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高产纤维素酶真菌的筛选、鉴定及其在畜禽粪便处理中的应用

作　者: 郑世仲
导　师: 林跃鑫
学　校: 福建师范大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 纤维素 纤维素分解菌 纤维素酶 酶活力 酶学性质 堆肥
分类号: S141.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 122次
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内容摘要


本文作者从森林枯枝落叶的腐殖质土壤和猪粪堆肥中分离筛选到分解纤维素效果较好的真菌35株,通过初筛和产酶复筛,最后得到5株产酶能力较强的真菌,分别给命名为M-5、M-7、M-8、M-11、M-16,其中M-5菌株发酵产纤维酶能力最强。通过形态学及真菌rDNAITS保守序列的分子生物学鉴定,M-5菌株被确定为Aspergillus clavatonanicus。对M-5菌株进行固体发酵产纤维素酶条件研究,最后确定M-5菌株产酶条件为：配比7：3的3%NaOH处理后谷壳和麸皮为碳源,1%硫酸铵为氮源,料水比1：2.5,接种量105个孢子／(g干发酵物),PH 6.0,30℃培养84h。优化后CMC酶活及FPA分别达到3015.4 umol/g.h、432.9 umol/g.h。对M-5菌株产CMC酶和滤纸酶的酶学性质进行探究发现,CMC酶和滤纸酶的最适酶促反应条件分别为PH4.6、温度50℃,PH5.0,温度50℃；同时还考察了几种金属离子对其酶活的影响；最后探究了.M-5产CMC酶和滤纸酶的PH和温度稳定性,CMC酶和滤纸酶都是酸性酶,同时都是中高温酶,可以耐受相对较高的温度。以M-5菌株为主要菌株,其他菌株为辅助菌,研究微生物在资源化处理畜禽粪便中的作用,结果表明接种外源微生物菌剂有助于缩短堆肥时间,提高堆肥产品质量；通过对几个组合的堆肥效果比较后发现,组合3处理的堆肥效果最好,而且与目前市场上常用的菌剂相比,接种组合3菌剂后堆肥产品肥效差别很小,但堆肥周期短,成本也显著降低,有较好的推广运用价值。

全文目录


中文摘要  2-3
Abstract  3-5
中文文摘  5-7
目录  7-10
绪论  10-24
  一 畜禽粪便废弃物  10-12
    1 畜禽动物粪便的产生、处理及其利用现状  10-11
    2 畜禽动物粪便好氧堆肥  11-12
  二 生物制肥  12-13
    1 生物制肥概念  12-13
    2 纤维素分解菌在生物制肥中运用  13
  三 纤维素及纤维素的降解  13-17
    1 纤维素  13-15
    2 纤维素材料利用前的预处理  15-16
    3 纤维素的降解  16-17
  四 纤维素酶  17-21
    1 纤维素酶的组分  17-18
    2 纤维素酶的酶解机理  18
    3 纤维素酶性质  18-19
    4 纤维素酶来源及开发  19-20
    5 纤维素酶的应用  20-21
  五 本课题研究的目的、研究的主要内容及意义  21-24
    1 研究的主要目的  21-22
    2 主要的研究内容  22
    3 创新与特色  22-24
第一章 纤维素分解真菌的筛选与鉴定  24-42
  第一节 技术路线  24
  第二节 材料与方法  24-32
    2.1 材料  24-26
    2.2 实验方法  26-32
  第三节 结果与分析  32-40
    3.1 葡萄糖标准曲线绘制  32-33
    3.2 菌种的筛选  33-37
    3.3 鉴定结果  37-40
  第四节 小结与讨论  40-42
第二章 Asp.clavatonanicus固体产酶发酵条件研究  42-60
  第一节 技术路线  42-43
  第二节 材料与方法  43-47
    2.1 材料  43
    2.2 实验方法  43-47
  第三节 结果与分析  47-59
    3.1 谷壳预处理前后对产酶影响  47
    3.2 淀粉水解实验  47-48
    3.3 平板培养及菌株生长状态  48
    3.4 Asp.clavatonanicus固体发酵产纤维素酶单因素实验  48-57
    3.5 正交试验  57-59
  第四节 小结与讨论  59-60
第三章 Asp.clavatonanicus菌株产纤维素酶酶学性质研究  60-68
  第一节 技术路线  60
  第二节 材料与方法  60-62
    2.1 材料  60-61
    2.2 实验方法  61-62
  第三节 结果与分析  62-67
    3.1 纤维素酶催化反应的最适条件  62-64
    3.2 不同的金属离子对纤维素酶活力的影响  64-65
    3.3 Asp.clavatonanicus纤维素酶的稳定性  65-67
  第四节 小结与讨论  67-68
第四章 Asp.clavatonanicus菌株在微生物资源化处理畜禽粪便中的运用  68-78
  第一节 技术路线  68
  第二节 材料与方法  68-70
    2.1 材料  68-69
    2.2 方法和步骤  69-70
  第三节 结果与分析  70-77
    3.1 菌剂组合设置  70
    3.2 袋装发酵试验  70-76
    3.3 组合3与EM菌剂及河南某常用菌剂堆肥效果比较  76-77
  第四节 小结与讨论  77-78
第五章 结论  78-80
附录 主要英文符号对照表  80-82
参考文献  82-90
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果  90-92
致谢  92-94
个人简历  94-95

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中图分类: > 农业科学 > 农业基础科学 > 肥料学 > 农家肥料 > 堆肥、沤肥
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