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杏花总黄酮提取、分离、纯化和抗氧化研究
作 者: 于佳佳
导 师: 李焕荣
学 校: 新疆农业大学
专 业: 食品科学
关键词: 杏花 总黄酮 提取工艺 分离 纯化 抗氧化性
分类号: TQ461
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
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以干杏花为原料、乙醇为浸提溶剂,以提取量为评价指标、研究了水浴法、微波辅助法提取杏花总黄酮的工艺条件;采用硅胶柱层析法初步对杏花总黄酮进行了分离纯化实验;通过DPPH·自由基清除体系和O2-自由基清除体系,对杏花总黄酮的抗氧化活性和自由基清除能力进行综合评价;实验得出以下结论:(1)杏花总黄酮微波辅助提取最佳工艺参数为:乙醇浓度60%,提取时间8min,料液比1:80,提取温度70℃,该条件下提取总黄酮量为210.48mg/g;4个因素对提取效果的影响程度依次为乙醇浓度>提取时间>提取温度>料液比。(2)杏花总黄酮水浴提取较优及经济工艺参数为:乙醇浓度50%,料液比1:30,提取温度70℃,提取时间2h,该条件下提取总黄酮量为175.70mg/g;4个因素对提取效果的影响程度依次为提取时间>乙醇浓度>料液比>提取温度。(3)微波辅助浸提法与水浴浸提法相比,具有提取效率高、省时、节能、工艺简单、杂质少等优点,具有较好的开发应用前景。(4)采用颜色反应,薄层色谱、硅胶柱层析、紫外光谱、超高效液相色谱仪、飞行时间质谱仪对杏花总黄酮分离纯化物进行初步鉴定的结果为:杏花中的黄酮类化合物在乙酸乙酯萃取段部分,含有大量的黄酮、黄酮醇、异黄酮。(5)通过DPPH·自由基清除体系和O2-自由基清除体系,对杏花总黄酮的抗氧化活性和自由基清除能力进行综合评价得出:杏花总黄酮具有一定的DPPH·自由基清除能力及O2-自由基清除能力,是一种具有开发价值的天然抗氧化剂。
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-8 第1章 引言 8-24 1.1 黄酮类化合物的综述 8-22 1.1.1 黄酮类化合物的基本结构 9 1.1.2 黄酮类化合物的分类 9-10 1.1.3 黄酮类化合物的理化性质 10-11 1.1.4 黄酮类化合物生理活性 11-12 1.1.5 黄酮类化合物的应用 12-14 1.1.6 黄酮类化合物提取方法 14-15 1.1.7 黄酮类化合物分离纯化方法 15-17 1.1.8 黄酮类化合物的结构鉴定 17-20 1.1.9 黄酮类化合物的抗氧化、清除自由基作用及其测定方法 20-22 1.2 本课题的研究意义 22 1.3 本课题的研究目标及思路 22-24 第2章 杏花总黄酮微波辅助提取工艺的研究 24-32 2.1 材料与设备 24-25 2.1.1 试验材料 24 2.1.2 试验设备 24 2.1.3 试验试剂 24-25 2.2 试验方法 25-26 2.2.1 样品处理 25 2.2.2 杏花总黄酮的提取方法 25 2.2.3 杏花总黄酮的测定方法 25-26 2.2.4 单因素实验 26 2.2.5 正交优化试验 26 2.3 结果与分析 26-30 2.3.1 标准曲线的绘制 26-27 2.3.2 单因素实验 27-29 2.3.3 微波提取条件优化试验 29-30 2.4 本章小结 30-32 第3章 杏花总黄酮水浴提取工艺的研究 32-39 3.1 材料与设备 32 3.1.1 试验材料 32 3.1.2 试验设备 32 3.1.3 试验试剂 32 3.2 试验方法 32-34 3.2.1 样品处理 32-33 3.2.2 总黄酮测定方法 33 3.2.3 单因素实验 33 3.2.4 正交优化试验 33-34 3.3 结果与分析 34-37 3.3.1 标准曲线的绘制 34 3.3.2 单因素实验 34-36 3.3.3 水浴提取条件优化试验 36-37 3.4 本章小结 37-39 第4章 杏花总黄酮的分离纯化研究 39-51 4.1 试剂与设备 39-40 4.1.1 试验试剂 39 4.1.2 试验设备 39-40 4.2 试验方法 40-43 4.2.1 杏花总黄酮浸膏的制备 40 4.2.2 颜色反应试验 40-41 4.2.3 杏花总黄酮层析柱分离洗脱条件的确定 41 4.2.4 杏花总黄酮的柱分离 41-42 4.2.5 紫外-可见吸收光谱分析 42-43 4.2.6 液相色谱分析 43 4.2.7 质谱分析 43 4.3 结果与分析 43-50 4.3.1 颜色反应初步鉴定杏花总黄酮 43-44 4.3.2 杏花总黄酮柱分离洗脱条件的确定 44-45 4.3.3 杏花总黄酮柱分离混合物A 的成分分析 45-50 4.4 本章小结 50-51 第5章 杏花总黄酮的抗氧化研究 51-58 5.1 材料与方法 51-52 5.1.1 试验材料 51 5.1.2 试验试剂 51 5.1.3 试验设备 51-52 5.2 试验方法 52-53 5.2.1 杏花总黄酮提取物的制备 52 5.2.2 DPPH·自由基清除率的测定 52-53 5.2.3 清除超氧阴离子自由基能力测定 53 5.3 结果分析 53-57 5.3.1 不同浓度杏花总黄酮提取液对DPPH·自由基清除能力 53-54 5.3.2 不同纯度杏花总黄酮提取液对DPPH·自由基清除能力 54-55 5.3.3 邻苯三酚自氧化速率的测定 55 5.3.4 黄酮粗提液对超氧阴离子自由基清除能力 55-56 5.3.5 Vc 对超氧阴离子自由基清除能力 56 5.3.6 黄酮纯化液对超氧阴离子自由基清除能力 56-57 5.4 本章小结 57-58 第6章 结论 58-60 6.1 杏花总黄酮提取工艺研究 58-59 6.1.1 杏花总黄酮含量的测定 58 6.1.2 杏花总黄酮提取最佳工艺条件结果 58-59 6.2 杏花总黄酮的分离纯化研究 59 6.3 杏花总黄酮的抗氧化研究 59-60 6.3.1 DPPH·自由基清除能力结果 59 6.3.2 0~(2-)自由基清除能力结果 59-60 参考文献 60-63 致谢 63-64 作者简介 64
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中图分类: > 工业技术 > 化学工业 > 制药化学工业 > 中草药制剂的生产
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