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个青皮中L-辛弗林的提取分离与其肾上腺素-α受体激动剂活性研究

作　者: 张超
导　师: 沈莲清
学　校: 浙江工商大学
专　业: 农产品加工与贮藏工程
关键词: 个青皮 L-辛弗林提取分离鉴定肾上腺素-α受体激动剂活性
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

个青皮是一种资源丰富的中药材,长久以来被广泛应用。辛弗林是个青皮中起药效作用的主要成分,有着广阔的市场前景。辛弗林分子中存在一个手性碳原子,因此辛弗林呈对映异构,有左旋体(L-辛弗林)和右旋体(D-辛弗林)两种构型。天然植物中主要以L-辛弗林的形式存在,且有报道指出L-辛弗林是辛弗林对映体药物起药效功能的有效形式。因此,研究L-辛弗林的提取分离,对于高药效形式的手性药物的开发和药理机理的探索具有重要的意义。本课题采用高效液相色谱手性固定相法分离辛弗林对映体,并建立了L-辛弗林的含量测定方法。以个青皮为原料,优化了L-辛弗林的提取工艺,通过萃取、离子交换、硅胶层析等方法制备了L-辛弗林单体,借助质谱、核磁共振和旋光度测定对其进行鉴定。最后对L-辛弗林进行了肾上腺素-α受体激动剂活性测定。1、L-辛弗林含量测定方法的建立采用高效液相色谱法,在ChiralPak AD-H手性柱上采用正相洗脱方式,考察了流动相中有机改性剂浓度、酸碱加入量、柱温、流速等因素对辛弗林对映体拆分的影响,实现了辛弗林对映体的拆分,在此基础上确立以①流动相:正己烷-乙醇-二乙胺-三氟乙酸(93:7:0.8:0.08);②流速:1.0mL/min;③柱温:20℃;④检测波长:225nm为L-辛弗林的含量测定方法,并进行了方法学考察。此方法简单、准确,重现性好,可用于L-辛弗林的快速检测。2、个青皮中L-辛弗林提取工艺的研究以个青皮为原料,研究提取液浓度、提取时间、料液比、提取温度以及提取次数等因素对L-辛弗林得率的影响,并进行正交实验,比较乙醇回流提取和盐酸超声提取两种方法的结果,确定最佳提取工艺为:乙醇浓度60%,提取时间2h,料液比1:12,提取温度80℃。此条件下L-辛弗林的得率达到6.28mg/g。3、L-辛弗林的分离、纯化与鉴定采用正丁醇萃取、001×8强酸性阳离子树脂柱分离和硅胶柱层析的方法,对L-辛弗林浸膏进行了分离纯化,得到L-辛弗林单体13.4g,纯度达到95.2%。实验过程中,用不同pH值的样液上样和不同浓度的氨水溶液洗脱001×8强酸性阳离子树脂柱,比较了分离条件对辛弗林异构化的影响。通过质谱、核磁共振和旋光度检测,鉴定所得单体为L-辛弗林。4、L-辛弗林的肾上腺素-α受体激动剂活性研究通过离体大鼠胸主动脉环张力实验,表明个青皮乙醇提取物、辛弗林外消旋体和L-辛弗林都具有肾上腺素-α受体激动剂活性,且L-辛弗林活性最高,但辛弗林外消旋体和L-辛弗林的活性无显著性差异。L-辛弗林的药理活性优势及机理还有待于进一步研究。

个青皮中L-辛弗林的提取分离与其肾上腺素-α受体激动剂活性研究

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