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HCN4基因在风心二狭房颤患者中表达初探

作　者: 杨涛
导　师: 周华富
学　校: 广西医科大学
专　业: 心胸外科
关键词: HCN4基因风湿性心脏病二尖瓣狭窄心房纤颤逆转录-聚合酶链反应基因测序实时荧光定量聚合酶链反应
分类号: R541.75
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:通过分析风湿性心脏病二尖瓣狭窄患者心房肌组织及对照组心房肌组织HCN4基因表达与心房颤动发生的关系,为风心二狭房颤发生机制奠定理论基础,并探讨风湿性心脏病二尖瓣狭窄心房纤颤的可能调节机制。方法:1.通过半定量逆转录—PCR方法(RT-PCR)考察在风心二狭房颤患者和风心二狭无房颤患者HCN4基因mRNA含量表达差异,以HCN4基因mRNA和内参β-actin含量的比值作为评价HCN4基因mRNA表达水平指标。2.通过PCR产物基因测序,考察实验中HCN4基因的同源性。3.通过应用SYBR GreenⅠ荧光染料,建立检测HCN4基因mRNA的实时荧光定量PCR方法(Real Time PCR)研究风心二狭房颤患者心房肌和风心二狭无房颤患者HCN4基因mRNA的定量表达。结果:1.经RT-PCR技术分析风心二狭房颤组及对照组HCN4基因mRNA与β-actin含量的相对表达值比值(?)分别为0.685±0.168和0.127±0.012,两组比较,差异有显著性(t=20.351,P＜0.01)。2.测定HCN4基因cDNA序列同源性为100%,说明PCR扩增产物正是目的基因。3.建立的实时荧光定量PCR方法在10~3-10~7拷贝数/ul的标准品梯度稀释范围内,相关系数为0.999。风心二狭房颤组及对照组HCN4基因mRNA与β-actin含量的相对表达值比值(?)分别为1.323±1.226和0.116±0.192(t=5.877,P＜0.01),提示风心二狭房颤患者心房肌组织中HCN4基因表达上调。结论:1.风湿性二尖瓣狭窄心房纤颤患者心房肌组织中HCN4基因含量表达上调,进而可能影响超极化激活阳离子电流(If),导致风心二狭房颤发生。2.控制心房肌HCN4基因的表达,调控超极化激活阳离子电流(If),有可能预防和阻止心房纤颤发生和维持。

全文目录

英文缩略词表  4-6
摘要  6-8
ABSTRACT  8-11
前言  11-15
第一部分 HCN4基因在右心耳心肌组织中的表达  15-37
  1.标本来源  15-16
  2.主要的试剂和仪器  16-19
  3.实验方法:RT-PCR检测风心二狭房颤患者及对照组的HCN4基因表达  19-24
  4.实验结果  24-37
第二部分 HCN4基因在风心二狭房颤患者中的定量表达  37-65
  1.标本来源  37-38
  2.主要的试剂和仪器  38-40
  3.实验方法:Real Tmie PCR检测风心二狭房颤患者及对照组的 HCN4基因表达  40-46
  4.实验结果  46-51
  5.讨论  51-58
  6.结论  58-59
  参考文献  59-65
综述: HCN4心脏起搏机制与心律失常关系研究进展  65-77
  1 HCN4基因及其蛋白的结构特点  66-67
  2 HCN4基因的功能及其心脏起搏机制  67-69
  3 HCN4基因与心律失常发生的相关性  69-72
  4 结语  72-73
  参考文献  73-77
致谢  77-78
攻读硕士学位期间发表的论文目录  78

HCN4基因在风心二狭房颤患者中表达初探

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