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mTOR抑制剂Rapamycin抗Hela细胞双向电泳差异性分析

作　者: 朱伦
导　师: 陈增良
学　校: 浙江大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白雷帕霉素 MTT比色法
分类号: R737.33
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

背景雷帕霉素(Rapamycin;Sirolimus;西罗莫司)最初从一种土壤细菌中分离得到,是mTOR的特异性抑制剂,有较强的抑制免疫和抗真菌作用。由于雷帕霉素的这种作用只针对部分肿瘤细胞,且必须依赖其他药物才能使肿瘤逆转,因而对mTOR复合物信号通路在体内发挥功能的具体机制及mTOR的底物存在诸多争议。本实验首先采用MTT比色法,观察雷帕霉素对人宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用,并计算出48h时的半数抑制浓度IC50。进一步运用双向电泳的方法,比较雷帕霉素作用前后细胞蛋白表达的变化,从而筛选出与mTOR活性变化相关的特异性蛋白质。从而为进一步研究mTOR抑制剂雷帕霉素抑制肿瘤细胞生长的作用机制开辟一条新的途径。实验方法 1.细胞培养及雷帕霉素半抑制浓度IC50的测定以含10%FBS的RPMI1640培养基培养Hela细胞,按MTT法,酶标仪490nm处测得各组吸光度,计算雷帕霉素对Hela细胞的抑制率。以抑制率为纵坐标,药物浓度为横坐标,绘制48小时生长抑制曲线,运用改良的寇氏法计算出IC50。 2.以固相pH梯度等电聚焦(IEF)为第一向的双向电泳分别以相同条件培养雷帕霉素处理过与未处理的Hela细胞,提取处理组与

全文目录

中文摘要  3-5
英文摘要  5-8
论文  8-35
  前言  8-9
  材料与仪器  9-15
  实验方法  15-20
  实验结果  20-29
  讨论  29-33
  小结  33-34
  参考文献  34-35
综述  35-48
发表论文情况  48-53
致谢  53

mTOR抑制剂Rapamycin抗Hela细胞双向电泳差异性分析

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