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大蒜新素对MCMV感染小鼠体内病毒载量影响的实验研究

作　者: 刘兴楼
导　师: 方峰
学　校: 华中科技大学
专　业: 儿科学
关键词: 大蒜新素 鼠巨细胞病毒 MCMV DNA Real time PCR
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要


【目的】①在整体水平上研究大蒜新素对CMV感染的治疗作用。②探明MCMV感染小鼠体内病毒载量的动态变化。③评估大蒜新素治疗对MCMV感染小鼠体内病毒载量的影响。【方法】①MCMV感染动物模型的建立:MCMV(Smith株)经增殖传毒后,选用4.5周龄幼年小鼠,在不使用免疫抑制剂条件下,建立非免疫抑制性MCMV全身播散型感染小鼠模型。②大蒜新素治疗剂量:根据大蒜新素成人中效剂量(120mg/d)换算出小鼠用药的一般剂量(25mg/kg·d)。③实验分组及检测时间点:60只MCMV感染小鼠随机分为安慰剂治疗组(感染组)和大蒜新素治疗组;病毒接种后24h开始药物治疗,治疗后24h记为1d。于1d、3d、7d、14d、28d、45d、60d、75d、90d和120d分别收集唾液腺、肝脏、脾脏和肾脏。④Real time PCR法定量检测安慰剂治疗组和大蒜新素治疗组肝脏、脾脏、肾脏和唾液腺内MCMV DNA相对含量。【结果】①MCMV感染组肝脏中MCMV DNA的动态变化:在安慰剂治疗后1d,肝脏内可检出MCMV DNA,14d时达高峰,随后开始下降, 28d时降至较低水平,随后开始缓慢降低,直至120d。②MCMV感染组脾脏中MCMV DNA的动态变化:在安慰剂治疗后第3d,脾脏内开始检测出MCMV DNA,14d达到高峰,随后开始下降,28d降至较低水平,以后持续下降,直至120d。③MCMV感染组肾脏中MCMV DNA的动态变化:在安慰剂治疗后3d肾脏内开始检测出MCMV DNA,感染后14d达到高峰,随后开始缓慢下降,直至120d。④MCMV感染组唾液腺中MCMV DNA的动态变化:在安慰剂治疗后1d开始即可在唾液腺中检测出MCMV DNA,28d时病毒载量达峰值,随后开始下降,感染后45d降至一相对较高水平,以后维持在该水平左右,直至120d。⑤大蒜新素治疗组肝脏中MCMV DNA的动态变化:大蒜新素治疗组小鼠肝在治疗后1d开始检测出MCMV DNA,随后逐渐升高,7d时达到高峰,其后又开始下降,在14d时MCMV DNA水平明显低于MCMV感染组,28d以后与感染组无差异。⑥大蒜新素治疗组脾脏中MCMV DNA的动态变化:大蒜新素治疗组小鼠脾在治疗后7d开始检测出MCMV DNA,在7d,14d和28d时MCMV DNA水平明显低于MCMV感染组,随后开始逐渐降低,但与感染组比较无差异。⑦大蒜新素治疗组肾脏中MCMV DNA的动态变化:大蒜新素治疗组小鼠肾在治疗后3d开始检测出MCMV DNA,随后逐渐升高,14d时达到高峰,但明显低于感染组,随后缓慢降低,与感染组比较无差异。⑧大蒜新素治疗组唾液腺中MCMV DNA的动态变化:大蒜新素治疗组小鼠唾液腺在治疗后1d开始检测出MCMV DNA,以后逐步上升,28d时达到高峰,随后开始下降,45d时仍处于一相对较高水平,以后维持在这一水平左右,直至120d。在7d,14d和28d MCMV DNA水平明显低于MCMV感染组。【结论】①MCMV模型鼠主要易感脏器内病毒DNA载量在急性期呈快速增加后又快速降低的变化模式,在慢性期呈低水平并缓慢下降,表明机体可通过建立特异性抗病毒免疫有效抑制病毒增殖,但不能完全清除病毒;②采用大蒜新素治疗模型鼠,发现大蒜新素可显著降低急性期病毒增殖高峰时段的病毒载量,而在病毒持续低水平增殖的慢性期,大蒜新素对病毒载量无明显影响。

全文目录


中文摘要  5-7
英文摘要  7-10
正文  10-43
  前言  10-12
  第一部分 MCMV 感染小鼠脏器内病毒载量的动态变化  12-34
    （一） MCMV 毒株制备和感染性滴度测定  12-17
      材料和方法  12-15
      结果  15-17
    （二） MCMV 感染小鼠模型的建立和其肝、脾、肾和唾液腺内MCMV DNA 的动态变化  17-29
      材料和方法  17-22
      结果  22-29
    讨论  29-34
  第二部分 大蒜新素治疗对MCMV 感染小鼠脏器内病毒载量的影响  34-43
    材料和方法  34-35
    结果  35-40
    讨论  40-43
参考文献  43-47
全文小结  47-48
综述  48-55
致谢  55

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