学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

吴茱萸提取物的制备及其纯度与大鼠体内吸收的关系研究

作　者: 徐世希
导　师: 丁劲松
学　校: 中南大学
专　业: 药剂学
关键词: 吴茱萸碱吴茱萸次碱提取物纯度吸收生物利用度
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 161次
引　用: 1次
阅　读: 论文下载

内容摘要

一、目的制备不同纯度吴茱萸次碱和吴茱萸碱的吴茱萸提取物,比较其在大鼠体内的吸收规律,确定提取物纯度与两碱吸收的依赖关系。探索提高两碱生物利用度的可能途径与方法,为吴茱萸的开发研究提供基础,也为难溶型化合物的剂型选择与设计提供新思路。二、方法与结果建立了吴茱萸提取物中两碱(Rut和Evo)的HPLC含量测定方法。以两碱的提取率为指标,单因素实验进行提取方法及药材预处理方法的筛选。采用正交设计实验考察了乙醇用量、乙醇浓度、提取时间和提取次数对两碱提取率的影响,优化了提取工艺条件,确定最佳提取工艺为用12倍药材量的60%乙醇回流提取3次,每次3小时。提取液回收乙醇后得粗品,将粗品采用醇提逐步水沉法进一步分离纯化。采用薄层色谱法为鉴定方法,通过考察醇提过程中醇的浓度和倍数以及水沉过程中加入水的体积,确定分离纯化的工艺为用20倍量90%的乙醇溶解粗品后,逐步加入水使提取液的乙醇终浓度依次为45%、33%、25%时,收集静置离心所得的沉淀。最后将沉淀用甲醇重结晶制备得到三种不同纯度的吴茱萸提取物：高纯度(含45%Rut,35%Evo),中纯度(含28% Rut,21% Evo),低纯度(含9% Rut,7%Evo)。建立HPLC-UV法测定大鼠血样中Rut和Evo浓度的方法。进行不同纯度吴茱萸提取物在大鼠体内的药动学比较研究。按Rut为40mg·kg-1,Evo为31 mg·kg-1的剂量给大鼠灌胃所制备的三种不同纯度的吴茱萸提取物。分别于灌胃后0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、4 h取血进行浓度测定,血药浓度时间数据以DAS 2.0软件处理。高、中、低纯度组中Rut的Cmax分别为215.34±80.39、94.46±28.79、22.82±4.39 ng·ml-1(p<0.01),Evo的分别为164.77±65.07、78.82±23.52、43.39±17.20 ng·ml-1(p<0.01);Rut的AUC0-4分别为117.06±26.50、117.38±42.22、36.75±5.55 ng·h·ml-1,Evo的分别为148.91±39.13、122.16±23.33.80.38±14.28ng·h·ml-1纯度提高,Rut和Evo的Cmax和AUC0-4依次增加,纯度间参数差别具有统计学意义(p<0.01),提示纯度提高,Rut和Evo的吸收加快,生物利用度提高。实验发现,吴茱萸提取物中Rut和Evo的生物利用度比两碱的单体均有提高。提示提取物纯度提高与生物利用度增加的关系可能存在上限,超过一定程度后,继续提高纯度可导致吸收减少,生物利用度下降。三、结论吴茱萸提取物较单体能明显改善Rut和Evo的吸收,增加二者的生物利用度。在纯度为16%-80%(二者比例约为13：10)的范围内,纯度提高生物利用度明显增加,继续提高提取物纯度可能减少Rut和Evo的吸收。提取物中杂质可能延缓或阻碍Rut和Evo的吸收,在一定的范围内,其阻碍作用强弱与杂质量可能存在依赖关系。

全文目录

摘要  5-7
ABSTRACT  7-9
目录  9-11
符号说明  11-12
前言  12-14
第一章药材及提取物中吴茱萸次碱和吴茱萸碱的含量测定  14-20
  1.材料  14
    1.1 仪器  14
    1.2 药品与试剂  14
  2 实验方法与结果  14-19
    2.1 供试品和对照品溶液的制备  14-15
    2.2 色谱条件  15
    2.3 标准曲线与定量范围  15-16
    2.4 精密度  16-17
    2.5 稳定性  17
    2.6 重复性  17-18
    2.7 加样回收率  18-19
  3 讨论与小结  19-20
    3.1 波长选择  19
    3.2 小结  19-20
第二章吴茱萸两碱的提取分离纯化  20-31
  1 材料  20-21
    1.1 仪器  20
    1.2 药品与试剂  20-21
  2.方法与结果  21-29
    2.1 提取方法的选择  21
    2.2 药材预处理方法比较  21-22
    2.3 正交试验优化提取工艺  22-24
    2.4 醇提逐步水沉法制备不同纯度提取物粗品  24-27
    2.5 三种纯度提取物的精制与纯度测定  27
    2.6 吴茱萸提取物制备流程总图  27-29
  3.讨论与小结  29-31
    3.1 药材预处理方法  29
    3.2 正交试验考察因素  29
    3.3 醇提逐步水沉与提取物制备  29
    3.4 提取物纯化与纯度测定  29
    3.5 小结  29-31
第三章不同纯度吴茱萸提取物在大鼠体内的药动学比较  31-55
  1.材料  31-32
    1.1 仪器  31
    1.2 药品与试剂  31-32
  2.方法与结果  32-52
    2.1 对照品溶液配制  32
    2.2 色谱条件  32
    2.3 实验动物  32
    2.4 实验方案  32
    2.5 血样处理  32
    2.6 大鼠血样中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的测定  32-46
    2.7 经时血药浓度与药时曲线  46-50
    2.8 数据分析  50-51
    2.9 药动学参数统计分析  51-52
  3.讨论与小结  52-55
    3.1 提取物形式给药提高生物利用度  52
    3.2 纯度与吸收的依赖关系  52-53
    3.3 双峰现象  53
    3.4 血样处理方法  53
    3.5 双波长检测  53-54
    3.6 小结  54-55
全文总结  55-56
参考文献  56-59
综述  59-69
  中药有效部位药代动力学的研究进展  59-69
致谢  69-70
论文发表情况  70

吴茱萸提取物的制备及其纯度与大鼠体内吸收的关系研究

内容摘要

全文目录

相似论文