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CIP4在肾脏纤维化中的表达及其与β-catenin的关系

作　者: 张亚敏
导　师: 徐钢
学　校: 华中科技大学
专　业: 内科学
关键词: CIP4 β- catenin 肾脏纤维化 EMT
分类号: R692
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 23次
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内容摘要


目的观察CIP4(Cdc42-interacting protein 4)在人肾脏纤维化组织、肾小管上皮细胞间充质细胞转分化(Epithelial to mesenchymal transition EMT)模型中的表达变化以及其与β-catenin的关系,初步探讨肾脏纤维化中CIP4的作用和作用机制。方法体内实验用人肾脏组织作为研究对象,根据Masson染色结果将肾脏组织分为无纤维化组和纤维化组;用免疫组织化学染色观察CIP4在无纤维化组和纤维化组中的表达水平变化,并观察它在肾脏组织中的定位分布。体外实验用HK2(人近端肾小管上皮细胞)细胞株作为研究对象:对照组按正常培养方式培养;TGF-β1刺激组采用人重组TGF-β1刺激细胞72小时构建EMT模型。分别用western blot和RT-PCR方法观察EMT模型中CIP4在蛋白和mRNA水平的表达变化;用免疫荧光方法观察EMT过程中CIP4的定位分布变化,并观察它和β-catenin在两组细胞中的共定位关系;用免疫共沉淀方法观察CIP4和β-catenin之间的结合关系。结果CIP4在无纤维化人肾脏组织和纤维化人肾脏组织中都有表达,而且在纤维化的肾脏组织中表达上调;另外CIP4主要分布在肾小管中,且在细胞侧基底膜聚集;与对照组相比,TGF-β1刺激后,HK2细胞表达CIP4明显增高,且向细胞核内转移;在对照组和TGF-β1刺激组细胞内,CIP4和β-catenin均显示呈共定位表达;另外,免疫共沉淀结果表明二者在对照组和刺激组细胞中都有相互结合。结论CIP4在肾脏纤维化中起重要作用,可能通过调节β-catenin影响粘附连接复合物的稳定性,破坏维持上皮细胞正常极性的分子基础,改变肾小管上皮细胞的正常形态,加速EMT过程进展,从而发挥其促肾脏纤维化的作用。

全文目录


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中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 泌尿科学（泌尿生殖系疾病） > 肾疾病
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