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抗脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原单克隆抗体的制备及其在Sabin IPV效力检测中的应用

作　者: 褚学者
导　师: 李琦涵；李卫东；廖国阳；姜述德
学　校: 昆明医学院
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 脊髓灰质炎病毒 Sabin株 D抗原单克隆抗体
分类号: R392
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 66次
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内容摘要

脊髓灰质炎(poliomyelitis)(脊灰)是一种传播广泛、侵犯中枢神经系统的病毒性传染病，自1988年实施消灭脊髓灰质炎(脊灰)战略以来，我国通过接种口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(OPV)消灭了本土野毒株引起的脊髓灰质炎。但是仍存在OPV引起的疫苗相关麻痹病例(VAPP)和疫苗衍生株(VDPV)，脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)基本可避免OPV上述缺点。WHO指出当全球证实消除脊灰后，将停止使用OPV，届时可能需要脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)来长期保持脊灰免疫水平。相对于野毒株IPV，Sabin株IPV在制造和使用过程中更安全，对它的研究受到了WHO的高度重视。目前生产减毒株灭活疫苗的国家有中国、日本及荷兰。我所正在积极研制Sabin IPV，D抗原量是体外测定IPV效力的关键指标，与疫苗在人体内免疫效力有较好的一致性。目前国际上尚缺乏Sabin IPV D抗原检测的标准化的试剂，本实验应用杂交瘤技术所制备的抗Ⅱ型Sabin株D抗原单克隆抗体分子量为150KD；纯化抗体的ELISA效价为1：2.4×10~6，中和抗体效价为1：1.3×10~4；与Ⅱ型Sabin株C抗原、Ⅰ型、Ⅲ型Sabin病毒抗原不发生交叉反应，特异性良好。并用此单克隆抗体的ELISA法与本室建立的多抗方法进行比较，同时对三价Sabin IPV疫苗中Ⅱ型D抗原的含量进行测量，发现在0.125Du／ml-2 Du／ml范围内应用单抗测量D抗原的直线相关系数为0.998、0.966、0.903；而使用本室建立的多抗方法直线相关系数为1.000、0.998、0.986。本实验制备的单克隆抗体具有良好的特异性，可为Sabin IPV体外效力检测的标准化奠定基础。

全文目录

目录  3-4
摘要  4-5
Abstract  5-6
前言  6-11
一、实验材料和方法  11-28
二、结果和分析  28-37
三、讨论  37-41
四、小结  41-42
五、参考文献  42-45
六、论文综述  45-62
七、附录一  62-64
八、附录二  64-65
九、致谢  65-66
十、研究生简历  66-67
十一、声明  67

抗脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原单克隆抗体的制备及其在Sabin IPV效力检测中的应用

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