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人大网膜前脂肪细胞原代培养以及脂肪细胞因子表达的初步观察

作　者: 薛颖
导　师: 贺冶冰
学　校: 华中科技大学
专　业: 内科学
关键词: 人大网膜脂肪细胞肿瘤坏死因子-α C-反应蛋白脂联素细胞核因子-κB
分类号: R589.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的通过建立人大网膜前脂肪细胞的原代培养方法,初步观察肿瘤坏死因子-α对人大网膜脂肪细胞C-反应蛋白、脂联素和NF-κB表达的影响。方法无菌条件下切取研究对象的大网膜脂肪组织,立即进行分离消化,得到的细胞悬液置入培养瓶中培养。对培养的前脂肪细胞进行诱导分化,行油红O染色和RT-PCR法鉴定前脂肪细胞和分化后得到的成熟脂肪细胞。用不同浓度TNF-α干预成熟脂肪细胞,RT-PCR法检测人大网膜脂肪细胞CRP mRNA、脂联素mRNA、NF-κB mRNA的表达。结果1.原代培养了人大网膜前脂肪细胞,并成功诱导分化为成熟脂肪细胞。2. RT-PCR检测人大网膜脂肪细胞有CRP mRNA表达。3.在TNF-α干预下,各组与0ng/ml组差异都有统计学意义(P<0.05)。CRP、脂联素、NF-κB的mRNA表达在同一时间,20ng/ml与5ng/ml两组差异有显著统计学意义(P<0.01),20ng/ml与10ng/ml组、10ng/ml与5ng/ml组(P<0.05)次之。在同一浓度,48h与12h两组差异有显著统计学意义(P<0.01),其余时间组差异也有统计学意义(P<0.05)。在12h,10ng/ml组与5ng/ml组CRP、NF-κB的mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);在5ng/ml,24h与12h组、48h与24h组脂联素mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),24h与12h组NF-κB mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。CRP mRNA表达水平与脂联素mRNA表达水平负相关( r = -0.9921, P<0.001)。CRPmRNA表达水平与NF-κB mRNA表达水平正相关(r = 0.9892, P<0.001)。脂联素mRNA表达水平与NF-κB mRNA表达水平负相关(r = -0.9980, P<0.001)。结论成功建立了人大网膜前脂肪细胞的原代培养方法,获得了成熟脂肪细胞。在人大网膜脂肪细胞,TNF-α呈浓度和时间依赖性上调了CRP、NF-κB mRNA的表达水平,同时也下调了脂联素mRNA的表达水平。

全文目录

英文缩略词表  5-6
摘要  6-8
Abstract  8-10
前言  10-12
  参考文献  11-12
第一部分  12-29
  摘要  12-14
  Abstract  14-16
  材料与方法  16-24
  结果  24-27
  讨论  27-28
  参考文献  28-29
第二部分  29-50
  摘要  29-31
  Abstract  31-33
  材料与方法  33-39
  结果  39-45
  讨论  45-47
  参考文献  47-50
综述  50-57
  参考文献  54-57
致谢  57

人大网膜前脂肪细胞原代培养以及脂肪细胞因子表达的初步观察

内容摘要

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