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云芝糖肽对健康人外周血淋巴细胞的体外免疫调节作用

作　者: 林丽
导　师: 吴超
学　校: 南京中医药大学
专　业: 中西医结合临床
关键词: 云芝糖肽淋巴细胞亚群 CD3~+/HLA-DR~+ CD19~+/CD69~+ IgG
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

研究目的：云芝糖肽(polysaccharopeptide,PSP)是一种混合蛋白多糖,目前已经被定位为一种很好的免疫调节剂而广泛应用于临床。本实验采用PSP体外刺激健康者外周血单个核细胞(PBMC),以观察PSP体外对细胞免疫和体液免疫的调节作用,从而探讨云芝糖肽在体外对细胞免疫和体液免疫功能调节的可能途经。研究方法：选取7个健康人,无菌条件下取外周血15ml,以肝素抗凝。淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMC),调整细胞浓度为1×106/ml,加入到24孔培养板中,1ml／孔。实验分为3组：A组为PBMC空白组,B组为PBMC+PSP20ul组(PSP200ug/ml),C组为PBMC+PSP40ul组(PSP400ug/ml),体外共培养72h,收集细胞和上清。流式细胞仪检测培养前和培养72小时每组淋巴细胞亚群比例变化；用流式细胞仪分别检测在培养24小时、48小时、72小时三个不同时间点上T淋巴细胞表面CD3+/HLA-DR+, B淋巴细胞表面CD19+/CD69+表达的变化；ELISA方法检测培养24小时、48小时、72小时三个不同时间点上各组上清液中IgG水平。结果：健康人外周血单个核细胞在云芝糖肽作用下培养72小时,和培养前相比,CD4+T细胞比例明显上升,CD4+/CD8+细胞比值明显增高,经统计学处理差异显著(P<0.05)。24h、48h和72h三个时间点上T细胞表面CD3+/HLA-DR+的表达水平差异有统计学意义(P<0.05),有时间依赖性,且72h>48h>24h；三个不同浓度组间T细胞表面CD3+/HLA-DR+的表达水平差异没有统计学意义,不存在浓度依赖性。24h、48h和72h三个时间点上B细胞表面CD19+/CD69+的表达水平差异有统计学意义(P<0.05),且48h>24h>72h；三个不同浓度组间B细胞表面CD19+/CD69+的表达水平差异没有统计学意义。空白组、PBMC+PSP20ul组和PBMC+PSP40ul组三组间IgG的分泌水平差异有统计学意义(P<0.05),且PBMC+PSP40ul组>PBMC+PSP20ul组>空白组,有浓度依赖性；24h、48h、72h三个时间点上IgG分泌水平的差异没有统计学意义。结论：健康人PBMC体外在云芝糖肽作用下,具有一定的T、B细胞活化作用,并能促进CD4+T细胞比例上升,CD4+/CD8+比值提高,并增加工gG分泌,提示云芝糖肽体外具有一定的免疫调节作用。

全文目录

中文摘要  7-8
英文摘要  8-9
前言  9-10
第一部分中医学的理论基础  10-14
  1.中药云芝的药性  10-11
  2.辨正邪关系的中医起源  11-14
第二部分实验研究  14-22
  1.实验材料  14-16
  2.实验方法  16-18
  3.统计学分析  18-19
  4.实验结果  19-22
讨论  22-26
结论  26-27
存在问题  27-28
综述  28-32
参考文献  32-35
附录  35-36
攻读硕士学位期间取得的学术成果  36-37
致谢  37

云芝糖肽对健康人外周血淋巴细胞的体外免疫调节作用

内容摘要

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