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中药远志活性成分与安全性研究

作　者: 林敬开
导　师: 闫小平
学　校: 中国中医科学院
专　业: 中药学
关键词: 远志皂苷类成分炮制品提取工艺急性毒性
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

远志始载于《神农本草经》,药用历史悠久,《中国药典》(2010版)规定了远志的来源为远志科植物远志Polygala tenuifolia Willd和卵叶远志Polygala sibirica L的干燥根。本品味苦、辛,温,归心、肾、肺经,具有安神益智,交通心肾,祛痰,消肿等功效,临床常用于治疗心肾不交引起的失眠多梦、健忘惊悸、神志恍惚、咳痰不爽、疮疡肿毒、乳房肿痛等症状。然而近年来临床发现远志常规用量可引起轻度恶心、呕吐等不良反应,现代研究初步认为皂苷类成分可能为远志中主要的毒性成分,对胃黏膜有刺激作用。为探讨远志引起不良反应的起因及机理,本课题对远志几种常用炮制品(生远志、甘草制远志与蜜制远志)的皂苷类成分进行了比较分析,以探讨远志炮制前后皂苷类成分的变化,并进一步研究其急性毒性,为远志选择合理的炮制工艺及临床安全有效使用提供科学依据。本研究共分为5章。第一章文献综述本章节分别对远志的炮制沿革、化学成分、药理作用、提取工艺及炮制现代研究进行概况总结,共引用文献107篇。第二章建立远志中皂苷类成分远志酸与远志皂苷元的含量测定方法及进行方法学考察。目的：建立远志中皂苷类成分的含量测定方法。方法：采用反相高效液相色谱法,色谱柱Agilent ZORBAX SB-C18(4.6mm×250mm,51μm)；柱温25℃；流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(41：59),流速1mL·min-1;检测波长210nm。结果：远志酸在0.420-4.200μg范围内与峰面积呈现良好的线性关系,r=0.9999,远志皂苷元在0.440-4.400gg范围内与峰面积呈现良好的线性关系,r=1,远志酸平均回收率为98.06%(n=6,RSD=1.20),远志皂苷元平均回收率为95.02%(n=6,RSD=1.18)。结论：该方法简便、准确、重现性好,可以用来控制远志皂苷类成分含量。第三章对远志生品及其两种炮制品(制远志与蜜远志)的皂苷类成分进行分析比较。目的：研究生远志、制远志、蜜远志中皂苷类成分含量的差异。方法：以远志酸和远志皂苷元含量为指标对三种炮制品进行HPLC测定。色谱柱Agilent ZORBAX SB-C18(4.6mm×250mm,5μm);柱温25℃；流动相为乙腈-0.1%磷酸(41：59)；；流速1.0mL·min-1;检测波长21Onm。结果：远志酸含量和远志皂苷元含量,均为制远志>生远志>蜜远志。结论：不同炮制方法能改变远志皂苷类成分的含量,蜜远志的远志酸含量与远志皂苷元含量均低于生远志与制远志。第四章应用Doehlert设计-渴求函数-响应曲面优化法对远志中皂苷类成分的提取工艺进行优化。目的：研究远志皂苷类成分的最佳提取工艺。方法：以溶媒倍量、乙醇浓度、提取时间、提取次数为考察因素,干膏得率、远志酸提取率、远志皂苷元提取率为考察指标,应用Doehlert设计-渴求函数-响应曲面优化法对远志中皂苷类成分的提取工艺进行优化。结果：远志皂苷类成分提取的最佳工艺为10倍量60%乙醇回流提取3次,每次2h。结论：用Doehlert设计-渴求函数-响应曲面可对试验设计中的考察指标与考察因素的函数关系进行直观的描绘,具有方便,预测性好的优点,其结果更能反映试验本身的实际情况。第五章对远志生品及其两种炮制品(制远志与蜜远志)的水提取物及乙醇提取物进行急性毒性比较。目的：比较生远志、制远志、蜜远志水提取液及乙醇提取液对小鼠的急性毒性,为远志的毒性研究及临床安全用药提供科学依据。方法：分别制备生远志、制远志、蜜远志的60%乙醇提取液及水提取液,测定其总皂苷含量,并采用灌胃给药,观察14d内小鼠的中毒情况及死亡情况,用改良寇氏法分别测定其半数致死量及可信限。结果：制远志的乙醇提取液中总皂苷含量最高(22.0894mg·ml-1),其毒性也最大(LD50=3.120±0.439g·kg-1)；而蜜远志水提取液中的总皂苷含量最低(6.1745mg·m1-1),其毒性也最低(LD50=14.976±2.110g·kg-1)。结论：不同炮制方法能改变远志皂苷类成分的含量,远志的毒性与总皂苷的含量成正比,总皂苷含量越高,其毒性越大。

全文目录

缩略词表  6-8
摘要  8-11
Abstract  11-14
前言  14-16
第一章文献综述  16-38
  1 炮制沿革  16-17
  2 化学成分研究  17-20
  3 药理作用研究  20-25
  4 提取工艺研究  25-26
  5 炮制现代研究  26-29
  6 结语  29
  参考文献  29-38
第二章远志中皂苷类成分含量测定方法学研究  38-44
  1 实验材料  38
  2 方法与结果  38-42
  3 小结与讨论  42-43
  参考文献  43-44
第三章生远志及其炮制品(制远志与蜜远志)总皂苷含量的比较研究  44-48
  1 实验材料  44-45
  2 方法与结果  45-47
  3 小结与讨论  47
  参考文献  47-48
第四章 Doehlert设计结合多重响应的渴求函数优化法对远志中皂苷类成分的提取工艺优化研究  48-58
  1 Doehlert设计概述  48-49
  2 实验材料  49-50
  3 方法与结果  50-56
  4. 小结与讨论  56
  参考文献  56-58
第五章远志生品及其两种炮制品(制远志与蜜远志)水提取物及乙醇提取物的急性毒性研究  58-64
  1 实验材料  58-59
  2 方法与结果  59-62
  3 小结与讨论  62
  参考文献  62-64
结语  64-66
致谢  66-68
个人简历  68

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