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中国玉米丝黑穗病菌生理分化研究

作　者: 马军韬
导　师: 高洁
学　校: 吉林农业大学
专　业: 植物病理学
关键词: 玉米丝黑穗病菌 生理分化 鉴别寄主 RAPD分析
分类号: S435.13
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 130次
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内容摘要


本文采用鉴别寄主技术和随机扩增多态性DNA技术(RAPD)相结合的方法对中国部分省区玉米丝黑穗病菌的生理分化惰况进行了初步研究，从遗传物质DNA水平上证实了丝黑穗病菌存在明显的致病力分化现象，绝非普通意义上的表型差异。 经过两年的田间调查和人工接种预试验并结合前人的工作，按照特定的标准确定了Mo17、黄早4、辽1311、自330、红色爆裂等5个玉米自交系做为丝黑穗病鉴别寄主，5个自交系对丝黑穗病抗、感差异明显，大致上代表了我国骨干玉米自交系的血缘。 采用5个鉴别寄主应用新的抗性鉴定标准将来自于吉林省、辽宁省、黑龙江省、内蒙古自治区的玉米丝黑穗病菌大致划分为3个致病类型。按照致病力的强弱依次为致病类型Ⅰ，吉林省长春地区、黑龙江省哈尔滨和双城地区以及内蒙古通辽地区的玉米丝黑穗病菌；致病类型Ⅱ，辽宁省丹东地区的玉米丝黑穗病菌；致病类型Ⅲ，吉林省白城地区和辽宁省铁岭地区玉米丝黑穗病菌；采用RAPD技术将来自于吉林省、辽宁省、黑龙江省、山西省、河北省、内蒙古自治区的102株玉米丝黑穗病菌大致划分为6个类群(相似系数0.42)，即类群A，吉林省四平、吉林、辽源、松原、柳河地区以及长春少部地区的玉米丝黑穗病菌；类群B，白城、延边、长春大部地区以及内蒙古自治区的玉米丝黑穗病菌吉林省的高粱丝黑穗病菌；类群C，山西省的玉米丝黑穗病菌；类群D，辽宁省的玉米丝黑穗病菌；类群E，来自于河北省的玉米丝黑穗病菌；类群F，来自于黑龙江省的玉米丝黑穗病菌。在更高的相似水平上，类群A和类群B还可以进一步划分为众多的亚群。而且，从聚类分析的结果也可以看出，相似性较大的菌株大多来源于相同或相近的地区，说明玉米丝黑穗病菌的致病力差异存在一定的地域性。同时，鉴于吉林省的高粱丝黑穗病菌亲缘关系较远，也有可能存在致病力分化。 经过反复试验，发明了一套简便的提取玉米丝黑穗病菌冬孢子基因组DNA的方法，通过冷冻研钵、加入冰晶、调节研磨时间等手段可以快速提取出质量较好的基因组DNA，适用于细胞壁较厚物质的基因组DNA的提取。 采用鉴别寄主分析技术和RAPD分析技术两相结合来同时研究多个省区玉米丝黑穗病菌的生理分化在国内尚属首次。

全文目录


中文摘要  6-7
英文摘要  7-9
1 玉米丝黑穗病研究进展  9-22
  1.1 玉米丝黑穗病研究现状  9-17
    1.1.1 玉米丝黑穗病的发生与危害  9-10
    1.1.2 玉米丝黑穗病的症状  10-11
    1.1.3 玉米丝黑穗病菌的生物学特性  11
    1.1.4 玉米丝黑穗病菌的发生规律与侵染循环  11-12
    1.1.5 玉米丝黑穗病的防控  12-13
    1.1.6 玉米丝黑穗病菌的生理分化  13-14
    1.1.7 玉米丝黑穗病菌侵染的一些细胞学研究  14-15
    1.1.8 玉米丝黑穗病的鉴定方法  15
    1.1.9 玉米丝黑穗病的抗性分析  15-17
  1.2 分子标记技术在研究病菌生理分化方面的应用  17-21
    1.2.1 同工酶技术在研究病菌生理分化方面的应用  17-18
    1.2.2 DNA分子标记技术在研究病菌生理分化方面的应用  18-21
  1.3 研究的目的和意义  21-22
2 中国玉米丝黑穗病菌鉴别寄主鉴定技术  22-27
  2.1 材料与方法  22-23
    2.1.1 试验材料  22-23
    2.1.2 试验方法  23
  2.2 结果与分析  23-27
    2.2.1 玉米丝黑穗病的鉴别寄主鉴定结果  23-27
3 中国玉米丝黑穗病菌的RAPD分析  27-48
  3.1 材料与方法  27-36
    3.1.1 试验材料  27-30
    3.1.2 试验仪器  30
    3.1.3 试验试剂  30-32
    3.1.4 RAPD反应所需材料  32-33
    3.1.5 丝黑穗病菌冬孢子基因组DNA的获取  33-34
    3.1.6 RAPD扩增条件的优化  34-35
    3.1.7 产物检测  35-36
    3.1.8 数据处理  36
  3.2 结果与分析  36-48
    3.2.1 玉米、高粱丝黑穗病菌冬孢子基因组DNA的提取结果  36
    3.2.2 优化后的RAPD反应的适宜条件  36-37
    3.2.3 RAPD扩增结果与分析  37-48
4 结果与分析  48-51
  4.1 鉴别寄主分析方法  48
  4.2 RAPD技术分析方法  48-49
  4.3 玉米丝黑穗病菌鉴别寄主分析方法与RAPD分析方法鉴定结果比较  49-50
  4.4 丝黑穗病菌基因组DNA提取方法的改进  50
  4.5 结合两种方法大规模鉴定玉米丝黑穗病菌的生理分化情况  50-51
参考文献  51-56
致谢  56

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 农作物病虫害及其防治 > 禾谷类作物病虫害 > 玉米病虫害
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