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硒对蛋白质酪氨酸硝化及磷酸化修饰的影响

作　者: 杨琳
导　师: 黄开勋
学　校: 华中科技大学
专　业: 无机化学
关键词: 硒氧化应激硝化磷酸化胰岛素信号转导免疫印迹
分类号: O629.73
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

在氧化应激状态下,活性氮分子(RNS)能够诱导慢性炎症和胰岛素抵抗。RNS中的过氧亚硝酸根离子(ONOOˉ)能够引起蛋白质酪氨酸残基的硝化,而酪氨酸的硝化对磷酸化信号传导的影响很可能是RNS诱发胰岛素抵抗的机制之一。硒(selenium)是哺乳动物必需的微量营养元素,以硒代半胱氨酸(selenocysteine)的形式存在于机体的各种硒蛋白中,且为硒蛋白的活性中心或必需组成成份。近年来的研究发现,硒除了具有抗氧化、增强机体的免疫功能外,还具有类胰岛素的作用,然而硒与糖尿病的关系,硒对蛋白质的硝化和磷酸化信号有怎样的影响亦不清楚。本文采用免疫印迹的方法,通过对体外HepG2细胞及小鼠体内给予一定浓度的亚硒酸钠后,研究补硒对蛋白质硝化及磷酸化的影响。主要结果如下:(1)在HepG2细胞实验中,在培养液中加入0～300 nM的Na2SeO3溶液后,HepG2细胞的存活率没有显著性差别,而且硒能够抑制ONOOˉ诱导的蛋白质硝化,但对磷酸化作用的规律则不明显。(2)在糖尿病模型小鼠实验中,硒能降低糖尿病小鼠血糖,补硒组组织中蛋白质的硝化弱于正常组及糖尿病组,磷酸化水平虽然受到一定的影响,但依然没有明显规律。补硒对蛋白质硝化作用的抑制可能与硒蛋白对ONOOˉ的清除作用有关,然而补硒对蛋白质磷酸化的影响的机理有待进一步研究。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-7
1 绪论  7-21
  1.1 引言  7-8
  1.2 胰岛素信号传导  8-12
  1.3 蛋白质硝化、磷酸化与胰岛素信号转导  12-19
  1.4 本论文的研究目的和主要内容  19-21
2 实验部分  21-31
  2.1 主要试剂与配制  21-24
  2.2 主要仪器  24
  2.3 实验方法  24-31
3 结果与讨论  31-43
  3.1 硒对HEPG2 细胞存活率的影响  31-32
  3.2 硒对HEPG2 细胞中蛋白质硝化与磷酸化的影响  32-36
  3.3 补硒对糖尿病小鼠血糖的影响  36-37
  3.4 补硒对糖尿病小鼠红细胞和组织中蛋白质硝化与磷酸化的影响  37-43
4 全文总结  43-44
参考文献  44-50
致谢  50

硒对蛋白质酪氨酸硝化及磷酸化修饰的影响

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