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尿液蛋白质质谱分析在2型糖尿病肾病中的应用

作　者: 吴菁
导　师: 谷卫
学　校: 浙江大学
专　业: 内科学
关键词: 蛋白芯片 2型糖尿病 2型糖尿病肾病表面增强激光解吸电离飞行时间质谱
分类号: R587.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：用蛋白芯片技术检测2型糖尿病(T2DM)患者尿液蛋白质表达图谱,寻找2型糖尿病肾病(T2DN)患者尿液中的蛋白标志物,探讨蛋白芯片技术对2型糖尿病肾病早期诊断的临床应用价值。方法：收集30例T2DM合并正常蛋白尿患者(尿白蛋白排泄率UAER<30mg/gCr, DM组),25例T2DM合并微量蛋白尿患者(30<UAER<300mg/g Cr, DN1组),20例T2DM合并大量蛋白尿患者(UAER>300mg/g Cr, DN2组),以及20例性别相匹配的健康志愿者(对照组)的晨起清洁中段尿。用H50蛋白质芯片结合表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测所有尿液样本的蛋白质质谱。采用浙江大学肿瘤研究所余捷凯设计的ZJU-ProteinChip Data Analyze System软件包对所获得蛋白质质荷比峰(M/Z)进行分析。结果：芯片上捕获到相对分子量为1000-80000的蛋白质300余种‘,质谱仪筛选出2型糖尿病患者与正常对照组相比的40种差异蛋白,进一步按白蛋白分组比较得到16种有明显表达差异的蛋白,M/Z值最低为2197.14,最高为79176.55。其中9种M/Z峰值随着白蛋白(Alb)升高而降低,7种随着Alb的升高而升高包括a1-微球蛋白(M/Z：23413.44)、β2-微球蛋白(M/Z：11745.96)及转铁蛋白(M/Z：79176.55)等已知蛋白和多种未知蛋白。DM组与DNl组比较发现4种比白蛋白更有差异性的小分子蛋白,M/Z值为2797.03,4545.77,4984.03,9083.71。经留一法交叉验证显示该4种小分子蛋白组成的诊断模型特异性为96.7%,敏感性为88%。结论：蛋白芯片技术能有效分析2型糖尿病患者尿液蛋白质质谱,并可进一步用于筛选尿液中的特异标志物。2型糖尿病无肾病组与早期肾病组之间存在明显的蛋白质谱表达差异。所获得的差异性较明显的小分子蛋白峰有望用于诊断2型糖尿病肾病,并且对其早期预警以及治疗有一定临床意义。

全文目录

致谢  4-6
摘要  6-8
Abstract  8-11
引言  11-14
1 材料与方法  14-19
2 结果  19-28
3 讨论  28-32
4 结论  32-33
参考文献  33-36
综述  36-54
  参考文献  48-54
作者简历及在学期间所取得的科研成果  54

尿液蛋白质质谱分析在2型糖尿病肾病中的应用

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