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白藜芦醇诱导人髓母细胞瘤细胞凋亡和细胞周期阻滞的分子机制探讨

作　者: 李在霞
导　师: 刘佳
学　校: 大连医科大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 白藜芦醇 caspase 8 cyclin A cyclin B1 cdc25A 细胞周期髓母细胞瘤
分类号: R739.41
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

目的:1)检测在体情况下人髓母细胞瘤组织中凋亡相关蛋白caspase 8的表达特点;2)研究人髓母细胞瘤细胞系UW228-2和-3凋亡相关蛋白caspase 8及细胞周期相关蛋白cyclin A、cyclin B1和cdc25A的表达情况;3)探讨白藜芦醇对caspase 8、cyclin A、cyclin B1和cdc25A表达的影响;4)观察反义寡核苷酸封闭c-Myc基因后cyclin A和cyclin B1表达水平的变化。通过上述研究,进一步了解白藜芦醇诱导人髓母细胞瘤细胞凋亡和细胞周期阻滞的分子机制,以期加深对髓母细胞瘤分子生物学特点的认识,为改善临床髓母细胞瘤的治疗现状提供新的实验室指标和理论根据。方法:人髓母细胞瘤细胞系UW228-2和-3培养于含有10%胎牛血清的DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium,GIBCO)培养基中,分别用100μM白藜芦醇(resveratrol)及0.6μM c-Myc反义寡核苷酸处理细胞,观察它们对靶细胞的作用特点;采取台盼蓝计数法对细胞的增殖活性进行检测;采用免疫细胞化学、Western blot和RT-PCR等方法分析各实验组中caspase 8、cyclin A、cyclin B1和cdc25A基因表达水平的改变以及与白藜芦醇诱导的细胞凋亡和细胞周期阻滞的关系。将临床收集的石蜡包埋标本(髓母细胞瘤及瘤旁相对正常脑组织)制成石蜡组织阵列,进行caspase 8的免疫组织化学染色。采用流式细胞技术检测白藜芦醇对UW228-2和-3细胞系细胞周期及细胞凋亡情况的影响。通过阳离子脂质体转染UW228-2细胞封闭c-Myc基因,来观察cyclin A、cyclin B1表达的变化。结果:1)在10例人髓母细胞瘤组织中,仅有5例caspase 8表达阳性,且与瘤旁相对正常脑组织相比,表达水平降低;2)白藜芦醇处理后UW228-2细胞caspase 8的表达明显升高,且免疫细胞化学结果

全文目录

一、正文  5-37
  （一）中文摘要  5-7
  （二）英文摘要  7-9
  （三）前言  9-11
  （四）材料和方法  11-17
  （五）结果  17-25
  （六）讨论  25-31
  （七）结论  31-32
  （八）参考文献  32-37
二、文献综述  37-48
  （一）综述  37-43
  （二）参考文献  43-48
三、致谢  48-49
学位论文版权使用授权书  49

白藜芦醇诱导人髓母细胞瘤细胞凋亡和细胞周期阻滞的分子机制探讨

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