目的:观察针刺、药物对慢性应激所致大鼠卵巢功能的影响,初步探讨针刺和药物的作用机制。方法:将动情周期规律的清洁级雌性SD大鼠50只,随机分为正常组、模型组、针刺组、中药组和西药组,每组10只。正常组常规喂养,其余4组均每日给予随机应激,针刺组、中药组和西药组于每日应激结束后1h分别给予针刺30min、中药15g/kg/d、倍美力0.0625mg/kg/d灌胃进行干预,连续28天。每天行阴道细胞学涂片观察动情周期,每周末称量体重,每两周末采用open-field试验进行行为学评分,第29天处死所有大鼠,收集血清和卵巢组织,采用放射免疫法测定血清雌二醇(estradiol, E2)和卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone, FSH)水平,HE染色观察卵巢组织切片,免疫组织化学方法测定卵巢组织FSH及受体、抗苗勒管激素(anti-müllerian hormone, AMH)及受体蛋白的表达,Real-time PCR检测卵巢AMH及受体mRNA的表达。结果:正常组大鼠皮毛光亮舒展,进食量正常,体重呈生理性增长,活动正常,反应敏捷;与正常组相比,模型组皮毛失去光泽,进食量减少,体重减轻,活动减少,反应迟钝;3个防治组较模型组均有所改善。正常组大鼠动情周期规律,模型组大鼠动情周期延长或紊乱,3个防治组中部分大鼠出现规律动情周期。模型组血清E2水平与正常组相比显著降低(P<0.01);与模型组相比,西药组E2水平升高,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。模型组血清FSH水平与正常组相比显著升高(P<0.01);与模型组相比,3个防治组均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。卵巢组织学显示,正常组卵巢镜下见不同发育阶段的卵泡和丰富的黄体;与正常组相比,模型组各级卵泡数及黄体数明显减少(P<0.05),卵巢髓质纤维结缔组织增多,有的卵泡呈现多囊改变;与模型组相比,3个防治组各级卵泡数增加,但差异无统计学意义,黄体数中药组明显增加(P<0.05)(见附图1)。卵巢中FSH、AMH及其受体蛋白表达,与正常组相比模型组均显著升高(P<0.01);与模型组相比,3个防治组均显著降低(P<0.01)。卵巢中AMH及受体mRNA表达,与正常组相比,模型组显著升高(P<0.05),与模型组相比,中药组和西药组显著降低(P<0.05)。结论:慢性应激能导致大鼠卵巢功能紊乱,针刺、中药和雌激素能防治慢性应激导致的大鼠卵巢功能紊乱。
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