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铜绿假单胞菌注射液对大鼠结肠部分切除术后吻合口愈合影响的研究

作　者: 高成生
导　师: 董哲
学　校: 辽宁医学院
专　业: 外科学
关键词: 铜绿假单胞菌注射液结肠吻合口愈合
分类号: R656.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的通过大鼠皮下注射及术中腹腔喷洒铜绿假单胞菌注射液(PA-MSHA)观察对大鼠结肠部分切除术后吻合口愈合情况的影响并与5-Fu腹腔化疗作比较,进一步探讨其作用机制,为其临床应用提供实验依据。方法健康SD大鼠64只,雌雄不限,体重230-270克,随机分为4组,每组16只,行结肠部分切除再吻合术。B和C组于术前3天起,隔日皮下注射PA注射液0.5 ml;C组术中局部喷洒PA注射液0.5 ml。A和D组于术前3天起,隔日皮下注射生理盐水0.5 ml;D组术中局部应用5-Fu (20 mg/kg)。术后观察各组大鼠的一般情况,死亡者明确其死因;各组大鼠于术后7d和14d,脱臼致死后开腹,确定吻合口位置,松解吻合口与周围组织的粘连,以吻合口为中心切取长约1cm的结肠,等分为两部分,一部分组织用3%戊二醛固定液预固定,1%锇酸固定液复固定,丙酮系列脱水,环氧树脂EP0N812包埋,半薄切片,光镜定位,Relehert超薄切片机切片,醋酸双氧铀及柠檬酸铅双重染色,JEM-120透射电镜观察粘膜下淋巴的形态及内皮细胞的超微结构。另一部分固定于10%中性多聚甲醛,常规石蜡包埋切片,分别行HE染色、Masson染色和免疫组织化学染色,光镜下观察吻合口愈合情况、吻合口炎性细胞浸润,检测HPC、VEGF和PDGF-BB表达。所得数据采用SPSS13.0统计软件进行统计学分析。结果1、一般情况各组实验大鼠于术后6h基本恢复活动,12h恢复饮食。术后各组大鼠均无腹壁切口感染,术后各组均有死亡,及时对死亡只数进行补充。2、术后7天,用药组吻合口炎性细胞浸润、胶原沉积、HPC、VEGF和PDGF-BB表达均显著高于对照组组,5-FU对照组各项指标最低。3、吻合口组织透射电镜下观察显示,用药组大鼠吻合口组织的杯状黏膜上皮细胞及黏膜下的中性粒细胞、T细胞、巨噬细胞等淋巴细胞明显增多,核大,染色质密度大,染色较深,线粒体等细胞器增多;对应5-FU对照组粘膜上皮细胞及粘膜下的淋巴细胞较少,核小,染色较浅,线粒体等细胞器也较小。结论PA-MSHA能激活大鼠的免疫系统,提高巨噬细胞等免疫细胞活性。能促进细胞生长因子的分泌,在一定程度上可促进肠吻合口的早期愈合,其机制可能主要与PA-MSHA特异激活细胞表面Toll样受体有关。

全文目录

摘要  4-6
英文摘要  6-8
英文缩略语表  8-9
前言  9
实验材料与方法  9-15
结果  15-17
讨论  17-19
结论  19-20
本研究创新性的自我评价  20-21
参考文献  21-24
附图  24-30
综述  30-36
  参考文献  33-36
在学期间的科研成绩  36-37
致谢  37-38
个人简历  38-39

铜绿假单胞菌注射液对大鼠结肠部分切除术后吻合口愈合影响的研究

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