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苯并三唑对两种海洋生物的毒理学初步研究

作　者: 何唐天
导　师: 刘文华
学　校: 汕头大学
专　业: 海洋生物学
关键词: 苯并三唑 黑点青鳉鱼 华贵栉孔扇贝 卵黄蛋白原 细胞色素P450 1A1
分类号: X171.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 77次
引　用: 1次
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内容摘要


苯并三唑是一种可以作为紫外线稳定剂、防腐剂、飞机表面除冰剂、抗结冰剂以及清洁剂等而被广泛应用的化合物。由于被大量使用,以及其本身的高水溶性和高稳定性,导致苯并三唑在水体中出现并累积。有关苯并三唑在淡水中的出现情况已有大量报道,但是在海水中的出现未见报道。而有关其衍生物在海水中的出现则有研究:Haruhiko等在2009年的研究发现具有高稳定性并在海洋食物链中富集。他们发现在Ariake海附近的海岸和河流的沉积物中,苯并三唑的浓度范围是7.9-720 ng/g。因而,苯并三唑及其衍生物在被大量使用的情况下,极有可能成为环境污染物并在生物体内富集,研究苯并三唑对海洋生物的影响是很有必要的。据文献记载,有关苯并三唑毒性的研究较多集中于植物毒理方面以及动物的急性毒理方面,但是在其具体毒性方面的研究少之又少。有报道称苯并三唑存在雌性激素作用,也有报道称在体外实验中苯并三唑具有抗雌性激素作用;另一方面,其衍生物1-氨基苯并三唑存在抑制细胞色素P450酶活性的作用,说明苯并三唑及其衍生物可能存在抑制细胞色素P450酶活性的毒性。借鉴前人的研究,作者设计实验研究苯并三唑是否对生物体的内分泌系统以及细胞色素P450酶活性存在毒理影响,并首次运用Real-time PCR手段从基因表达调控方面对苯并三唑进行研究。实验选用黑点青鳉鱼作为实验动物,通过测定4天以及35天、浓度分别为0,0.01,0.1,1mg/L的苯并三唑暴露后CYP1A1,VTG,CYP19a基因的表达情况。实验结果表明VTG及CYP19a基因的表达量随着时间和毒物浓度上升而上调,而CYP1A1基因表达量则下调。实验结论是苯并三唑可能对黑点青鳉鱼存在雌性激素作用并抑制细胞色素P4501A1酶活性。为验证该结果并研究苯并三唑其他方面的毒性,在进一步的实验中,作者选用华贵栉孔扇贝作为实验动物进行研究,暴露时间包括4,10,35和60天,苯并三唑浓度分别为0,0.01,0.1,1mg/L,研究实验包括:1,在内分泌干扰方面,包括生殖腺指数,以及性腺和血淋巴中卵黄蛋白原含量;2,在细胞色素P450酶活性方面包括EROD;3,毒性胁迫方面,包括CAT及MDA;4,最后研究了AChE活性。得出的结果是苯并三唑对华贵栉孔扇贝存在雌性激素作用并能抑制细胞色素P4501A1酶的活性,造成毒性胁迫,并存在累积毒理效应。对乙酰胆碱酯酶的活性未有影响。关于苯并三唑引起生物体内分泌干扰影响的作用机理方面,暂无进展,有待进一步的研究。

全文目录


中文摘要  5-7
Abstract  7-9
缩略语  9-10
第一章 前言  10-16
  1.1 苯并三唑的结构，用途及特性  10-11
  1.2 苯并三唑的出现  11-12
  1.3 苯并三唑的毒性研究概述  12-13
  1.4 本研究的目的及意义  13
  1.5 实验动物的选用及实验简介  13-16
    1.5.1 黑点青鳉鱼的生物学特性及实验简介  14-15
    1.5.2 华贵栉孔扇贝的生物学特性及实验简介  15-16
第二章 苯并三唑对黑点青鳉鱼的毒理影响.  16-31
  2.1 材料与方法  16-19
    2.1.1 材料  16
    2.1.2 暴露过程  16
    2.1.3 组织样品收集与保存  16
    2.1.4 实时定量PCR  16-18
    2.1.5 数据分析  18-19
  2.2 实验结果及讨论  19-31
    2.2.1 CYP1A1 基因表达  19-22
    2.2.2 VTG基因表达  22-26
    2.2.3 CYP19a基因表达  26-28
    2.2.4 讨论  28-31
第三章 苯并三唑对贝类的毒理影响  31-56
  3.1 试验贝暴露过程及组织样品收集与保存  31-32
    3.1.1 试验贝  31
    3.1.2 暴露过程  31
    3.1.3 组织样品收集与保存  31-32
  3.2 实验方法  32-41
    3.2.1 生殖腺指数  32
    3.2.2 性腺及血淋巴中卵黄蛋白原含量测定  32-33
    3.2.3 7-乙氧基-3-异吩唑酮-脱乙基酶（EROD）  33-36
    3.2.4 氧化压力  36-38
    3.2.5 乙酰胆碱酯酶活性（AChE）  38-39
    3.2.6 蛋白质定量  39-40
    3.2.7 数据处理  40-41
  3.3 实验结果与讨论  41-56
    3.3.1 生殖腺指数  41-42
    3.3.2 性腺及血淋巴中卵黄蛋白原含量测定  42-44
    3.3.3 EROD  44-46
    3.3.4 CAT  46-49
    3.3.5 MDA  49-51
    3.3.6 AChE  51-53
    3.3.7 讨论  53-56
第四章 结论与创新  56-58
  4.1 结论  56
  4.2 创新和不足之处  56-58
参考文献  58-64
致谢  64

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中图分类: > 环境科学、安全科学 > 环境科学基础理论 > 环境生物学 > 生态系统与污染生态学 > 污染生态学
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