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大蒜胚性细胞悬浮系的建立

作　者: 孟新亚
导　师: 孙治强；JOY Fleming
学　校: 河南农业大学
专　业: 蔬菜学
关键词: 大蒜 愈伤组织 胚性细胞 悬浮培养
分类号: S633
类　型: 硕士论文
年　份: 2002年
下　载: 153次
引　用: 2次
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内容摘要


本文对大蒜胚性细胞悬浮系的建立进行系统的研究，其中对诱导大蒜胚性愈伤组织时外植体的确定、培养基的筛选及悬浮培养阶段细胞干鲜重变化、细胞个数变化等生理指标进行了研究。并对各个培养阶段愈伤组织进行石蜡切片，分析细胞形态结构和变化特点。结果表明： 1．适宜诱导大蒜胚性愈伤组织且生长正常的外植体为茎尖和根尖。最不适宜诱导胚性愈伤组织的外植体为保护叶片。 2．诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS+2，4-D0.5mg/L和MS+2，4-D2.0mg/L+KT0.5mg/L，茎尖和根尖在这两种培养基上的愈伤组织诱导为100％，且愈伤组织生长正常。 3．悬浮培养阶段细胞干、鲜重的测定结果表明，在培养前期细胞生长速度快，并于第15天达到峰值。然后细胞重量有所下降。细胞个数变化基本呈“S”形。 4．愈伤组织石蜡切片表明，具有胚性愈伤组织结构的细胞排列紧密，细胞核大，细胞质浓厚，细胞核随着继代次数的增加逐渐增大；非胚性愈伤组织的细胞排列疏松，细胞核小，细胞质稀薄。 5．再生能力测试表明，胚性愈伤组织再生能力强，非胚性愈伤组织再生能力弱，并且随着继代次数的增加逐渐减少以至消失。 6．细胞液pH值在培养前期变化大，随着培养时间的延长变化值逐渐减小。

全文目录


中文摘要  7-8
1 文献综述  8-23
  1．1 大蒜退化的原因与防止措施研究进展  8-9
    1．1．1 退化原因  8-9
    1．1．2 大蒜退化的防止措施  9
      1．1．2．1 脱毒繁殖  9
      1．1．2．2 控制病毒的传播与积累  9
  1．2 植物组织培养的研究进展  9-16
    1．2．1 植物细胞悬浮培养技术的研究进展  11-15
      1．2．1．1 胚性愈伤组织与非胚性愈伤组织  11-13
      1．2．1．2 愈伤组织的诱导  13-14
      1．2．1．3 培养基及培养条件  14-15
    1．2．2 细胞悬浮培养  15-16
  1．3 大蒜组织培养的研究进展  16-18
    1．3．1 以器官片段做外植体  17
    1．3．2 大蒜叶片做外植体进行愈伤组织诱导  17-18
    1．3．3 大蒜花梗、花原始体的组织培养  18
  1．4 体细胞胚的诱导  18-23
    1．4．1 体细胞胚发生的特点与意义  18-20
    1．4．2 体细胞胚的遗传稳定性与变异性  20-23
2 引言  23-24
3 材料与方法  24-29
  3．1 植物细胞悬浮系的建立  24-26
    3．1．1 愈伤组织的诱导  24-25
      3．1．1．1 材料来源与予处理  24-25
    3．1．2 基本培养基的配制  25-26
  3．2 愈伤组织的细胞形态观察  26
    3．2．1 石蜡切片方法  26
    3．2．2 石蜡切片观察  26
  3．3 细胞悬浮系生理指标的测定  26-27
    3．3．1 材料准备  26
    3．3．2 生理指标的测定  26-27
      3．3．2．1 细胞干、鲜重  26-27
      3．3．2．2 细胞液PH值  27
      3．3．2．3 细胞个数  27
  3．4 激素对愈伤组织诱导的影响  27-29
    3．4．1 大蒜愈伤组织诱导培养基的筛选  28
    3．4．2 大蒜愈伤组织的继代  28
    3．4．3 大蒜细胞悬浮培养及继代  28-29
  3．5 再生能力的测定  29
4 结果与分析  29-42
  4．1 大蒜细胞悬浮系的建立  29-33
    4．1．1 愈伤组织的诱导  29-33
      4．1．1．1 外植体类型的影响  29-31
      4．1．1．2 培养基类型对愈伤组织诱导的影响  31-32
      4．1．1．3 激素对愈伤组织诱导的影响  32-33
    4．1．2 愈伤组织的继代培养  33
  4．2 细胞悬浮系的建立  33-42
    4．2．1 大蒜细胞的悬浮培养  33-34
    4．2．2 细胞悬浮系生理指标的测定  34-40
      4．2．2．1 细胞正常生长条件下生理指标的测定  34
      4．2．2．2 细胞个数  34-36
      4．2．2．3 细胞鲜重、干重  36-39
      4．2．2．4 细胞液PH值的测定  39-40
    4．2．3 愈伤组织再生能力的测试  40-41
    4．2．4 大蒜愈伤组织的细胞形态学观察  41-42
5 结论与讨论  42-44
  5．1 结论  42-43
  5．2 讨论  43-44
参考文献  44-50
附表1  50-51
附表2  51-52
英文摘要  52-54
图版  54-62

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 蔬菜园艺 > 葱蒜类
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