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黄瓜芽黄突变的分子细胞生物学特性初步研究

作　者: 李娟娟
导　师: 高剑峰
学　校: 石河子大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 芽黄突变体抑制消减杂交差异表达基因
分类号: S642.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的: (1)以六个正常黄瓜品种和一个芽黄突变体黄瓜为研究对象,对黄瓜染色体进行了细胞染色体计数,并对其进行核型分析。为与芽黄突变相关基因的定位提供参考依据。(2)探讨芽黄突变体叶片组织与其野生型叶片组织的差异表达基因。方法: (1)采用常规压片法对黄瓜根尖进行处理、压片、镜检,分析结果。(2)取芽黄突变体叶片组织与其野生型叶片组织,应用抑制消减杂交技术构建正、反向消减杂交文库。对抑制消减杂交文库中的克隆进行酶切鉴定,将酶切片段位于200～900bp之间的阳性克隆进行测序,测序结果经过软件Sequence Scanner V1.0去除酶切位点,再经BlaxtX和GenBank公共数据库进行比对分析。结果与结论:(1)根据正常黄瓜品种与突变体黄瓜染色体的核型分析,结果表明正常黄瓜与芽黄突变体黄瓜的染色体数目均为2n=14,属二倍体植物,染色体基数为7。核型类型均为1A型,属于对称核型。对不同黄瓜品种间染色体长度进行方差分析,结果P>0.05。说明在染色体水平上芽黄突变体与正常的黄瓜几乎没有区别。(2)共鉴定出阳性克隆240个,其中正向消减文库阳性克隆152个,反向消减文库阳性克隆88个。测序成功的序列有206条。经过比对分析,对159条序列进行格式转化并提交至GenBank,并获得序列号:GH270133—GH270291。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-8
英文缩写词表  8-9
1 绪论  9-19
  1.1 芽黄现象及研究现状  9-12
  1.2 核型分析的理论和方法  12-14
  1.3 抑制消减杂交技术原理  14
  1.4 EST 技术及其应用  14-17
  1.5 生物信息学在EST 研究中的应用  17-19
2 六个正常黄瓜品种和一个芽黄突变体的核型分析  19-29
  2.1 材料及试剂  19-20
  2.2 方法  20-21
  2.3 结果  21-27
  2.4 讨论  27-29
3 黄瓜芽黄突变体抑制消减杂交文库的构建及序列的比对分析  29-52
  3.1 材料与方法  29-35
  3.2 结果与分析  35-48
  3.3 讨论  48-52
结论  52-53
参考文献  53-58
附录一 EST 序列提交格式  58-60
附录二 GenBank 登录的序列  60-71
作者简介  71-72
致谢(Acknowledgements)  72-73
导师评阅表  73

黄瓜芽黄突变的分子细胞生物学特性初步研究

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