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中草药穿龙薯蓣的组织培养研究

作　者: 张数鑫
导　师: 于元杰
学　校: 山东农业大学
专　业: 作物遗传育种
关键词: 穿龙薯蓣 组织培养 毛状根 薯蓣皂苷
分类号: S567.239
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 139次
引　用: 4次
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内容摘要


本研究以野生穿龙薯蓣(Dioscorea nipponica Makino)为试材,采用其幼年型和成年型枝条的带芽茎段以及当年生的幼根为外植体,建立再生体系,以多元设计进行试验,获得如下结果:1愈伤组织诱导:4℃处理外植体能提高愈伤组织诱导频率,可比对照提高9%-13%;低温存放时间超过6天会对组织产生损伤作用,影响外植体诱导愈伤组织的能力。不同的外植体愈伤组织的诱导率和生长差异很大。茎尖的诱导率最高,在6-BA1.0mg/L+2,4-D4.0 mg/L诱导培养基上可达75%;幼根的诱导率次之,最高达72.5%。茎尖和幼根诱导的愈伤组织进一步增殖继代过程中,幼根诱导的愈伤组织长势比茎尖愈伤组织好,增殖速度也快。2不定芽的诱导与增殖:将生长快的愈伤组织转接到MS+6-BA2.0mg/L+NAA2.0mg/L多芽体诱导培养基中,淡黄绿色的愈伤组织逐渐变绿,并形成很多突起,进而形成多芽体。最大诱导率可达75.5%。6-BA浓度在1.5-2.5mg/L的范围内既可以保持较高的多芽体芽数,又使芽健壮。MS+6-BA2.0mg/L+NAA2.0mg/L+AC0.5g/L培养基可以有效的诱导穿龙薯蓣腋芽产生不定芽,最高诱导率可达85.7%。穿龙薯蓣不定芽增殖培养最佳培养基为MS+6-BA 1.5mg/L +NAA0.5mg/L,增殖系数达到3.22。3毛状根的诱导与培养:幼根接种在诱导愈伤组织的培养基上,部分外植体可诱导出毛状根,在不定芽的增殖培养过程中,不定芽的基部也有毛状根的产生。影响毛状根增殖最大的因素为生长素IBA,其次为6-BA,然后是培养基,而AC影响效果不明显。

全文目录


中文摘要  6-7
ABSTRACT  7-9
缩写词表  9-10
1 引言  10-20
  1.1 组织培养技术发展概述  10
  1.2 药用植物的组织培养研究概况  10-16
    1.2.1 药用植物的组织培养研究现状  10-11
    1.2.2 组织培养技术在药用植物上的应用  11-16
    1.2.3 药用植物组织培养存在的问题  16
  1.3 薯蓣科植物组织培养研究的现状  16-18
    1.3.1 器官培养  16-17
    1.3.2 体细胞胚胎培养  17
    1.3.3 愈伤组织培养  17-18
    1.3.4 细胞培养  18
  1.4 本研究的目的和意义  18-20
2 材料与方法  20-27
  2.1 试验材料  20
    2.1.1 供试材料  20
    2.1.2 主要药品、试剂和仪器设备  20
    2.1.3 基本培养基  20
    2.1.4 培养条件  20
  2.2 试验设计  20-25
    2.2.1 技术路线  20-21
    2.2.2 预备实验  21
    2.2.3 试验方案  21-25
  2.3 数据统计与分析  25-27
3 结果与分析  27-41
  3.1 愈伤组织的诱导  27-32
    3.1.1 冷冻外植体对愈伤组织诱导的影响  27
    3.1.2 不同种类外植体对愈伤组织诱导的影响  27-28
    3.1.3 生长素 NAA、2，4-D 对愈伤组织诱导的影响  28-29
    3.1.4 毛状根的诱导与培养  29-32
  3.2 不定芽诱导  32-35
    3.2.1 不同植物生长调节剂对不定芽诱导的影响  32-33
    3.2.2 带腋芽茎段的直接增殖产生不定芽  33-35
  3.3 再生苗的增殖培养  35-36
    3.3.1 6-BA 浓度对穿龙薯蓣再生苗增殖生长的影响  35
    3.3.2 6-BA 和 IBA，NAA 组合对穿龙薯蓣再生苗增殖生长的影响  35-36
  3.4 壮苗培养  36-38
  3.5 生根培养  38-40
  3.6 炼苗移栽  40-41
4 讨论  41-45
  4.1 培养条件和培养基的影响  41
  4.2 生长调节剂的影响  41-42
  4.3 愈伤组织褐变机理探索及预防  42-43
  4.4 毛状根的诱导分化与利用  43-44
  4.5 进一步研究内容  44-45
5 结论  45-48
图版说明  48-49
参考文献  49-56
致谢  56-57
攻读学位期间发表论文情况  57

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