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从免疫角度探讨盐酸川芎嗪对早孕小鼠妊娠影响的机理
作 者: 解金辉
导 师: 杨秀萍
学 校: 首都师范大学
专 业: 细胞生物学
关键词: 小鼠 川芎嗪 孕酮 脾淋巴细胞 转化生长因子-β1 免疫组化 原位杂交
分类号: R285
类 型: 硕士论文
年 份: 2006年
下 载: 29次
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内容摘要
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目的:通过检测妊娠中的激素,脾淋巴细胞增殖情况、转化生长因子β1(Transforminggrowth factor β1,TGF-β1)及其受体(Transforming growth factor β1 receptor Ⅰ,TGF-β1RI)表达的情况,探讨妇科临床常用药盐酸川芎嗪做为妊娠禁忌药的机理。 方法:将妊娠小鼠分为高、中、低三组,从妊娠第1天持续灌胃不同浓度川芎嗪(10mg/天,2mg/天,0.4mg/天),持续6天,同时设立对照组,灌胃生理盐水。于妊娠第7天,眼眶取血,同时摘取脾脏、子宫等组织。通过放射免疫法测定血清中的孕酮(Progesterone,P)含量,通过细胞培养及MTT法观察脾细胞增殖情况。通过免疫组化法分析子宫蜕膜中TGF-β1及其受体的表达,通过原位杂交法检测TGF-β1 mRNA表达情况。 结果:高浓度组血清中孕酮浓度与对照组相比,明显增加且差异显著(P<0.01)。对于脾淋巴细胞增殖,低浓度组MTT比色后OD值与对照组基本相同,而中、高浓度组均显著高于对照组(P<0.01),且随川芎嗪剂量增加而增加。TGF-β1、TGF-β1R、TGF-β1mRNA均为胞浆着色,细胞核内无着色。TGF-β1免疫组化着色面积比例高于TGF-β1RI。TGF-β1着色面积也高于TGF-β1mRNA的原位杂交着色面积,三者在子宫内表达部位大致相同。对于TGF-β1,高浓度组与对照组相比,表达量显著降低,具有明显差异(P<0.05)。同时,通过对TGF-β1mRNA检测发现高浓度组与对照组相比,mRNA量也是显著降低,差异显著(P<0.05)。通过对TGF-β1RI检测发现无论是低、中,还是高浓度组,与对照组相比均无明显差异(P>0.05)。 结论:对妊娠小鼠灌胃川芎嗪,可以促进脾淋巴细胞的增殖,可能是因为川芎嗪抑制了TGF-β1的表达,同时孕酮虽然作为一种免疫抑制剂,但是其作用的发挥还需要依赖于包括TGF-β1等的各种细胞因子。
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全文目录
中文摘要 3-4 Abstract 4-7 综述 7-14 1、材料与方法 14-29 1.1 实验动物 14 1.2 实验仪器 14-15 1.3 试剂及耗材 15-18 1.4 实验方法 18-28 1.4.1 血清孕酮的放射免疫测定 18-19 1.4.2 脾细胞增殖试验 19-20 1.4.3 免疫组化 20-23 1.4.4 原位杂交 23-28 1.5 统计学处理 28-29 2、结果 29-31 2.1 不同浓度川芎嗪对孕7天小鼠血清内孕酮水平的影响 29 2.2 不同浓度川芎嗪灌胃组脾细胞增殖的比较 29-30 2.3 TGF-β1、TGF-β1RI、免疫组化及TGFβ-1mRNA原位杂交结果 30-31 3、讨论 31-35 参考文献 35-39 附录 39-43 免疫组化与原位杂交图片 39-43 致谢 43
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学
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