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CCoAOMT和4CLcDNA的克隆及转基因紫穗槐的研究

作　者: 姜爽
导　师: 颜炜群
学　校: 吉林大学
专　业: 医学生物工程学
关键词: CCoAOMT 4CL 克隆转基因紫穗槐
分类号: S792.26
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 102次
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内容摘要

利用生物工程手段生产低木质素含量的树种,有望从源头上解决造纸制浆过程中的工业污染问题,对研究木质素生物合成与代谢机制、基因表达与调控有重要意义。为培育低木质素含量、更适于造纸工业的优质树种,本研究首先克隆了木质素生物合成酶咖啡酰辅酶A甲基转移酶(CCoAOMT)和4-香豆酸辅酶A连接酶( 4CL )的cDNA序列,并构建了植物反义表达载体AP-CCoAOMT、AP-4CL和双价表达载体AP-CC;通过冻融法将其转入根癌农杆菌EHA105,用根癌农杆菌介导的转化法将目的基因反向导入到紫穗槐的基因组中,经卡那霉素筛选,获得了批量抗性幼苗,PCR检测抗性植株,为最终培育出低木质素含量,更适于造纸工业的优质树种奠定了一定的基础。

全文目录

提要  4-5
英文缩略词表  5-8
第一章绪论  8-25
  第一节木质素的基本特征  8-10
  第二节木质素的生物合成  10-17
  第三节木质素生物合成途径调控的研究进展  17-22
  第四节问题与展望  22-25
第二章紫穗槐 CCoAOMT 和4CL cDNA 的克隆与反义表达载体的构建  25-40
  第一节实验材料  25-27
  第二节实验方法  27-35
  第三节实验结果  35-38
  第四节讨论  38-40
第三章农杆菌介导反义CCoAOMT和4CL基因转化紫穗槐  40-54
  第一节实验材料  40-42
  第二节实验方法  42-47
  第三节实验结果  47-51
  第四节讨论  51-54
研究总结  54-55
附录一反义表达载体AP-CCoAOMT 构建示意图  55
附录二反义表达载体 AP-4CL 构建示意图  55-56
附录三反义表达载体AP-CC 构建示意图  56-57
附录四 CCoAOMT cDNA 测序图谱  57-59
附录五 CCoAOMT 表达载体测序图谱  59-60
附录六 4CL 表达载体测序图谱  60-61
参考文献  61-74
中文摘要  74-77
英文摘要  77-81
致谢  81

CCoAOMT和4CLcDNA的克隆及转基因紫穗槐的研究

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