、AMP、MDA、GSH、NO含量和TAN、EC值及Na+-K+-ATP酶、SOD、NOS活性,分析药物的作用及AST与PNS配伍有无交互作用。3.C57BL/6小鼠分为假手术组、模型组、AST和PNS配伍高、中、低剂量组、AST单用组、PNS单用组及依达拉奉组。连续4天灌胃给药,于给药后1小时结扎小鼠双侧颈总动脉,复制脑缺血20 min再灌注24h模型,栓测脑组织MMP-9和TIMP-1蛋白表达,分析药物的作用及AST与PNS配伍有无交互作用。结果：1.拟定AST和PNS抗小鼠脑缺血再灌注损伤的配伍剂量为AST110+PNS115mg/kg。2.和假手术组比较,模型动物脑组织MDA、NO含量、NOS活性显著升高(均为P<0.01),SOD、Na+-K+-ATP酶活性、GSH、ATP含量及TAN、EC值显著降低(均为P<0.01)。应用AST、PNS及AST+PNS配伍后,可提高脑缺血再灌注后脑组织SOD、Na+-K+-ATP酶活性、GSH含量、ATP含量及TAN、EC值(P<0.01～P<0.05),、降低脑组织MDA和NO含量及NOS活性(P<0.01～P<0.05)。且以AST110+PNS115 mg/kg配伍作用更为显著(P<0.01)。并且AST110 mg/kg与PNS115 mg/kg配伍具有交互作用(P<0.01～P<0.05),在提高脑组织SOD、ATP含量上表现为协同作用,在提高脑组织TAN、EC值、GSH含量及Na+-K-ATP酶活性上表现为相加作用,在降低MDA、NO含量和NOS活性上表现为相加作用。3.与假手术组比较,模型组MMP-9蛋白表达显著增高(P<0.01),TIMP-1蛋白表达有所升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。应用AST、PNS及AST+PNS配伍后,各药物组MMP-9蛋白表达较模型组均显著减低(均为P<0.01),各药物组TIMP-1蛋白表达均显著升高(P<0.01～P<0.05)。且AST110 mg/kg与PNS115 mg/kg配伍具有交互作用(P<0.05),在抑制MMP-9升高方面和提高脑组织TIMP-1方面表现为相加作用结论：AST和PNS配伍对小鼠脑缺血再灌注早期的能量代谢障碍具有改善作用,可抑制脑缺血再灌注后脑组织的氧化损伤,调节缺血后脑组织MMP-9、TIMP-1蛋白的表达,从而改善血脑屏障,且二者配伍具有协同或相加的作用。

全文目录

中英文索引  7-8
中文摘要  8-11
Abstract  11-15
引言  15-17
第一部分 AST和PSN抗小鼠脑缺血作用的剂量选择  17-27
  1 材料与方法  17-19
    1.1 实验动物  17
    1.2 实验药物  17-18
    1.3 实验方法  18
    1.4 统计方法  18-19
  2 结果与分析  19-20
    2.1 耐缺血时间结果  19
    2.2 AST和PNS配伍剂量组合的确定  19-20
  3.讨论  20-27
    3.1 有效组分配伍的理论基础  20-22
    3.2 选择AST和PNS配伍的依据  22-27
第二部分黄苗总昔和三七总皂昔配伍对小鼠脑缺血再灌注后早期脑组织氧化损伤和能量代谢障碍的影响  27-45
  1材料与方法  27-32
    1.1 材料  27-28
      1.1.1 动物  27
      1.1.2 药物  27
      1.1.3 主要试剂  27-28
      1.1.4 主要仪器  28
    1.2 实验方法  28-32
      1.2.1 配伍剂量  28
      1.2.2 动物分组  28
      1.2.3 给药方法  28-29
      1.2.4 脑缺血模型的建立  29
      1.2.5 脑组织样品处理  29-30
        1.2.5.1 测定脑组织腺苷酸的样品处理  29-30
        1.2.5.2 测定脑组织氧化应激指标的样品处理  30
        1.2.5.3 测定脑组织Na~+-K~+-ATP酶活性的样品处理  30
      1.2.6 指标测定  30-32
        1.2.6.1 腺苷酸的测定  30-32
        1.2.6.2 氧化应激指标的测定  32
        1.2.6.3 Na~+-K~+-ATP酶活性的测定  32
      1.2.7 统计学处理  32
  2 结果与分析  32-38
    2.1 各组脑组织能量代谢指标的比较  33-35
      2.1.1 对脑组织ATP的影响  33
      2.1.2 对脑组织ADP、AMP的影响  33
      2.1.3 对脑组织TAN的影响  33-34
      2.1.4 对脑组织EC的影响  34
      2.1.5 对脑组织Na~+-K~+-ATP酶活性的影响  34-35
    2.2 各组脑组织MDA、GSH、NO含量及SOD、NOS活性的比较  35-38
      2.2.1 对MDA的影响  35-36
      2.2.2 对SOD活性的影响  36
      2.2.3 对GSH含量的影响  36-37
      2.2.4 对NO含量的影响  37
      2.2.5 对NOS活性的影响  37-38
  3 讨论  38-45
    3.1 黄茂总普和三七总皂普配伍对小鼠脑缺血再灌注后脑组织能量代谢障碍的影响  38-41
    3.2 黄茂总普和三七总皂普配伍对小鼠脑缺血再灌注后脑组织氧化损伤的影响  41-45
第三部分黄芪总苷和三七总皂苷配伍对小鼠脑缺血再灌注后脑组织MMP-9和TIMP-1表达的影响  45-53
  1 材料与方法  45-48
    1.1 材料  45
      1.1.1 动物  45
      1.1.2 药物  45
      1.1.3 主要试剂  45
      1.1.4 主要仪器  45
    1.2 实验方法  45-48
      1.2.1 配伍剂量  45-46
      1.2.2 动物分组  46
      1.2.3 给药方法  46
      1.2.4 脑缺血模型的建立  46-47
      1.2.5 样本处理  47
      1.2.6TIPM一1和MMP一9蛋白表达的测定  47
      1.2.7 统计学处理  47-48
  2 结果与分析  48-49
  3 讨论  49-53
    3.1 黄芪总苷和三七总皂苷配伍对小鼠脑缺血再灌注后脑组织MMP-9和TIMP-1表达的影响  49-51
    3.2 选择依达拉奉的说明  51-53
结论  53-55
参考文献  55-59
致谢  59-60
文献综述  60-71
  参考文献  70-71

黄芪总苷和三七总皂苷配伍对脑缺血再灌注后早期损伤相关因素影响的研究

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