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促性腺激素释放激素（GnRH）在广西摩拉杂交水牛下丘脑—垂体—卵巢轴的分布

作　者: 黎金秀
导　师: 宋小白
学　校: 广西大学
专　业: 基础兽医
关键词: GnRH 下丘脑-垂体-卵巢轴免疫组化 SuperPicTureTM二步法广西摩拉杂交水牛
分类号: S823.8~3
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 128次
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内容摘要

本研究采用石蜡切片、Nissl染色、H-E染色及免疫组织化学SuperPicTure^TM二步法检测5头广西摩拉杂交母水牛的下丘脑、垂体和卵巢中促性腺激素释放激素（GnRH）的分布情况,旨在研究GnRH在下丘脑、垂体及卵巢的分布上的联系,进而了解GnRH在下丘脑、垂体及卵巢三者之间分泌释放途径,为进一步研究GnRH的合成和作用机制提供形态学依据,并对广西摩拉杂交水牛的繁殖育种起到一定的参考指导作用。试验结果显示:广西摩拉杂交水牛下丘脑GnRH免疫阳性神经元大小差异不显著,细胞直径变化不大。GnRH免疫阳性神经元主要分布于视前内侧核、视上核、室旁核、视前外侧核,其次是背内侧核、视交叉上核、前核、弓状核、后核,腹内侧核及乳头体核,而正中隆起分布最少。视上核的GnRH免疫阳性神经元最为密集,阳性神经元出现率为27.88±13.37,而视前外侧核的神经元最为疏松,阳性细胞出现率最低,为11.69±4.43。正中隆起的GnRH免疫阳性产物灰度值最高,为135.24±16.32,表明正中隆起GnRH免疫阳性反应最强,而背内侧核的灰度值最低,为171.17±26.93。GnRH免疫阳性纤维只分布于正中隆起、弓状核、室旁核和乳头体核,尤以正中隆起最多,而在其他核团没有发现GnRH免疫阳性纤维。在第三脑室附近及乳头体核的毛细血管发现有GnRH免疫阳性神经元及GnRH免疫阳性纤维。广西摩拉杂交水牛的神经垂体未发现有GnRH免疫阳性产物,只在腺垂体远侧部发现有GnRH免疫阳性细胞,细胞以弱阳性为主,平均灰度值为175.78±16.73。在卵巢中发现GnRH免疫阳性产物存在于卵巢生殖上皮细胞、颗粒细胞和黄体细胞,且在黄体中发现有少量的带细小突起的GnRH免疫阳性细胞。结论:首次发现GnRH存在于广西摩拉杂交水牛下丘脑-垂体-卵巢轴的各个环节。首次发现广西摩拉杂交水牛下丘脑中各主要核团都有GnRH免疫阳性神经元的分布,尤其以视上核、视前核、室旁核分布最多。首次发现GnRH免疫阳性产物只存在广西摩拉杂交水牛的腺垂体中。首次在广西摩拉杂交水牛卵巢中生殖上皮细胞、颗粒细胞和黄体细胞发现有GnRH免疫阳性产物。

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-9
缩写及符号说明  9-12
第一部分综述  12-33
  第一章下丘脑-垂体-卵巢轴在生殖中的作用  12-20
    1.1 下丘脑-垂体-卵巢轴的结构及分泌激素的种类  12-15
      1.1.1 下丘脑的结构及分泌激素的种类  12-14
      1.1.2 垂体的结构及分泌激素的种类  14-15
      1.1.3 卵巢的结构及分泌激素的种类  15
    1.2 下丘脑-垂体-性腺轴的在生殖中的作用  15-20
      1.2.1 中枢神经系统对生殖轴的调节  16-17
      1.2.2 神经肽及神经递质对生殖轴的调节  17-18
      1.2.3 性激素及其它激素对生殖轴调节  18
      1.2.4 细胞因子与生殖轴调节  18-20
  第二章促性腺激素释放激素(GnRH)的研究进展  20-33
    2.1 GnRH多肽的种类及结构特点  20-22
    2.2 GnRH的合成、分泌、释放和降解  22-23
    2.3 GnRH神经元的形态及分布  23-24
    2.4 GnRH神经元的季节性变化  24
    2.5 GnRH的生物学功能  24-26
      2.5.1 GnRH在垂体水平的功能  24-25
      2.5.2 GnRH在性腺水平的功能  25
      2.5.3 GnRH与肿瘤  25
      2.5.4 GnRH与免疫  25
      2.5.5 GnRH与消化系统  25-26
    2.6 GnRH的作用机制  26-29
      2.6.1 受体结构  26
      2.6.2 GnRH-R的定位  26
      2.6.3 调节GnRH-R水平的影响因素  26-27
      2.6.4 脱敏机制  27
      2.6.5 信号转换蛋白(G蛋白)  27
      2.6.6 Ca2+参与调节机制  27-28
      2.6.7 激活磷脂酶C(PKC)和二酞甘油(DG)导致信号级联反应  28
      2.6.8 LH/FSH峰出现和GnRH-R表达  28-29
    2.7 GnRH在家畜繁殖方面的应用  29-31
      2.7.1 诊断方面  29-30
      2.7.2 提高情期受胎率  30
      2.7.3 缩短产后发情时间  30
      2.7.4 提高家畜超排效果和产仔率  30
      2.7.5 提早家畜的性成熟  30
      2.7.6 治疗母畜卵巢疾病  30-31
      2.7.7 提高公畜精液品质  31
      2.7.8 提高瘦肉率  31
      2.7.9 治疗公畜的少精症和无精症  31
      2.7.10 用于公畜去势  31
      2.7.11 对报窝母鸡催醒  31
    2.8 GnRH激活剂类似物及应用  31-32
    2.9 结语  32-33
第二部分试验研究  33-48
  前言  33-35
  第一章材料与方法  35-38
    1.1 材料  35
      1.1.1 试验动物  35
      1.1.2 主要试剂  35
      1.1.3 主要仪器设备  35
    1.2 试验方法  35-38
      1.2.1 取材  35-36
      1.2.2 切片  36
      1.2.3 H-E染色  36
      1.2.4 Nissl染色  36
      1.2.5 免疫组织化学一步法染色程序  36-37
      1.2.6 图像分析及数据处理  37-38
  第二章实验结果  38-44
    2.1 下丘脑nissl染色结果  38-39
    2.2 下丘脑免疫组化结果  39-41
    2.3 垂体免疫组化结果  41-42
      2.3.1 神经垂体  42
      2.3.2 腺垂体  42
    2.4 卵巢免疫组化结果  42-44
  第三章讨论与分析  44-47
    3.1 下丘脑GnRH阳性神经元的定位  44-45
    3.2 GnRH的释放途径  45
    3.3 腺垂体中GnRH免疫阳性产物的分布及来源  45
    3.4 卵巢中GnRH免疫阳性产物的分布及其来源  45-46
    3.5 免疫组化方法改进  46-47
  第四章结论  47-48
参考文献  48-57
附图  57-78
致谢  78-79
攻读硕士学位期间发表论文  79

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