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神经酰胺通过Akt1/Foxo3a信号通路诱导卵巢癌细胞自噬及其机制的研究
作 者: 郑朗
导 师: 汪宏波
学 校: 华中科技大学
专 业: 妇产科
关键词: C2-神经酰胺 Akt1 自噬 Foxo3a LC3 Beclin1
分类号: R737.31
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 71次
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内容摘要
目的:1.研究神经酰胺(C2-ceramide,Cer)作用下,Beclin1,LC3,Akt1,Foxo3a在卵巢癌细胞中的表达2.探讨Cer/Akt1/Foxo3a信号通路在卵巢癌发病机制中的作用。方法:1.应用MTT法检测在不同浓度C2-神经酰胺作用下,卵巢癌细胞的抑制率。2.应用FCM法检测不同浓度的C2-神经酰胺作用下,卵巢癌细胞的凋亡率。3.应用透射电镜观察在25μmol/L C2-神经酰胺作用下,卵巢癌细胞的自噬溶酶体。4.应用实时定量PCR法检测在25μmol/L C2-神经酰胺作用下Beclin1,LC3在卵巢癌细胞中的表达。5.应用Western blot法检测25μmol/L C2-神经酰胺作用下,Beclin1,LC3,Akt1,Foxo3a在卵巢癌细胞中的表达。结果:1.随着C2-神经酰胺浓度的增加,对卵巢癌细胞增殖的抑制越来越大,IC50为55.719μmol/L。2.卵巢癌细胞的凋亡对C2-神经酰胺具有浓度依赖,但小于25μmol/L C2-神经酰胺几乎不引起卵巢癌的凋亡。3.透射电镜观察25μmol/L C2-神经酰胺作用后卵巢癌细胞的自噬溶酶体数量显著增多。4. 25μmol/L C2-神经酰胺作用后Beclin1,LC3在卵巢癌细胞中mRNA和蛋白水平表达都是增加,LC3蛋白有两个亚基LC3Ⅰ和LC3Ⅱ, LC3Ⅰ,LC3Ⅱ表达都是增加,并且LC3Ⅱ高于LC3Ⅰ。5. 25μmol/L C2-神经酰胺作用下,p-Akt1(Ser473)蛋白表达减少;Foxo3a蛋白表达增加。结论:1. C2-神经酰胺可以通过Akt1/Foxo3a信号通路诱导卵巢癌细胞自噬性死亡。2. C2-神经酰胺可活化自噬相关基因Beclin1,LC3。
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全文目录
英文缩略词表 5-6 中文摘要 6-8 Abstract 8-10 第一章 前言 10-12 第二章 材料与方法 12-24 第三章 实验结果 24-31 第四章 实验讨论 31-34 第五章 实验结论 34-35 参考文献 35-37 文献综述 37-47 参考文献 43-47 致谢 47
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 卵巢肿瘤
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