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骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠骨组织GABA信号通路的影响

作　者: 吕辰鹏
导　师: 张荣华
学　校: 暨南大学
专　业: 中药学
关键词: 骨碎补总黄酮 骨质疏松症 γ-氨基丁酸信号
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的：观察GABA信号通路在OP形成过程中的作用及骨碎补总黄酮对其影响。方法：1.将45只3月龄SD雌性大鼠随机分为手术组30只和假手术组15只,手术组采用双侧卵巢切除术复制OP大鼠模型,造模12周时通过双能X线测量BMD确认OP复制成功后,手术组再随机分为模型组15只和给药组15只。2.按人鼠剂量换算,给药组大鼠给予相当于临床成人用药量的骨碎补总黄酮灌胃干预12周,假手术组和模型组给予等量的生理盐水。3.应用双能X线检测各组大鼠的BMD, ELISA法观察各组大鼠血清GAD水平,免疫组织化学技术观察各组大鼠股骨远端GABA、GABABR1和GAT1的表达,RT-PCR观察各组大鼠股骨GABABR1 mRNA的表达。结果：1.在造模12周时,手术组和假手术组比较,大鼠身体多部位骨组织的BMD均显著下降(P<0.05)。2.给药结束后,模型组大鼠血清GAD水平显著高于假手术组(P<0.05)给药组较模型组则显著降低(P<0.05),假手术组和给药组之间无显著性差异(P>0.05)。3.给药结束后,模型组大鼠股骨GABA和GABABR1的表达水平显著高于假手术组(P<0.05),给药组较模型组则显著降低(P<0.05),假手术组和给药组无显著性差异(P>0.05)4.给药结束后,三组大鼠股骨GAT1的表达水平无显著性差异(P>0.05)5.给药结束后,模型组大鼠股骨GABABR1 mRNA的表达显著高于假手术组(P<0.01),给药组较模型组则显著降低(P<0.05),假手术组和给药组无显著性差异(P>0.05)。结论：1.大鼠血清GAD水平增高、骨组织GABA和GABABR1的表达增加及股骨GABABR1 mRNA表达的增多可能是GABA信号通路参与OP形成的表现之一。2.骨碎补总黄酮干预后能够降低大鼠血清GAD水平、减少股骨GABA和GABABR1的表达及GABABR1 mRNA表达,这可能是其防治OP的机制之一。

全文目录


摘要  6-8
ABSTRACT  8-11
目录  11-14
前言  14-28
  1 神经因素与骨代谢和OP  14-23
    1.1 骨代谢和OP  14-15
    1.2 神经纤维在骨组织中的分布  15
    1.3 神经系统对骨代谢及OP的影响  15-16
    1.4 神经递质与骨代谢  16-20
    1.5 γ-氨基丁酸(GABA)信号通路与骨代谢  20-23
  2 骨碎补总黄酮(TFRD)  23-26
    2.1 TFRD在临床防治OP中的应用  23
    2.2 TFRD对OP骨量和骨组织形态学的影响  23-24
    2.3 TFRD对OP分子生物学的影响  24
    2.4 TFRD对OP细胞生物学的影响  24-25
    2.5 TFRD毒理学研究  25-26
  3 本课题的研究思路和意义  26-28
实验研究  28-57
  1 实验材料  28-35
    1.1 实验动物  28
    1.2 实验药物  28
    1.3 主要试剂  28-30
    1.4 实验器械  30
    1.5 实验仪器及设备  30-31
    1.6 实验试剂的配制  31-35
  2 实验方法  35-47
    2.1 动物饲养  35
    2.2 动物分组  35
    2.3 OP模型复制和BMD检测  35-36
    2.4 给药方法  36
    2.5 标本的采集  36-37
    2.6 血清GAD含量的测定(ELISA法)  37-39
    2.7 骨组织的脱钙切片及HE染色  39-40
    2.8 SABC免疫组织化学法检测GABA、GABA_R1和GAT1  40-43
    2.9 RT-PCR检测GABA_BR1 mRNA的表达  43-46
    2.10 统计学方法  46-47
  3 实验结果  47-54
    3.1 一般情况  47-48
    3.2 OP模型复制情况  48-49
    3.3 骨组织普通病理结构的变化  49
    3.4 血清GAD的表达  49-50
    3.5 骨组织GABA、GABA_BR1、GAT1的表达  50-52
    3.6 总RNA的检测  52
    3.7 骨组织GABA_BR1 mRNA的表达  52-54
  4 讨论  54-57
    4.1 OP大鼠骨组织中GABA信号通路的变化  54-55
    4.2 骨碎补总黄酮对OP大鼠骨组织中GABA信号通路的影响  55-57
结论  57-58
展望  58-59
附图  59-62
参考文献  62-74
在校期间发表的论文  74-75
致谢  75

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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