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热消融联合消融灶周边注射CpG ODN 抑制小鼠肝癌生长

作　者: 刘星
导　师: 向邦德
学　校: 广西医科大学
专　业: 肿瘤学
关键词: 热消融 原发性肝癌 CpG ODN 热休克蛋白70
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 22次
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内容摘要


目的:探讨热消融联合消融灶周边注射CpG ODN治疗对小鼠肝癌的治疗效果,以及继发抗肿瘤的免疫效应。方法:建立Hepa1-6小鼠皮下肝癌模型,待肿瘤长径生长至6-10mm时随机分为四组:⑴联合治疗组:皮下肿瘤用100℃生理盐水消融治疗,消融后第10min和第7天先后2次在消融灶周围多点注射1mg/ml的CpG ODN溶液0.1ml;⑵消融治疗组:皮下肿瘤用100℃生理盐水消融治疗,消融后第10min和第7天先后2次在消融灶周围多点注射生理盐水0.1ml;⑶CpG ODN治疗组:小鼠皮下肿瘤周围多点注射1mg/ml的CpG ODN溶液0.1ml,第7天时再次在肿瘤周围多点注射1mg/ml的CpG ODN溶液0.1ml;⑷对照组,不予任何治疗。检测指标:⑴各组随机选取8只,①在治疗后15天内测量肿瘤体积,计算抑瘤率;②然后继续观察45天,计算各组小鼠死亡率和中位生存时间。⑵各组随机选取8只小鼠在消融治疗后第24小时处死,免疫组化技术检测病灶内HSP70表达,计算各组HSP70标记指数。⑶各组随机选取8只小鼠在消融治疗后第15天时处死小鼠,取肿瘤病灶切片;①HE染色计算肿瘤残留率;②免疫组化检测消融病灶内CD4+T细胞及CD8+T细胞的数量。⑷另外选取一批小鼠,按上述4组进行治疗,选取消融治疗30天后各组仍有存活的小鼠,每组8只,对侧腋下接种等量肿瘤细胞,观察再接种肿瘤细胞的成瘤率。结果:⑴肿瘤体积变化及抑瘤率:治疗后第15天,联合治疗组小鼠肿瘤缩小140.94mm3,热消融组小鼠肿瘤缩小44.42mm3,CpG ODN治疗组小鼠肿瘤缩小87.68mm3,对照组小鼠肿瘤增大1263.94mm3,各实验组小鼠与对照组相比,肿瘤体积显著缩小(P<0.05),联合治疗组肿瘤缩小更显著,但联合治疗组与热消融组及CpG ODN治疗组相比,差异无统计学意义。抑瘤率:联合治疗组,98.43%,消融治疗组,91.05%,CpG ODN治疗组,96.64%,均显著高于对照组。联合治疗组抑瘤率较热消融组及CpG ODN治疗组更高。⑵死亡率:各组死亡率分别为:联合治疗组12.5%(1/8),对照组为87.5%(7/8),CpG ODN治疗组及热消融治疗组为37.5%(3/8),各实验组小鼠观察期内死亡率均低于对照组(P<0.05),联合治疗组与热消融组及CpG ODN治疗组相比,小鼠死亡率较低,差异有统计学意义(P<0.05)。⑶HSP70标记指数:联合治疗组(22.07±2.64)%,热消融组(16.37±2.03)%,CpG ODN治疗组(10.74±3.60)%,对照组(4.25±1.84)%;各实验组与对照组相比有更多HSP70表达(P<0.05),联合治疗组HSP70表达最多,与热消融组及CpG ODN治疗组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。⑷肿瘤残留率:联合治疗组为12.5%(1/8),热消融治疗组为25%(2/8),CpG ODN治疗组为87.5%(7/8),对照组为100%(8/8),联合治疗组与热消融治疗组相比,无明显差异,但联合治疗组与CpG ODN治疗组相比,差异显著(p<0.05),热消融治疗组与CpG ODN治疗组相比,亦有显著差异(p<0.05)。⑸肿瘤灶内CD4+T、CD8+T数量检测。①CD4+T细胞:联合治疗组, 52.75±4.15;消融治疗组,26.00±1.79;CpG ODN治疗,34.13±1.67;对照组,12.25±1.03。各实验组较对照组有较多CD4+T淋巴细胞浸润(P<0.05),联合治疗组与热消融组及CpG ODN治疗组相比,差异显著(P<0.05)。②CD8+T细胞:联合治疗组,10.50±1.17;热消融治疗组,9.50±1.87;CpG ODN治疗组,13.63±1.12;对照组,10.63±1.3,各实验组中CD8+T细胞与对照组相比,无显著差异(P>0.05),实验组间比较亦无显著差异(P>0.05)。③CD4+T/CD8+T:联合治疗组,5.02;热消融治疗组,2.74;CpG ODN治疗组,2.51;对照组,1.15。各实验组CD4+T/CD8+T比值较对照组均有增加,差异显著(P<0.05),联合治疗组与热消融组及CpG ODN治疗组相比,差异显著(P<0.05)。⑹再接种肿瘤成瘤率:联合治疗组为12.5%(1/8),热消融治疗组为37.5%(3/8),CpG ODN治疗组为37.5%(3/8),对照组为100%(8/8),各实验组小鼠对侧接种肿瘤成瘤率与对照组相比,差异显著(p<0.05),联合治疗组显著低于热消融组及CpG ODN治疗组(p<0.05),但热消融组与CpG ODN治疗组相比,无明显差异。结论:1.小鼠皮下肝癌组织周边注射CpG ODN能在一定程度上局部增强免疫效应。2.消融治疗能促进小鼠皮下肝癌细胞HSP70表达。3.小鼠皮下肝癌消融治疗联合CpG ODN瘤周注射能增强宿主的免疫效应,抑制再接种肿瘤生长,可能对防止消融治疗后肿瘤复发有一定的作用。

全文目录


中英文对照  4-6
摘要  6-9
Abstract  9-14
前言  14-21
材料与方法  21-31
结果  31-39
讨论  39-46
结论  46-47
参考文献  47-54
综述  54-64
  参考文献  60-64
致谢  64-65
发表文章  65

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肝肿瘤
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